A soluble Cr(VI) reductase was purified from the cytoplasm of Escherichia coli ATCC 33456. The molecular mass was estimated to be 84 and 42 kDa by gel filtration and SDS-polyacrylamide gel electrophoresis, respectively, indicating a dimeric structure. The pI was 4.66, and optimal enzyme activity was obtained at pH 6.5 and $37^{\circ}C$. The most stable condition existed at pH 7.0. The purified enzyme used both NADPH and NADH as electron donors for Cr(VI) reduction, while NADPH was the better, conferring 61% higher activity than NADH. The $K_m$ values for NADPH and NADH were determined to be 47.5 and 17.2 umol, and the $V_max$ values 322.2 and 130.7 umol Cr(VI) $min^{-1}mg^{-1}$ protein, respectively. The activity was strongly inhibited by N-ethylmalemide, $Ag^{2+},\;Cd^{2+},\;Hg^{2+}$, and $Zn^{2+}$. The antibody against the enzyme showed no immunological cross reaction with those of other Cr(VI) reducing strains.
Korean mistletoe Lectin (KML-C) is composed of A and B sub-chain. B chain binds to carbohydrates on cell surface and A chain hinders translation and induces an apoptosis as a RIP (ribosome inactivating protein). KML-C has very strong biological activities, it has seriously limits to use as a cancer therapy or adjuvant because of its toxicity to normal cells. This study is therefore conducted to see if B chain of KML-C might have immunological activity, especially adjuvant activities with less toxicity. We isolated B chain from KML-C using the lactose affinity chromatography, and examined their immunoadjuvant activity. The isolated B-chain did not show any cytotoxicity against tumor cell, RAW264.7, and P388D1 while KML-C had a very strong toxicity. This non-toxic effect was observed also by in-vivo study. Both humoral and cellular immunities were observed ; the antibody titer was increased when the mice were immunized with B-chain used as adjuvant like Freund's adjuvant, indicating that B chain of mistletoe lectin alone might be used for adjuvant; it also increased DTH in cellular immunity. These results suggest that B-chain of KML-C might be used for adjuvant used for the production of antibody or vaccine with less toxicity.
Kwon, Da Hye;Cheon, Ji Min;Choi, Eun-Ok;Jeong, Jin Woo;Lee, Ki Won;Kim, Ki Young;Kim, Sung Goo;Kim, Suhkmann;Hong, Su Hyun;Park, Cheol;Hwang, Hye-Jin;Choi, Yung Hyun
Journal of Cancer Prevention
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제21권3호
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pp.144-151
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2016
Background: Immunoregulatory elements have emerged as useful immunotherapeutic agents against cancer. In traditional medicine, Mori folium, the leaf of Morus alba L. (Moraceae), has been used for various medicinal purposes; however, the immunomodulatory effects have not been fully identified. We evaluated the immunoenhancing potential of water extract of Mori folium (WEMF) in murine RAW264.7 macrophages. Methods: RAW264.7 cells were treated with WEMF for 24 hours and cell viability was detected by an MTT method. Nitric oxide (NO) levels in the culture supernatants were assayed using Griess reagent. The productions of prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) and immune-related cytokines was measured using ELISA detection kits. The mRNA and protein expression levels of Inducible NO synthase, COX-2, and cytokines were assayed by reverse transcription-PCR and Western blotting, respectively. The effect of WEMF on phagocytic activity was measured using a Phagocytosis Assay Kit. Results: WEMF significantly stimulated the production of NO and $PGE_2$ as immune response parameters at noncytotoxic concentrations, which was associated with the increased expression of inducible NO synthase and COX-2. The release and expression of cytokines, such as $TNF-{\alpha}$, interleukin $(IL)-1{\beta}$, IL-6, and IL-10, were also significantly increased in response to treatment with WEMF. Moreover, WEMF promoted the macrophagic differentiation of RAW264.7 cells and the resulting phagocytosis activity. Conclusions: WEMF has the potential to modulate the immune function by regulating immunological parameters. Further studies are needed to identify the active compounds and to support the use of WEMF as an immune stimulant.
Tertomotide는 항암제로 개발된 펩타이드 백신이다. 그러나 동물실험과 임상시험에서 염증성 증상이 완화되는 현상이 발견된바 있다. 이에 tertomotide가 항염물질로 작용하는지 확인하기 위하여 직접적인 항염활성과 그 작용기전을 조사하였다. 이를 위해 LPS 또는 PMA에 의해 활성화된 monocyte에 tertomotide를 처리한 후 염증성 cytokine 생산과 관련된 신호전달과정을 관찰하였다. Monocyte에서 tertomotide는 TNF-α, IL-1β, IL-8 등 염증성 싸이토카인의 생산을 감소시켰고 NF-κB 신호를 감쇄시켰으며 또한 TNF-α에 의한 ERK1/2와 P38 MAPK의 활성화를 저해하였다. 이 결과는 tertomotide 처치에 따른 염증성 질환 완화가 NF-κB/STAT3의 신호의 감쇄와 항염활성에 의한 것이라고 설명할 수 있고 이를 활용하여 신규 항염 약물의 도출이 가능할 것으로 판단된다. 이는 면역학적 활성을 목표로 계산화학적으로 설계된 물질의 생물학적 성질을 활용하여 새로운 약물을 도출하는 융합연구의 예시가 될 것이다.
1. CWPC중의 새로운 생리활성물질의 검색 Mouse 임파세포의 증식효과를 지표로 하는 면역기능을 검토하여 CWPC중의 면역 부활작용을 갖는 새로운 성분의 검색을 실시하였다. CWPC를 여러 가지 분획법으로 분획하여 mouse 임파세포의 증식효과를 지표로 면역 활성성분을 검색하였다. 그 결과 gel filtration, 음이온교환법을 사용하여 분획한 당을 다량 포함한 부분에 강한 면역 부활담당세포에 대하여 증식활성을 나타내는 물질을 발견하였다. 이 물질은 SDS-PAGE상에서 분자량이 약 16kDa에 위치하여 Ca, p및 당쇄를 포함한 물질이며, 이것을 GPP로 하였다. GPP에는 우유케이신의 trypsin분해물이며 Ca와 무기인을 풍부하게 포함하는 ${\beta}$-CPP와 유사한 phosphoserin 영역을 갖는 성분과 갖지 않는 성분의 2종류가 존재하며, 각각의 면역 부활활성이 인정되었다. 각 성분의 아미노산 분석, 당 분석의 결과에서 지금까지 보고된 우유중의 면역담당세포에 대한 증식활성을 갖는 물질과는 상이한 성분인 것으로 밝혀졌다. 더우기 이 활성물질(GPP)은 PP cell에서도 동등한 활성이 있는 것으로 판단되었다. 이러한 결과를 종합하여 보면 CWPC중에는 지금까지 알려지지 않았던 새로운 면역 부활물질이 존재하며, 그 성분에는 CPP와 유사한 phophoserine영역이 존재하는 성분이 포함되어 있고, N-글리코실 결합의 당쇄가 존재하는 것으로 시사되었다. 이 성분은 전신면역의 지표인 비장세포에 대해서만이 아니고, 장관면역계에 중요한 역할을 담당하는 PP Cell에서도 활성이 있는 것으로 보아 전신 및 국부적인 면역기능의 부활성분으로서 응용의 가능성이 시사되었다.
A 8-week feeding trial was conducted to investigate the effects of dietary supplementation of Kugija (Lycium chinense) on the growth and immunological response in juvenile Korean rockfish (Sebastes schlegeli). Six experimental diets were supplemented with Kugija at 0, 0.1, 0.5 1.0, 3.0 and 5.0% ($K_0,\;K_{0.1},\;Ko_{0.5},\;K_{1.0},\;K_{3.0},\;K_{5.0}$) on a dry-matter basis. After 2 weeks, triplicate groups of 30 fish initially averaging 3.36$\pm$0.2 g (mean$\pm$SD) were randomly distributed into the aquarium and were fed one of the experimental diets for 8 weeks. By the end of the 8-week feeding trial, fish fed the $K_{0.5}$ and $K_{1.0}$ diets exhibited a higher weight gain and specific growth rate than fish fed $K_0$ and $K_{0.1}$ diets (P<0.05). Feed efficiency of fish fed the $K_{0.5}$ diet showed significant higher value than that of fish fed the $K_0$, $K_{3.0}$ and $K_{5.0}$ diets (P<0.05). Hepatosomatic index of fish fed the $K_{0.5}$ diet was significantly higher than that of fish fed the $K_{0.1}$ and $K_{5.0}$ diets (P<0.05). Hematocrit of fish fed the $K_{0.5},\;K_{1.0}$ and $K_{5.0}$ diets was significantly higher than that of fish fed the $K_0$ diet (P<0.05). Glutamic oxaloacetic transaminase of fish fed the $K_{0.5},\;K_{1.0},\;K_{3.0}$ and $K_{5.0}$ diets was significantly lower than in fish fed the other diets (P<0.05). Glutamic pyruvic transaminase activity of fish fed the $K_{3.0}$ diet was significantly lower than those of fish fed the $K_0$ and $K_{0.1}$ diets (P<0.05). However, there was no significant difference in the activity of the transaminase in fish fed the $K_{0.5}\;K_{1.0},\;K_{3.0}$ and $K_{5.0}$ diets. Lysozyme activity of fish fed the $K_{0.5}$ and $K_{1.0}$ diets was significantly higher than that in fish fed the $K_0$ and $K_{0.1}$ diets (P<0.05). Respiratory burst activity of fish fed the $K_{3.0}$ diet was significantly higher than those of fish fed the $K_0$ and $K_{0.1}$ diets (P<0.05). However, there was no significant difference in respiratory burst activity of fish fed the $K_{0.5}\;K_{1.0},\;K_{3.0}$ and $K_{5.0}$ diets. Fish fed Kugija showed lower early mortality than fish fed a Kugija-free diet upon challenge with Vibrio ordalii. The results suggest that feeding of Kugija (Lycium chinense) enhances growth, non-specific immunity and disease resistance in juvenile Korean rockfish.
Objectives The purpose of this study was to investigate the effectiveness of the Gongjin-dan (Gongchen-dan, here in after GJD) in order to obtain the evidence for clinical application. Methods The GJD-related articles published from 1990 to 2013 were searched using "Korean Traditional Knowledge Portal", "Oriental Medicine Advanced Searching Integrated System (OASIS)", "Korean Association of Medical Journal Edition (Koreamed)", "Research Information Services (RISS4U)", "Korean Medicine Database (KMbase)", "National Discovery for Science Leader (NDSL)", "PubMed", "China National Knowledge Infrastructure (CNKI)". The search keywords were "Gongjin-dan", "Gongchen-dan". Thirty-nine articles were obtained. After excluding the eighteen article which did not meet inclusion criteria, finally twenty-one articles were included; five clinical articles and sixteen experimental articles. Results In clinical studies, GJD has the various effectiveness in cardiovascular diseases, alcoholic hepatitis, mild dementia, anemia. Also experimental studies related to the GJD show a variety of effects, such as anti-oxidative activity, neuroprotective activity, hepatoprotective activity, anti-inflammatory activity, immunological activity, reproductive recovery activity with fewer side-effects. Conclusions It has been suggested that there are various effects of GJD in treating a wide-range disease. However, in order to put GJD to use for many kinds of diseases in more reasonable ways, it is needed to publish well-design clinical trial based on the variety of results of experimental studies.
검정콩 종피에 함유된 안토시아닌의 항산화 및 항염증 효과를 분석하였다. 메탄올로 추출된 검정콩의 안토시아닌 조추출물은 0.01%에서 0.5% 범위에서 농도 의존적으로 SOD활성을 증가시켰으며 0.5%에서 superoxide radical을 100% 소거시키는 결과를 관찰할 수 있었다. 또한 RAW 264.7 세포를 배양한 후, 세포 배양액에 LPS와 농도별 안토시아닌 추출물을 가한 결과, 안토시아닌 추출물을 0.001%, 0.01%, 0.02% 농도로 각각 처리했을 때 LPS에 의해 증가된 NO의 생산이 농도 의존적으로 감소하는 결과를 보였다. 따라서 검정콩 안토시아닌 추출물의 항산화능 및 항염증효과를 가늠할 수 있었다. 그러나 안토시아닌 조추출물은 DDT 시험에 의해서는 S. aureus, E. coli, C. albicans, A. niger에 대해서 10%의 농도에서도 항균력을 보이지 않았다.
One of the practical limitations with the use of liposomes for delivery of the pharmaceutical substances such antigens is that liposomes are relatively unstable in storage. In order to extend the stability of liposome in storage without affecting their functional activity, solution-type liposomes were dehydrated to form a structurally intact dry liposomes. Comparative immunological evaluation was carried out for both dry and solution-type liposomes containing gag-V3 chimera, consequently it was found that dry liposomes elicited both humoral and cellular response as efficiently as solution-type liposemes did against the same gag-V3 antigen. Especially, long-term stability of the liposomes was remarkably enhanced by the dehydration made to loposomes without a significant change in its ability to elicit immune response in vivo. These results indicate that dry pH-sensitive liposome may become an effective delivery and adjuvant system for general vaccine development.
Mast cells are key effector cells in the early phase allergic inflammation and in diverse immunological and pathological processes. In order to understand the effect on reduction of the anti-dinitrophenyl (DNP) IgE antibody-induced β-hexosaminidase release in RBL-2H3 rat mast cells, a novel series of 4-senecioyloxymethyl- 6,7-dimethoxycoumarins (SMDC) was prepared by reacting 4-chloromethyl-6,7-dimethoxycoumarin with various carboxylic acids. Compounds 8-11 with cyclic moiety such as phenyl, thiophenyl, pyridinyl, and furanyl group were found to inhibit-hexosaminidase release more potently (5.98-9.62 μM) than compounds 3- 7 and 12 with acyclic moiety (19.32-76.78 μM). Furthermore, compounds 8 and 9 inhibited IgE-induced ear swelling and significantly reduced systemic passive cutaneous anaphylaxis reaction in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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