• Title/Summary/Keyword: in situ crosslinking

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Preparation of Pore-filled Anion-exchange Membrane with PVDF and Poly(vinylbenzylchloride)

  • Park, Byungkyu;Byungpyo Hong;Kwangsoo Yu;Hongsik Byun
    • Proceedings of the Membrane Society of Korea Conference
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    • 2004.05a
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    • pp.207-210
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    • 2004
  • The pore-filled anion-exchange membranes were prepared in this study with an asymmetric poly(vinylidene fluoride)(PVDF) membrane as a nascent membrane and poly(vinylbenzyl chloride)(PVBCl) as a polyelectrolyte. The solution of PVBCI having the chloromethylate aryl ring of 80 percents and 1,4-diaminobicyclo [2,2,2]octane(DABCO) was made with the solvent of tetrahydrofuran(THF) and N,N-Dimethylformamide(DMF), which is in the rotio of 8:2. A new preparation method in this study, i.e. in-situ crosslinking, enabled us to produce the pore-filled membranes without change of size, and to control the properties of final membrane with various degree of cross-linking. From the result of surface morphologies of SEM and AFM the polyelectrolyte exists in the pores of nascent membrane as a certain configuration. From the investigation of the solvent affecting much to the permeability and rejection, it was found. that the membranes using DMF and THF showed better performances than the membranes produced by THF only. The water permeability of the final membrane at low pressure(100㎪) showed a typical ultrafiltation membrane's permeability (8-10kg/㎡hr) and good values of rejection(55∼60 percent).

Salmonella Promotes ASC Oligomerization-dependent Caspase-1 Activation

  • Hwang, Inhwa;Park, Sangjun;Hong, Sujeong;Kim, Eun-Hee;Yu, Je-Wook
    • IMMUNE NETWORK
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    • v.12 no.6
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    • pp.284-290
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    • 2012
  • Innate immune cells sense and respond to the cytoplasmic infection of bacterial pathogens through NLRP3, NLRC4 or AIM2 inflammasome depending on the unique molecular pattern of invading pathogens. The infection of flagellin- or type III secretion system (T3SS)-containing Gram-negative bacteria such as Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. typhimurium) or Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) triggers NLRC4-dependent caspase-1 activation leading to the secretion of proinflammatory cytokines such as interleukin-1-beta (IL-$1{\beta}$) and IL-18. Previous studies have shown that apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD (ASC) is also required for Salmonella-induced caspase-1 activation, but it is still unclear how ASC contributes to the activation of NLRC4 inflammasome in response to S. typhimurium infection. In this study, we demonstrate that S. typhimurium triggers the formation of ASC oligomer in a potassium depletion-independent manner as determined by in vitro crosslinking and in situ fluorescence imaging. Remarkably, inhibition of potassium efflux failed to block Salmonella-promoted caspase-1 activation and macrophage cell death. These results collectively suggest that ASC is substantially oligomerized to facilitate the activation of caspase-1 in response to S. typhimurium infection. Contrary to NLRP3 inflammasome, intracellular potassium depletion is not critical for NLRC4 inflammasome signaling by S. typhimurium.

Thermal Properties and Microencapsulation of a Phosphate Flame Retardant with a Epoxy Resin (에폭시 수지를 이용한 인계 난연제의 마이크로캡슐화 및 열적 특성 연구)

  • Baek Kyung-Hyun;Lee Jun-Young;Hong Sang-Hyun;Kim Jung-Hyun
    • Polymer(Korea)
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    • v.28 no.5
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    • pp.404-411
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    • 2004
  • The microcapsules containing triphenyl phosphate (TPP), a flame retardant, were prepared by phase-inversion emulsification technique using the epoxy resin (Novolac type) with excellent physical properties and network structure. This microencapsulation process was adopted for the protection of TPP evaporation and wetting of polymer composite during the polymer blend processing. The TPP, epoxy resin and mixed surfactants were emulsified to oil in water (O/W) by the phase inversion technology and then conducted on the crosslinking of epoxy resin by in-situ polymerization. The capsule size and size distribution of TPP capsules was controlled by mixed surfactant ratio, concentration and TPP contents, The formation and thermal property of TPP capsules were measured by differential scanning calorimetry and thermogravimetric analysis. The morphology and size of TPP capsules were also investigated by scanning and transmission electron microscopies. As the surfactant concentration increased, the TPP capsules were more spherical and mono-dispersed at the same weight ratio of mixed surfactants (F127: SDBS).

Evaluation on Removal Efficiency of Methylene Blue Using Nano-ZnO/Laponite/PVA Photocatalyzed Adsorption Ball (Nano-ZnO/Laponite/PVA 광촉매 흡착볼의 메틸렌블루 제거효율 평가)

  • Oh, Ju Hyun;Ahn, Hosang;Jang, Dae Gyu;Ahn, Chang Hyuk;Lee, Saeromi;Joo, Jin Chul
    • Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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    • v.35 no.9
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    • pp.636-642
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    • 2013
  • In order to overcome drawbacks (i.e., filtration and recovery) of conventional powder type photocatalysts, nano-ZnO/Laponite/PVA (ZLP) photocatalyzed adsorption balls were developed by using in situ mixing of nanoscale ZnO as a photocatalyst, and Laponite as both adsorbent and supporting media in deionized water, followed by the poly vinyl alcohol polymerization with boric acid. The optimum mixing ratio of nano-ZnO:Laponite:PVA:deionized water was found to be 3:1:1:16 (by weight), and the mesh and film produced by PVA polymerization with boric acid might inhibit both swelling of Laponite and detachment of nanoscale ZnO from ZLP balls. Drying ZLP balls with microwave (600 watt) was found to produce ZLP balls with stable structure in water, and various sizes (55~500 ${\mu}m$) of pore were found to be distributed based on SEM and TEM results. In the initial period of reaction (i. e., 40 min), adsorption through ionic interaction between methylene blue and Laponite was the main removal mechanism. After the saturation of methylene blue to available adsorption sites for Laponite, the photocatalytic degradation of methylene blue occurred. The effective removal of methylene blue was attributed to adsorption and photocatalytic degradation. Based on the results from this study, synthesized ZLP photocatalyzed adsorption balls were expected to remove recalcitrant organic compounds effectively through both adsorption and photocatalytic degradation, and the risks of environmental receptors caused by detachment of nanoscale photocatalysts can be reduced.

Control of Trophoblast Gene Expression and Cell Differentiation

  • Cheon, Jong-Yun
    • 대한생식의학회:학술대회논문집
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    • 2001.03a
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    • pp.195-205
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    • 2001
  • 태반 영양배엽 (trophoblast)은 포유동물의 발생과정 중 가장 먼저 분화되는 세포로서, 자궁환경내에서 배아가 착상, 발생, 및 분화하기 위해서 반드시 필요한 태반을 형성하는 색심적인 세포이다. 영양배엽 세포의 분화과정중의 결함은 배아의 사산이나 임신질환 등의 치명적 결과를 초래한다. 하지만, 영양배엽 세포의 분화를 조절하는 분자생물학적인 메카니즘은 아직 규명되지 않고 있다. 영양배엽 세포의 분화를 조절하는 경로를 규경하기 위한 선결과제는 분화된 영양배엽 세포에서만 발현하는 많은 유전자들이 밝혀져야만 한다. 본 연구팀은 최근에 분화된 영양배엽 세포에서만 발현하는 두 종류의 새로운 유전자들을 찾았다. 한 종류는 homeobox를 보유하고 있는 조절 유전자 Psx이고, 다른 한 종류는 임신호르몬인 태반 프로락틴 라이크 단백질 유전자 PLP-C${\beta}$이다. 본 연구과제의 목표는 이들 유전자의 기능과 조절 메카니즘을 규명함으로써, 영양배엽 세포의 분화를 조절하는 조절경로를 밝히는 것이다. 이를 위하여 다음과 같은 일련의 연구를 수행할 것이다. 1) Psx 유전자가 분화된 영양배엽 세포에서만 발현케 하는 조절 메카니즘을 규명하기 위해 functional assays, in vitro footprinting, gel mobility shift assays, 생쥐형질전화, UV crosslinking, Southwestern blot 등의 방법을 통해 Psx 유전자의 cis-acting 요인과 trans-acting factor를 밝혀 분석한다. 2) 영양배엽 세포의 분화조절 경로를 규명하기 위해 random oligonuclotide library screening, DD-PCR, subtractive screening 등의 방법을 이용하여 Psx 유전자에 의해 조절되는 하부유전자를 밝힌다. 3) Psx 유전자를 knock-out시켜 영양배엽 세포가 발달 및 분화하는데 미치는 역할을 밝힌다. 4) Yeast two-hybrid screening방법을 이용하여 태반 프로락틴 유전자의 수용체를 찾아 이들의 신호전달 기전을 밝힌다. 제1차년 연구결과로서, mouse와 rat으로부터 각각 Psx 유전자의 genomic DNA를 클로닝하여, 유전자 구조를 비교한 결과, mouse Psx (mPsx2)는 4개의 exons으로 이루어져 있는 반면에, rat Psx (Psx3)는 3개의 exons으로 구성되어 있었다. 즉, rPsx3는 mPsx2의 exon1이 없었다. Notrhern blot과 in situ hybridization 분석에 의해 mouse와 rat에서 Psx 유전자가 다르게 발현 조절되는 현상을 밝혔다. 실제로 mPsx2와 rPsx3의 5'-flanking지역을 클로닝하여 염기서열 분석 결과 전혀 homology를 찾을 수 없었다. 또한, 이들 각각 promoter의 activity를 luciferase reporter를 이용하여 조사한 결과 Rcho-1 trophoblast cells에서 각기 다른 activity를 보여 주는 것을 발견하였다. Psx 유전자의 transcription start sites는 Primer extension에 의해 밝혔다. 또한 Psx2 유전자를 knock-out 시키기 위해 targeting vector를 Osdupde1에 제작하였다. 본 과제를 시작할 때 새로운 프로락틴 유전자 하나를 클로닝하여 이 유전자를 PLP-I라고 이름을 붙였다. 이 후 이 유전자 (PLP-I)는 PLP-C${\beta}$라고 이름을 붙이게 되었다. Mouse PLP-C${\beta}$ 유전자의 counterpart를 rat에서 찾아 염기서열을 비교한 결과 mouse와 rat에서 PLP-C${\beta}$유전자의 homology는 약 79% (amino acid level)였다. 본 연구과정을 통해 또 하나의 새로운 PLP-C subfamily member를 mouse로부터 클로닝 하였고, 이 유전자를 PLP-C${\gamma}$라 하였다. PLP-C${\beta}$와 PLP-C${\gamma}$의 발현 유형은 Northern blot과 in 냐셔 hybridization 분석에 의해 태반의 제한된 spongitrophoblast와 trophoblast giant cells에서만 발현하는 것을 밝혔다. 놀랍게도 이들 두 새로운 유전자는 alternative splicing에 의해 두 종류의 isoform이 있음을 밝혔다. PLP family member 유전자로서 splicing에 의한 isoforms을 보여 주는 유전자로는 PLP-C${\beta}$와 PLP-C${\gamma}$가 최초이다. 이들 isoform mRNAs의 발현 유형은 RT-PCR 방법을 이용하여 규명하였다. 또 하나의 새로운 발견은 PLP-C${\beta}$와 PLP-C${\gamma}$가 독특한 유전자 구조를 갖고 있었다. 즉, PLP-C${\beta}$는 exon3의 alternative splicing에 의해 5개 혹은 6개의 exons을 갖는 two isoforms이 생긴다. 반면에 PLP-C${\gamma}$는 exon2가 alternative splcing이 되면서 7개의 exons을 갖거나 6개의 exons을 갖는 isoforms을 만든다. 그리고, PLP-C${\gamma}$의 promoter activity를 trophoblast Rcho-l${\gamma}$ 세포주를 이용하여 PLP-C${\gamma}$ 의 1.5 kb 5'-flanking 지역이 trophoblast-specific promoter activity를 갖고 있음을 밝혔다. PLP-C${\gamma}$ 유전자의 transcription start site는 Primer extension에 의해 밝혔다. 제 1차 년도의 연구결과를 토대로, 2차년에서는 다음단계의 연구를 수행하고자 한다. 즉, 1) mPsx2와 rPsx3의 promoter를 비교분석 함으로서 mouse와 rat에서 Psx 유전자가 다르게 조절되는 메카니즘 규명, 2) Psx와 PLP-C 유전자의 promoter에 있는 cis-acting elements 탐색, 3) Psx2와 Psx3의 단백질을 이용하여 이들이 binding하는 target sequence 규명, 4) 제작한 Psx2 targeting vector를 이용하여 ES cells에서 Psx2 유전자 knock-out, 5) Psx 유전자를 과발현시키는 세포주를 만들고 Psx에 의해 조절되는 유전자 탐색, 6) 새로 밝히 PLP-C members 유전자들의 조절기전을 Rcho-1 세포주를 이용하여 여러 거지 성장인자와 다른 호르몬에 대한 반응을 탐색, 7) Psx와 PLP-C${\gamma}$ 유전자의 chromosomal mapping 등을 밝힐 것이다.

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