• 농촌의학ㆍ지역보건
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• 제26권2호
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• pp.181-191
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• 2001

개회충증에 대한 IgG 항체반응을 ELISA를 이용하여 거제도 및 인천 지역 주민의 혈청 역학적 조사를 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 개회충증에 대한 혈청 항체 양성률은 거제도 지역 주민은 15.7%를 나타내었다. 성별 양성률을 보면 남자는 7.4%인데 비하여 여자는 23.8%의 높은 양성률을 나타내었으며 통계학적으로 남 녀 성별간에 유의한 차이가 있었다(p<0.05). 연령별 양성률을 비교하면 남 녀 모두 20대에서 각각 14.3%, 39.3%로 가장 높았다. 인천 지역 주민은 13.1%의 양성률을 보였다. 남자는 14.4%, 여자는 12.1%의 양성률을 나타내었으며 성별간의 유의한 차이는 볼 수 없었다. 연령별로는 남자는 전 연령층에서 비슷한 양성률을 나타내었으나 30대에서 17.8%로 가장 높게 나타났으며, 여자는 6.3%-20.0%의 양성률을 나타내었으며 10대에서 가장 높은 양성률을 보였다. 지역간의 통계학적 유의성차이는 전체 및 남자에서는 없었으나 여자에서는 차이가 있었다(p<0.05). ELISA 방법으로 혈청 항체가가 양성으로 나타난 혈청을 immunoblotting한 결과 거제도 지역 15 예 중 9예가 양성으로 나타났으며 인천 지역은 27예 중 22예가 양성반응을 보였다.

• 대한의생명과학회지
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• 제5권1호
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• pp.1-10
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• 1999

본 연구에서는 혈장이나 양수에 있는 $\alpha$-fetoprotein (AFP)을 인식 할 수 있는 모노클로날 항체를 제조하고, 모노클로날 항체를 이용한 효소면역분석법을 개발하고자 하였다. 양수로부터 얻은 AFP를 쥐에 주사한 후 비장을 분리하여 종양세포 (Sp2/O-Ag-14)와 융합하였고, 하이브리도마 기술을 이용하여 모노클로날 항체를 제조하였다. 모노클로날 항체를 클로닝하였으며, 생성된 항체를 MabF22로 명명하였고, IgG1 중사슬과 k 경사슬의 isotype을 나타냈다. 또한 immunoblotting 방법과 ELISA로 특이도를 조사한 결과 모노클로날 항체는 AFP와만 반응하였고, 결합 친화상수는 0.8$\times$$10^{-10}$M이었다. 두 종류의 효소면역분석법 -경쟁적 또는 비경쟁적 분석 -을 이용하여 항체의 효용성을 조사하였으며, 두 방법 모두 AFP와 농도에 비례하여 반응하였다. 따라서 본 연구에서 생산된 모노클로날 항체는 연구목적으로 뿐만 아니라 AFP 농도를 측정하기 위한 면역진단시약의 개발에도 유용할 것으로 생각된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제41권1호
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• pp.43-51
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• 2017

Background: BIOGF1K, a compound K-rich fraction prepared from the root of Panax ginseng, is widely used for cosmetic purposes in Korea. We investigated the functional mechanisms of the anti-inflammatory and antioxidative activities of BIOGF1K by discovering target enzymes through various molecular studies. Methods: We explored the inhibitory mechanisms of BIOGF1K using lipopolysaccharide-mediated inflammatory responses, reporter gene assays involving overexpression of toll-like receptor adaptor molecules, and immunoblotting analysis. We used the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay to measure the antioxidative activity. We cotransfected adaptor molecules, including the myeloid differentiation primary response gene 88 (MyD88) and Toll/interleukin-receptor domain containing adaptor molecule-inducing interferon-${\beta}$ (TRIF), to measure the activation of nuclear factor (NF)-${\kappa}B$ and interferon regulatory factor 3 (IRF3). Results: BIOGF1K suppressed lipopolysaccharide-triggered NO release in macrophages as well as DPPH-induced electron-donating activity. It also blocked lipopolysaccharide-induced mRNA levels of interferon-${\beta}$ and inducible nitric oxide synthase. Moreover, BIOGF1K diminished the translocation and activation of IRF3 and NF-${\kappa}B$ (p50 and p65). This extract inhibited the upregulation of NF-${\kappa}B$-linked luciferase activity provoked by phorbal-12-myristate-13 acetate as well as MyD88, TRIF, and inhibitor of ${\kappa}B$ ($I{\kappa}B{\alpha}$) kinase ($IKK{\beta}$), and IRF3-mediated luciferase activity induced by TRIF and TANK-binding kinase 1 (TBK1). Finally, BIOGF1K downregulated the NF-${\kappa}B$ pathway by blocking $IKK{\beta}$ and the IRF3 pathway by inhibiting TBK1, according to reporter gene assays, immunoblotting analysis, and an AKT/$IKK{\beta}$/TBK1 overexpression strategy. Conclusion: Overall, our data suggest that the suppression of $IKK{\beta}$ and TBK1, which mediate transcriptional regulation of NF-${\kappa}B$ and IRF3, respectively, may contribute to the broad-spectrum inhibitory activity of BIOGF1K.

• 한국산학기술학회논문지
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• 제13권8호
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• pp.3785-3791
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• 2012

용존산소란 수생생물의 생장을 조절하는 가장 중요한 요소 중의 하나이다. 일반적으로 빈산소란 2.8 mg $O_2/L$ (91.4 mM과 동량) 이하의 용존산소로 정의된다. 따라서 빈산소 해역은 해양생태계에서 심각한 문제를 야기할 수 있다. 본 연구에서는 성게에 대한 빈산소의 배아독성 (수정 및 배발생률) 영향을 연구하기 위하여 둥근성게 (Strongylocentrotus nudus)를 용존산소 7.6 mg $O_2/L$ (normoxia)과 1.8 mg $O_2/L$ (hypoxia)에서 2일, $15^{\circ}C$ 및 33 ‰에 노출하였다. 또한 빈산소에 노출된 성게에서의 스트레스 관련유전자인 HSP70과 항산화 관련 유전자인 glutathione reductase의 발현을 immunoblotting assay와 RT-PCR을 통하여 확인하였다. 연구결과 배발생률이 현저하게 감소하였다. 분자분석 결과 빈산소에 노출된 성게가 정상상태의 성게에 비해 HSP70 단백질은 약 5.5배 glutathione reductase는 약 2.79배 증가하였다. 본 연구의 결과는 빈산소가 성게의 비정상적 배발생을 유도하며, 스트레스와 항산화 반응을 유발할 수 있음을 추측케 한다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제12권2호
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• pp.183-194
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• 2008

A variety of stem cells has been emerging as therapeutic cells that can replace organ transplantation in human liver diseases. The present study focused on whether human eyelid adipose-derived stem cells (HAD) might differentiate into functional hepatocyte-like cells in vitro. HAD were isolated from human eyelid adipose tissue. Effect of dimethyl sulfoxide (DMSO), fibroblast growth factor (FGF)-2 and FGF-4 on the hepatic differentiation of HAD have been examined in vitro. Immunocytochemical analysis and PAS staining showed that HAD cultured in both DMSO and FGF-4 exhibited the most intense staining than HAD of the other experimental groups. These HAD expressed numerous hepatocyte-related genes. Immunoblotting analyses showed that HAD cultured in the presence of DMSO and FGF-4 secreted higher amount of human albumin than HAD cultured in other conditions. Urea analysis also demonstrated that these HAD produced higher amount of urea than any other groups of HAD. In conclusion, combined treatment of DMSO and FGF-4 could effectively induce the functional differentiation of HAD into hepatocyte-like cells.

• Journal of Ginseng Research
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• 제38권4호
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• pp.251-255
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• 2014

Background: Ginsenoside Rp1 (G-Rp1) is a novel ginsenoside derived from ginsenoside Rk1. This compound was reported to have anticancer, anti-platelet, and anti-inflammatory activities. In this study, we examined the molecular target of the antiproliferative and proapoptotic activities of G-Rp1. Methods: To examine the effects of G-Rp1, cell proliferation assays, propidium iodine staining, proteomic analysis by two-dimensional gel electrophoresis, immunoblotting analysis, and a knockdown strategy were used. Results: G-Rp1 dose-dependently suppressed the proliferation of colorectal cancer LoVo cells and increased their apoptosis. G-Rp1 markedly upregulated the protein level of apolipoprotein (Apo)-A1 in LoVo, SNU-407, DLD-1, SNU-638, AGS, KPL-4, and SK-BR-3 cells. The knockdown of Apo-A1 by its small-interfering RNA increased the levels of cleaved poly(ADP-ribose) polymerase and p53 and diminished the proliferation of LoVo cells. Conclusion: These results suggest that G-Rp1 may act as an anticancer agent by strongly inhibiting cell proliferation and enhancing apoptosis through upregulation of Apo-A1.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제6권6호
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• pp.468-473
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• 1996

The genome of tomato spotted wilt virus (TSWV) is composed of three RNA segments, S, M, and L RNA and the 5.0 kb M RNA encodes two glycoproteins Gl, G2 and NSm protein of unknown function. In an effort to investigate the function of the NSm protein, antibody was raised against NSm fusion protein overexpressed in Escherichia coli. This antibody was used to detect the NSm protein by using western blot analysis and electron microscopic observation after immunogold labelling. For the cloning of the NSm gene, total RNA extracted from a TSWV infected plant was used for cDNA synthesis and polymerase chain reaction (PCR) instead of going through time-consuming virus purification. A protein band specifically reacting to the NSm antibody was detected from TSWV inoculated plants. The NSm protein was detected in the cell wall fraction and in pellet from low speed centrifugation when the infected plant tissue was fractionated into 4 fractions. In the immuno-electron microscopic observation, gold particles were found around the plasmodesmata of infected plant tissue. These results suggest that the NSm protein of TSWV plays some role in cell-to-cell movement of this virus.

• Molecules and Cells
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• 제45권9호
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• pp.631-639
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• 2022

Breast cancer is the leading cause of cancer-related death in women worldwide, despite medical and technological advancements. The RhoBTB family consists of three isoforms: RhoBTB1, RhoBTB2, and RhoBTB3. RhoBTB1 and RhoBTB2 have been proposed as tumor suppressors in breast cancer. However, the roles of RhoBTB3 proteins are unknown in breast cancer. Bioinformatics analysis, including Oncomine, cBioportal, was used to evaluate the potential functions and prognostic values of RhoBTB3 and Col1a1 in breast cancer. qRT-PCR analysis and immunoblotting assay were performed to investigate relevant expression. Functional experiments including proliferation assay, invasion assay, and flow cytometry assay were conducted to determine the role of RhoBTB3 and Col1a1 in breast cancer cells. RhoBTB3 mRNA levels were significantly up-regulated in breast cancer tissues as compared to in adjacent normal tissues. Moreover, RhoBTB3 expression was found to be associated with Col1a1 expression. Decreasing RhoBTB3 expression may lead to decreases in the proliferative and invasive properties of breast cancer cells. Further, Col1a1 knockdown in breast cancer cells limited the proliferative and invasive ability of cancer cells. Knockdown of RhoBTB3 may exert inhibit the proliferation, migration, and metastasis of breast cancer cells by repressing the expression of Col1a1, providing a novel therapeutic strategy for treating breast cancer.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제8권2호
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• pp.99-111
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• 2004

난소가 제거된 생쥐를 이용하여 자궁조직에서의 ADAM-8, 9, 10, 12, 15, 17, 그리고 ADAMTS-1의 유전자의 발현이 생식호르몬에 의하여 조절되는 지를 알아보았다. 암컷 생쥐의 난소를 제거하고, 2주후에 sesame oil, 17 ${\beta}$-estradiol ($E_2$), progesterone ($P_4$ 혹은 이 둘 혼합액 ($E_2+P_4$)을 피하 주사하였다. RT-PCR 방법을 이용하여 유전자 전사체의 발현을 조사한 결과 ADAM-8, 12, 그리고 17은 oil을 주사하거나 $P_4$만을 주사한 군보다 $E_2$를 주사한 군에서 자궁조직에서의 mRNA의 양이 현저하게 증가하였다. 반면 ADAM-9, 10, 15, 그리고 ADAMTS-1은 oil을 주사하거나 $E_2$만을 주사한 군보다 $P_4$를 주사한 군에서 mRNA의 양이 현저하게 증가하였다. 또한 단백질의 발현양상의 결과도 RT-PCR의 결과와 동일하게 관찰되었다. 이러한 결과로 미루어 ADAM-8, 12, 그리고 17은 17 ${\beta}$-estradiol에 의하여, ADAM-9, 10, 15, 그리고 ADAMTS-1은 progesterone에 의하여 유전자의 발현이 upregulation 되는 것으로 생각되어진다.

• 생명과학회지
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• 제17권3호통권83호
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• pp.350-355
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• 2007

흰쥐유래의 비만세포인 RBL-2H3 세포는 다양한 Src-family kinase를 발현한다. 현재까지의 연구결과에 의하면 비만세포의 초기 활성화에 Lyn kinase가 중요한 역할을 한다고 알려져 왔다. 그러나 그 세포에서 발현되는 다양한 다른 Src-family kinase의 역할은 불분명하다. 본 연구에서는 비만세포에서 다양한 Src-family kinase가 세포내 다른 곳에서 다양하게 발현되고 있다는 사실을 RT-PCR, immunoblotting 그리고 confocal microscopy 기법을 이용하여 증명하였다. 그 결과 Lyn 및 Fgr kinase는 세포막에 위치하고 c-Src 및 Yes kinase는 세포 내 과립에 존재하는 것을 알 수 있었다. 모든 Src-family kinase를 클로닝하고 과발현하여 탈과립 대한 영향을 평가하였다. 그 결과 fyn과 Fgr kinase는 비만세포에서 항원 유도의 탈과립을 증가시켰으며 반면 Lyn kinsae는 탈과립을 억제시키는 것을 확인할 수 있었다. 이러한 결과는 비만세포 초기 신호전달계에서 Fgr가 중요한 역할을 할 가능성을 제시한다.