The effects of inorganic salts, inoculum concentration, aeration rate and shaking speed on insoluble phosphate solubilization by Pseudomonas fluorescens RAF15 were investigated. Soluble phosphate production was dependent on the presence of $MgCl_2{\cdot}6H_2O$ and $MgSO_4{\cdot}7H_2O$ in the medium. Supplementation of medium with 0.01% $CaCl_2{\cdot}2H_2O$ and 0.01% NaCl slightly increased soluble phosphate production. The optimal medium compositions for the solubilization of insoluble phosphate by P. fluorescens RAF15 were 1.5% glucose, 0.005% urea, 0.3% $MgCl_2{\cdot}6H_2O$, 0.01% $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.01% $CaCl_2{\cdot}2H_2O$ and 0.01% NaCl, respectively. Optimal inoculum concentration was 2.0%(v/v). Maximum soluble phosphate production was obtained with 20-50 ml/250-ml flask and 200 rpm of shaking speed, respectively. The addition of EDTA decreased cell growth and soluble phosphate production.
본 연구에서는 식물 유래의 항암제인 taxol을 생산하는 주목세포의 현탁배양을 통하여 taxol 반합성의 전구체인 10-deacetylbaccatin III(10-DAB)의 생산을 증대시키고자 하였다. 이 차대사산물의 생산이 세포생장과 관련이 있으므로 세포생장이 우수한 배지를 선택하기 위한 실험을 수행하였고, SH 배지에서 가장 우수한 세포생장이 관찰되었다. 또한 선택된 SH 배지에서 우수한 세포생장과 10-DAB 생산을 얻기 위해 초기 접종농도와 당농도의 변화를 관찰하였다. 초기 접종농도와 당농도가 낮을수록 세포생장이 빠르며, 낮은 초기 당농도와 초기 접종농도 6 g/L FCW 이었을 때 10-DAB의 생산이 우수하였다. 생산성을 높이기 위한 고농도 세포생장과 배지로의 10-DAB 분비를 목적으로 perfusion culture를 도입하였다. 고농도 당을 첨가한 배지로 perfusion을 수행한 결과 배양 후반까지 세포생장이 가능하였고, FCW/DCW ratio가 감소되어 대조구의 2.5배인 34.67 g/L의 높은 세포농도를 얻을 수 있었다. 10-DAB의 생산은 perfusion 시작후 10일 동안은 배지로 배출된 양이 세포내보다 높았다.
To establish in vivo antiviral evaluation system by using murine herpesvirus intracerebral infection model, 5-6 female BALB/c mice per group aged 5 weeks were inoculated i.c. into cerebrum with different inocular HSV-1 F. Signs of clinical disease noted everyday for one month. Observed were body weight decrease, neurological signs and death caused by encephalitis. Mice discontinued body weight decrease were recovered from the disease, and keratitis was often observed during recovery. The groups inoculated with higher than 1,000 PFU showed 100% mortaltiy and $LD_{50}$ was <100 PFU/mouse. To study the effect of virus inoculum sizes on antiviral effect of acyclovir (ACV), mice inoculated with different inocula were administered i.p. with different doses of ACV immediately after infection, and twice a day for 5 days. The higher inculum size, the less protective. $ED_{50}$ of ACV was >25, >25, 18.4 and 8.0 mg/kg b.i.d. in the group infected with 1,000,000, 100,000, 10,000 and 1,000 PFU/mouse, respectively. $LD_{50}$ of ACV was 62.5 mg/kg b.i.d. Therapeutic index of ACV was <2.5, <2.5, 3.0 and 7.0 in the groups with inocula 1,000,000, 100,000, 10,000 and 1,000 PFU/mouse, respectively. Inoculum size 1,000 PFU/mouse showing 100% mortaltiy and 5-6 days mean time to death, 5 days drug administration and 14 days observation will be future experimental conditions.
The in vitro antibacterial activity of DWP20367 (1-Cyclopropyl-6-fluoro-8-chloro-7-(2,7-diazabicyclo[3,3,0]oct-4-ene-7-yl)-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxylic acid), a new broad-spectrum fluoroquinolone, was compared with those of ciprofloxacin (CPFX), sparfloxacin (SPFX) and ofloxacin (OFLX). DWP20367 was showed antibacterial activity much higher than CPFX, SPFX and OFLK against gram-positive bacteria, while it was slightly more superior to quinolones against gram-negative bacteria. DWP20367 was particularly effective against MRSA, and its $MlC_{90}$ against clinical isolates of methicillin-susceptible S. aureus, low methicillin-resistant S. aureus and high methicillin-resistant S. aureus were 0.098, 0.781 and 1.563 micro g/ml, respectively. Against S. pneumoniae, MIC90 of DWP20367 was 2- to 8-fold higher than those of CPFX. With a view of MIC90, DWP20367 showed slightly more potent activity against P. aeruginosa and E. coli isolates than the control quinolones. DWP20367 activity was not affected by inoculum size and medium pH. But addition of $Mg^{2+}, \;Ca^{2+} $Mg2+, Ca2+ or horse serum (25%) decreased its antibacterial activity. DWP20367 was showed rapidly bactericidal activity within 2 to 4 h, and regrowth was not observed even after 24 h incubation at concentrations near the 4-fold of MIC.
The in vitro antibacterial activity of DWP20418 (1R, 5S, 6S)-6-[1-(R)-Hydroxyethyl)-l-methyl-2-[(2S,4S)-2-(piperazinylcarbonyl)-1-(R)-hydroxyethyl)pyrrolidine-4-thio]carb apen-2-em-3-carboxylic acid), a new carbapenem antibiotic, was compared with those of imipenem (IPM) and meropenem (MEPM). DWP20418 was comparable or slightly more superior to MEPM against gram-positive bacteria, and it showed more potent activity to IPM against gram-negative bacteria. DWP20418 was particularly active against MRSA, and its $MIC_{90}$ of methicillin-susceptible S. aureus, low methicillin-resistant S. aureus and high methicillin-resistant S. aureus were 0.391, 25 and 50 ${\mu}g/ml$, respectively. With a view of $MIC_{90}$, DWP20418 was comparable than the other carbapenems against P. aeruginosa and E. coli isolates. The activity of DWP20418 was not affected in the presence of $Mg^{2+},\;Ca^{2+}$ or horse serum. But inoculum size and alterations in pH of medium affected its antibacterial activity. DWP20418 showed rapidly bactericidal activity within 1h, and regrowth was not observed even incubation of 24hrs at the concentrations near the MIC.
Park, Seon-Hee;Bae, Dong-Won;Lee, Joon-Taek;Chung, Sung-Ok;Kim, Hee-Kyu
The Plant Pathology Journal
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제15권3호
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pp.162-167
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1999
Integration of microbial antagonists with fungicides was tried to control the gray mold caused by Botrytis cinerea on pepper in greenhouse conditions and to reduce fungicide uses. All of the selected bacterial antagonists, Bacillus amyloliquefaciens BL3, Paenibacillus polymyxa BL4, and Pseudomonas putida Cha94, completely inhibited the conidial germination of B. cinerea until 30 days after treatment. However, bacterial colonization of pepper phylloplane was poor in BL4, while the other bacterial isolates and the fungal antagonist Trichoderma harzianum TM colonized well on the phylloplane, maintaining the population density of 104-105 cfu/g until 15 days after microbial treatments. Out of 13 kinds of selected fungicides used for gray mold diseases, polyoxin B and BKF 1995 showed the most discriminatory activity on the fungal growth between B. cinerea and TM. TM grew readily on the media containing those fungicides, while B. cinerea showed poor or no mycelial growth on them. The selected fungicides and antagonists alone reduced incidence of gray mold on pepper, showing disease indices of about 2.4 to 3.0, while its was increased up to 4.2 in the untreated control. Alternate treatments with the antagonists and 2-fold diluted fungicides inhibited the disease incidence as much as the antagonists or fungicides alone, and reduced the secondary inoculum more than the single treatments. This suggests that integration of antagonists and fungicides may be an efficient way to reduce fungicide sprays with reliable control efficacy of the disease. However, there was not much difference in the early and mid-term disease progress among the treatments and the untreated control, probably due to extremely favorable environmental conditions for the disease development in this experiment.
우리나라에서 발생하는 뿌리혹선충의 주요 종인 Meloidogyne hapla, M. arenaria, M. incognita 그리고 M. javanioa의 피해정도를 알기 위하여 pot당 0, 1,000, 10,000마리의 선충접종한 결과 감수정도는 M. javanica($Rutgers\;:\;80\%$, 복수2호 : $59\%$), M. incognita(Rutgers : $78\%$, 복수 2호 : $50\%$, M. arenaria($Rutgers\;:\;65\%$, 복수2호 : $24\%$), M. hapla($Rutgers\;:\;7\%$, 복수2호 : $15\%$)의 순이었고, M. hapla는 아열대인 필리핀에서의 Rutgers보다 우리나라에서의 Boksu 2에서 더 심한 피해를 나타내는 반면 M. arenaria, M. incognita 및 M. javanica는 필리핀에서의 Rutgers에서 더 피해가 심했다. 토마토의 생육에 미치는 영향은 풋트당 선충 10,000마리 접종구에서 Rutgers의 지상부 무게가 뿌리 무게나 초장보다 더 컸지만 선충 밀도가 낮은 1,000마리 접종구에서는 초장이나 지상부 무게가 감소하는 반면 뿌리 무게는 오히려 증가하는 경향이었다.
생물학적 복구법의 효율은 미생물 균수의 계수, 호흡율, 분해율 등으로 측정할 수 있으며 부작용 시험은 Daphnia,굴의 유충, 무지개 송어 를 사용하여 측정된다. On-Site처리에 있어서는 산소 전달이 문제가 되는데 이에는 과산화 수소가 사용될수 있으며(벤젠계통의 용매), 유류오염 방제시에는 친유화적 질소 및 인을 첨가할 수 있다. 접종균주는 혼합균주 또는 순수 균주가 사용되는데 후자에는 Pseudomonas와 Phaneochate 등이 있다. 때로는 효울을 높이기 위해 효소를 첨가 하거나 광분해법과 병용되기도 한다. 토양의 유류오염물질, 예컨대 폐윤활유, 기계유, 오일 슬러지들을 처리할때는 토양상부 15∼20cm를 갈고 유류오염물질을 5%의 농도로 주입한다. 이 때 적정 pH는 7∼8, 탄화수소 질소 = 100 : 1, 탄화수소 : 인 = 800 : 1이며 적절한 배수가 필요하다. 지하 유류오염물질의 처리에 있어서는 특히 다량의 산소가 필요하며 해양유류오염물질의 처리에 있어서는 친유화성 비료를 첨가하면 효과가 있다 생물학적 복구법에 의해 대기오염물질 특히, 악취 물질을 처리할 수 있는데 반응기로는 생물여과법과 생물세정기가 쓰인다.
버들송이의 액체종균 제조를 위한 배양조건과 종균으로 사용시의 접종량을 검토하기 위한 시험 결과 배지 종류로는 감자추출배지(PSB)가 가장 좋았으며 온도는 $25^{\circ}C$, pH는 7.0에서 좋았다. 접종량별로는 $10{\sim}15ml$ 접종한 것이 우수하였다. 버들송이의 액체종균은 13l들이의 간이배양 장치를 제작하여 감자추출배지 10l에 10일간 배양후 균체건조량 21.8 g을 얻었다. 이를 병재배용 850 ml PP병의 톱밥배지에 10m1(균체량 21.8mg상당)씩 접종한 결과 배지 배양기간은 30일로써 톱밥종균을 사용할 때 보다 5일이 단축되었다. 또한 버섯발생병은 톱밥종균을 사용할 때의 75%에 비하여 92%로 높아졌고 자실체 수량도 122g으로 톱밥종균보다 10% 증수되었다. 따라서 본 액체종균 배양기술은 버섯 병재배 시설을 활용한 버들송이의 연중 재배에 도입하므로써 안정된 버섯생산으로 농가소득 증대에 기여할 것으로 본다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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