This report described a simple, inexpensive, faster, and effective graft inoculation method for the artificial transmission of Mungbean yellow mosaic virus (MYMV). Success of grafting and disease transmission was 100% in this method. Screening of mungbean germplasm using this method will prevent the chance of escape infection, probably as a consequence of non-preference mechanism and loss of vector infectivity. The grafting method described here is applicable to both screenhouse and field trials.
An endophyte was isolated from the root nodule of alnus hirsuta. The isolated endophyte was identified as a Frankia sp. through morphological characteristics. Their infectivity and effectivity were confirmed by nitrogen-fixing root nodules induced on inoculated Alnus seedlings. Reisolated endophyte from the induced nodule showed identical morphological characteristics as the first isolate, showing the nodule was induced by the first isolate. Consequently, the first isolate was confirmed as a true symbiont of Almus hirsuta root nodule. The isolate was designated as a Frankia SNU 014201 strain.
Kim, In-Seop;Park, Yong-Woon;Lee, Sung-Rae;Lee, Mahl-Soon;Huh, Ki-Ho;Lee, Soungmin
Journal of Microbiology
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v.39
no.1
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pp.67-73
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2001
A validation study was conducted to evaluate the efficacy and mechanism of the cryo-precipitation, monoclonal anti-FVIIIc antibody (mAb) chromatography, Q-Sepharose chromatography, and lyophilization steps involved in the manufacture of high purity factor VIII (GreenMono) from human plasma, in the removal and/or inactivation of hepatitis A virus (HAV). Samples from the relevant stages of the production process were spiked with HAV and subjected to scale-down processes mimicking the manufacture of the high purity factor VIII concentrate. Samples were collected at each step and immediately titrated using a 50% tissue culture infectious dose (TCID$\_$50/) and then the virus reduction factors were evaluated. HAV was effectively partitioned from factor VⅢ during cryo-precipitation with the log reduction factor of 3.2. The mAb chromatography was the most effective step far removal of HAV with the log reduction factor of $\geq$4.3. HAV infectivity was not detected in the fraction of factor VⅢ, while most of HAV infectivity was recovered in the fractions of flow through and wash during mAb chromatography. Q-Sepharose chromatography showed the lowest efficacy for partitioning HAV with the log reduction factor of 0.7. Lyophilization was an effective step in inactivating HAV with the log reduction factor of 2.3. The cumulative lag reduction factor, $\geq$10.5, achieved for tile entire manufacturing process was several magnitudes greater than the potential HAV load of current plasma pools.
The pathogenicity to pear trees and other experimental hosts of the Apple stem grooving virus Korean isolate (ASGV-K) carried by a fungal vector, Talaromyces flavus was examined. ASGV-harboring T. flavus induced mild symptoms on virus-free pears. Symptom severity was intermediate between pears showing typical PBNLS and virus-free pears. Ten cultivars of Phaseolus vulgaris showed 35%-90% infectivity by direct infiltration into leaves and roots by ASGV-harboring T. flavus. Application of fungal cultures to soils showed 0%-70% infectivity depending on the P. vulgaris cultivar. Sap extracted from ASGV-infected Chenopodium quinoa induced similar symptoms on P. vulgaris at 25 days after inoculation. Similar symptoms were also detected on P. vulgaris which were inoculated with ASGV-harboring T.flavus. When healthy P. vulgaris leaves were challenged with sap extracted from P. vulgaris leaves infected with ASGV-harboring T. flavus, typical symptoms were observed. These data suggest that T. flavus mediates the transfer of ASGV to host plants.
Kim, Eunji;Seo, Yunhee;Kim, Yong Su;Park, Yong;Kim, Young Ho
The Plant Pathology Journal
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v.33
no.1
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pp.66-74
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2017
This study was conducted to examine infectivity (penetration and gall and egg-mass formations) of the root-knot nematodes, Meloidogyne incognita and M. hapla, on carrots grown in soil conditions of 5 different soil textures consisting of bed-soil (b) and sand (s) mixtures (b-s mixtures) at the ratios of 10:0, 7:3, 5:5, 3:7, and 0:10. For M. incognita, the nematode penetration rates in b-s of 0:10 (100% sand) were significantly higher than in the other b-s mixtures, more greatly at 2 and 5 days after inoculation than at 10 DAI, while no significant differences in the penetration rates were mostly shown for M. hapla at the above DAI. However, for both nematodes, gall and egg-mass formations were remarkably increased in the b-s mixture of 0:10, compared to the other b-s mixtures, which is coincided with the general aspects of severe nematode infestations in sandy soils. This suggests the increased gall and egg-mass formations of M. incognita should be derived from the increased penetration rates in the sandy soil conditions, which provide a sufficient aeration due to coarse soil nature for the nematodes, leading to their mobility increased for the enhanced root penetration. For M. hapla, it is suggested that the sandy soil conditions affect positively on the healthy plant growth with little accumulation of the inhibitory materials and sufficient aeration, enhancing the nematode growth and feeding activities. All of these aspects provide information reliable for the development screening techniques efficient for the evaluation of the nematode resistance in the breeding programs.
A $0.45-{\mu}m$ membrane filter is generally used to remove bacterial contamination during virus extraction from fish samples. However, the number of fish viruses is drastically reduced after filtration with a $0.45{\mu}m$ filter. In this study, we investigated the effect of filters on virus infectivity titer and the change in virus titer and bacterial number following different centrifugation conditions to determine a suitable procedure for virus extraction from fish samples. $10^{4.05}$ and $10^{5.05}TCID_{50}/ml$ of infectious hematopoietic necrosis virus (IHNV) and $10^{4.05}$ and $10^{4.55}TCID_{50}/ml$ of Oncorhynchus masou virus (OMV) were not detectable after filtration with two types of $0.45-{\mu}m$ filters, except the IHNV titer was reduced by about 10 fold after filter use (company A). No significant difference was found in the virus titer following centrifugation at $880{\times}g$ (30 min) or $3,500{\times}g$ (30 min), whereas IHNV and OMV titers were reduced by about 10 and 10-1000 fold by centrifugation at $14,000{\times}g$ (30 min) and $14,000{\times}g$ (10 and 30 min), respectively. A total of 97.7-99.9% Escherichia coli were eliminated by centrifugation at $880 {\times}g$ (30 min) and $3,500{\times}g$ (30 min). These results show that fish viruses were affected by filtering, even though the effect differed by virus species and filter type. Therefore, centrifugation at $3,500{\times}g$ (30 min) and use of medium with antibiotics may be useful for virus extraction along with a reduction in bacteria.
In this study, we have tested whether the retrovirus vector system is applicable in transgenic cattle production. To overcome low infectivity of currently available retrovirus vector system we have directly microinjected retrovirus-producing cells into the perivitelline space of the day 1.5 embryos. The virus-producing cell line was designed to release replication-defective retrovirus encapsidated with Gibbon ape leukemia virus (GaLV) envelope protein. E. coli LacZ gene was used as a marker gene to facilitate evaluation of the transgene expression and X-gal staining at morula or blastocyst stage resulted in expression of E. coli LacZ gene The results in these experiments were summarized as follows : 1. The lowest concentration of polybrene necessary for efficient virus infection was Sf' g/ml. 2. Development rate from day 1.5 embryos microinjected with virus-producing cells to the morulae /blastocysts was 29%. 3. 21% of the morulae /blastocysts were LacZ+. 4. There was no evidence that the retrovirus-producing cells used in this study produced replication-competent retrovirus.
Present study was performed to investigate the host-parasite relationship of the Korean Trichinella isolate (KTI). In the experiment to observe the infectivity of KTI to several kinds of animals, the reproductive capacity index (RCT) was highest in cats, and that in mice, hamsters and rats was followe4 in descending order. However, birds, i.e. wild goose and chicken, did not infect with KTI. The number of larvae per a gram of muscle (LPG: 377) was highest in the tongue of cats experimentally infected with KTI larvae. LPG in the diaphragm, anterior leg, back, posterior leg and abdominal muscles were 313, 246, 234, 225 and 170 respectively. Muscle larvae recovered at 55 days after infection were revealed the highest infectivity (RCI: 137.2) in mice. RCI was comparatively low in the mice infected with less than 25 day-old and more than 300 day-old larvae. In the experiment to observe the susceptibility of KTI by the mouse strain, ICR (RCI: 137.2), C57BL/6 (RCI: 108.8), DBA/2 (RCI: 107.1), C3H (RCI: 98.7), BALB/c (RCI: 96.9), FVB (RCI: 96.1) and B6C3F1 (RCI: 85.3) were very susceptible. However, BDF1 (RCI: 57.7) and CBA (RCI. 57.1) were revealed the moderate susceptibility, and B6CBAF1 (RCI: 23.1) was shown the lowest. The infection sites of adults were posteriorly transferred in the small intestine of experimental mice according to the infection periods of muscle larvae. The infection characteristics of KTI observed in this study may be useful as the basic data in the advanced studies, furthermore in the study of other Trichinella isolates.
Kim, Ki-Hong;Yie, Jae-Hyun;Joo, Kyoung-Hwan;Lee, Joon-Sang;Rim, Han-Jong
Journal of agricultural medicine and community health
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v.14
no.1
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pp.44-53
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1989
The distribution pattern of Clonorchis sinensis metacercaria in Pseudorasvora parva population and correlation between P. parva and metacercaria of C. sinensis were studied. The surveved areas were Chomanpo and Bulamdong, Kim-Hae Gun which were endemic area of clonorchiasis, and wansa, Sa-Chon Gun, Souh Kyong-Sang Do. The results are as follows: 1) The areas of Chornanpo and Wansa showed high infectivity in 99-100% of infection rate and 282-308 of average infection number per-fish. But the area of Bulamdong showed relatively. low infectivity in 95.8% of infection rate and 44 of average infection number. 2) The distribution patterns of C. sinensis metacercaria in P. parva population which were collected in Chomanpo and Wansa were shown Poisson distribution and the distribution pattern in Bulamdong showed mid-pattern of shifting over from Poisson distribution to Negative binomial distribution. 3) The correlation between P. parva length and average number of C. sinensis metacercaria in the present studied areas represented as direct proportion relationship.
To understand how human cytomegalovirus (HCMV) might change and evolve after reactivation, it is very important to understand how the nucleotide sequence of cultured HCMV changes after in vitro passaging in cell culture, and how these changes affect the genome of HCMV and the consequent variation in amino acid sequence. Strain JHC of HCMV was propagated in vitro for more than 40 passages and its biological and genetic changes were monitored. For each passage, real-time PCR was performed in order to determine the genome copy number, and a plaque assay was employed to get virus infection titers. The infectious virus titers gradually increased with passaging in cell culture, whereas the number of virus genome copies remained relatively unchanged. A linear correlation was observed between the passage number and the log10 infectious virus titer per virus genome copy number. To understand the genetic basis underlying the increase in HCMV infectivity with increasing passage, the whole-genome DNA sequence of the high-passage strain was determined and compared with the genome sequence of the low-passage strain. Out of 100 mutations found in the high-passage strain, only two were located in an open reading frame. A G-T substitution in the RL13 gene resulted in a nonsense mutation and caused an early stop. A G-A substitution in the UL122 gene generated an S-F nonsynonymous mutation. The mutations in the RL13 and UL122 genes might be related to the increase in virus infectivity, although the role of the mutations found in noncoding regions could not be excluded.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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