• 한국약용작물학회지
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• 제15권6호
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• pp.434-436
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• 2007

멜라닌 생합성은 tyrosinase의 작용으로 인한 tyrosine의 산화로부터 시작되어 dopaquinone 및 dopachrome가 생성되고 dopachrome는 다시 dihydroxyindole과 dopachrome tautomerase에 의한 dihydroxyindole-2-carboxylic acid 로 전환되는 과정을 거쳐 진행된다 (Alaluf et al.; 2001). 도깨비 부채 뿌리 추출물의 멜라닌 생합성 저해 기전을 검정하기 위하여 melan-a 세포에서의 tyrosinase 및 TRP-2 발현량을 western immunoblotting하여 측정한 결과 도깨비 부채 뿌리 추출물은 TRP-2 발현량에는 영향을 미치지 않으나 tyrosinase의 발현량을 현저히 감소시킴을 확인 할 수 있었고 따라서 이전의 연구와 종합하여 볼 때 도깨비 부채 뿌리 추출물은 멜라닌 생합성의 초기에 주요한 역할을 하는 tyrosinase의 활성 및 발현을 모두 억제함으로써 멜라닌 생성을 감소시키는 것으로 사료된다. 또한 도깨비 부채 뿌리 추출물은 brown guinea pig 피부에서 3% 농도로 도포 시 발적이나 이상 징후를 일으키지 않고 자외선으로 유도된 색소 침착을 감소 시켜 피부 미백 용도의 기능성 원료로써 큰 가능성을 가지고 있는 것으로 판단된다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제47권1호
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• pp.65-73
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• 2023

Background: Age-related macular degeneration (AMD) is a significant visual disease that induces impaired vision and irreversible blindness in the elderly. However, the effects of ginseng berry extract (GBE) on the retina have not been studied. Therefore, this study aimed to investigate the protective effects of GBE on blue light (BL)-induced retinal damage and elucidate its underlying mechanisms in human retinal pigment epithelial cells (ARPE-19 cells) and Balb/c retina. Methods: To investigate the effects and underlying mechanisms of GBE on retinal damage in vitro, we performed cell viability assay, pre-and post-treatment of sample, reactive oxygen species (ROS) assay, quantitative real-time PCR (qRT-PCR), and western immunoblotting using A2E-laden ARPE-19 cells with BL exposure. In addition, Balb/c mice were irradiated with BL to induce retinal degeneration and orally administrated with GBE (50, 100, 200 mg/kg). Using the harvested retina, we performed histological analysis (thickness of retinal layers), qRT-PCR, and western immunoblotting to elucidate the effects and mechanisms of GBE against retinal damage in vivo. Results: GBE significantly inhibited BL-induced cell damage in ARPE-19 cells by activating the SIRT1/PGC-1α pathway, regulating NF-kB translocation, caspase 3 activation, PARP cleavage, expressions of apoptosis-related factors (BAX/BCL-2, LC3-II, and p62), and ROS production. Furthermore, GBE prevented BL-induced retinal degeneration by restoring the thickness of retinal layers and suppressed inflammation and apoptosis via regulation of NF-kB and SIRT1/PGC-1α pathway, cleavage of caspase 3 and PARP, and expressions of apoptosis-related factors in vivo. Conclusions: GBE could be a potential agent to prevent dry AMD and progression to wet AMD.

• 생명과학회지
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• 제22권4호
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• pp.524-531
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• 2012

콩은 우리나라에서 과민성 알레르기를 일으키는 대표적인 식품 중의 하나로, 식품으로 섭취 시에 가열 및 발효가공을 통한 형태로 섭취한다. 이에 본 연구에서는 콩에 알레르기 반응을 일으키는 7명의 환아 혈청과 1명의 정상인 혈청을 이용하여 열처리 방법에 따른 품종별 콩(대풍, 대원, 태광)의 알레르기성에 미치는 영향을 조사하였다. 단백질을 추출하여 SDS-PAGE, immunoblotting 및 ELISA 방법을 통하여 반응성을 조사한 결과, SDS-PAGE 상에서 열처리하지 않은 세가지 품종의 경우 9-76 kDa 위치에서 다양한 단백질 밴드를 보였는데 특히 9, 21, 34, 52, 72 그리고 76 kDa의 단백질들은 각각 LTP, Kunits trypsin inhibitor, $Gly$ m Bd 30K, ${\beta}$-conglycinin의 ${\beta}$-subunit, ${\alpha}$-subunit와 ${\alpha}$'-subunit로 주요한 콩 알레르겐으로 알려져 있다. 반면에 볶은 콩, 발효한 콩에서는 35 kDa 이하로 완전히 분해되어 열처리 방법을 통해 단백의 항원성이 줄어드는 것을 확인할 수 있었다. IgE immunoblotting 을 통한 세 가지 품종의 볶은 콩과 콩 알레르기 환아 혈청과의 반응에서는 공통적으로 38-40 kDa과 10-15 kDa에서 단백질 밴드를 보였으나 발효한 콩에서는 대부분 반응성이 약하거나 나타나지 않았다. ELISA 결과, immunoblotting 분석과 동일하게 대부분의 환아 혈청과 반응시에 볶은 콩과 발효한 콩에서 비교적 낮은 수치를 보였다. 결론적으로 콩에 존재하는 알레르겐 단백질은 열처리와 발효 미생물이 분비하는 단백질 분해효소에 의해 대부분의 환아에서 콩 단백질과의 반응성이 약화되는 것으로 사료된다.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제45권7호
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• pp.862-874
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• 2002

목 적: H. pylori 감염 진단에 있어 최적 표준 조건은 위생검 조직에서 세균을 증명하는 것이다. 위생검 조직을 이용한 현재의 검사법으로는 초기 감염 또는 항균요법을 받은 후 위점막에 적은 수의 세균이 존재하거나 여기저기 산재하여 분포할 경우 H. pylori를 쉽게 발견할 수 없다. 본 연구에서는 위점막 조직을 이용한 H. pylori 검출법으로 전포매 면역 전자 현미경 검사법을 시행하여 이 검사를 요소분해효소 검사 및 면역블롯팅법과 비교하고자 하였다. 방 법 : 1996년 7월부터 1999년 7월까지 상부 위장관 증세를 주소로 경상대학교병원 소아과를 찾은 2-15세 사이의 환아 119명을 대상으로 위내시경을 시행 하여 위생검 조직검사, 요소분해효소 검사, 전포매 면역 전자현미경 검사, 면역블롯팅 검사를 시행하였다. 결 과 : 1) 전포매 면역 전자현미경 검사상 위 전정부에서는 111례(93.3%), 위 체부에서는 105례(88.2%)에서 H. pylori가 관찰 되었다. 대상 환아 119명 중 116명 (97.5 %)의 위 전정부 또는 위 체부에서 H. pylori가 검출되었다. 2) 위 전정부나 위 체부에서 세균이 관찰되지 않은 3명 중 2명은 H & E 염색검사에서 세균이 관찰되었고 3명 모두 요소분해효소 검사상 6시간내 양성반응 및 면역블롯팅 검사상 양성반응을 보였다. 3) 요소분해효소 검사는 위 전정부에서 73례(61.3%), 위 체부에서 102례(85.7%)가 양성이었고, 총 107례(89.9%)에서 위 전정부 또는 위 체부에서 양성반응을 보였다. 4) H & E 염색 검사상 위 전정부 9례(7.6%), 위체부 12례(10.1%)에서 균이 발견되었고, 위 전정부 또는 위 체부에서 균이 관찰된 경우는 총 13례(10.9%)였다. H & E 염색에서 세균이 관찰된 13례 모두 요소분해효소 검사 양성이었으며 대부분 1시간 이내에 색깔이 변한 빠른 양성 반응을 보였다. 그러나 위전정부 9례 중 1례, 위 체부 12례 중 3례에서는 광학 현미경상 세균이 관찰되었으나 면역 전자현미경 검사에서는 관찰할 수 없었다. 총 13례 중 2례에서는 위전정부 또는 위 체부 모두에서 면역 전자현미경 검사에서 세균을 관찰할 수 없었다. 5) 면역블롯팅 검사상 총 97명(81.5%)에서 양성반응이 관찰되었다. 결 론 : 전포매 면역 전자현미경 검사가 소아 H. pylori 진단법의 최적 표준으로 사용될 수도 있는 결과를 보여 주었지만, 이 검사 역시 세균이 위점막 전체에 고르게 분포하지 않는 특성 때문에 기본적으로 조직검사를 통한 검사 방법이 가지는 한계를 가지고 있다. 소아에서 상부 위장관 증상으로 위내시경 검사를 받는 환아 대부분에서 H. pylori를 검출할 수 있었다는 것은 소아에서 흔히 사용되는 H. pylori 감염 진단법의 재평가 필요성을 시사한다.

• 대한의생명과학회지
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• 제18권3호
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• pp.210-217
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• 2012

Oncolytic viral vectors have shown good candidates for cancer treatment but have many limitations. To improve the therapeutic potential of oncolytic vaccinia virus, we developed a recombinant vaccinia virus expressing the 4-1BBL co-stimulatory molecule or CCL21. 4-1BBL and CCL21 expression was identified by FACS analysis and immunoblotting. rV-4-1BBL vaccination shows significant tumor regression compared to rV-LacZ, but rV-CCL21 shows rapid tumor growth compared to rV-LacZ in the poorly immunogenic B16 murine melanoma model. 4-1BBL expression resulted in the increase of the number of CD8+ T cells and especially the increase of effector (CD62L-CD44+) CD8+ T cells. These data suggest 4-1BBL may be the potential target for enhancement of tumor immunotherapy.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제25권1호
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• pp.71-76
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• 2002

Ginseng has been used as a traditional medicine with various therapeutic effects. However, it is still unknown which component of this plant is effective at promoting wound healing. Recently, ginsenoside $Rb_2$ has been reported to improve wound healing. In this study, to investigate the reported wound healing effect of the ginsenoside $Rb_2$, cell morphology and protein factors involved in epidermal formation were evaluated by immunshemical and immunoblotting analysis. $Rb_2$ stimulated epidermal cell proliferation, and the cell showed a 1.5-fold increase in thymidine uptake compared to the control (p<0.05, n=3). Futheremore $Rb_2$, was found to stimulate epidermis formation in a dose-dependent manner in raft culture, and to dose dependently enhance the expressions of protein factors related to cell proliferation, namely, epidermal growth factor and its receptor, fibronectin and its receptor, keratin 5/14, and collagenase 1 (p<0.05, n=3~9). It is believed that ginsenoside $Rb_2$, enhances epidermal cell proliferation by upregulating the expressions of these proliferation-related factors.

• 한국식품영양학회지
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• 제6권4호
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• pp.314-321
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• 1993

We have cloned the Bacillus cellulyticus K-12 avicelase (Avi, E.C.3.2.1.4) gene (ace A) In E. coli. This was accompanied by using the vector PT7T3U 19 and Hind W -Hind m libraries of Bacillus cellulyticus K-12 chromosomal inserts created in 5.cofi. The Libraries were screened for the expression of avicelase by monitoring the immunoreaction of the anti-avicelase (immunoscreening). Positive clones (Ac-3, Ac-5, and Ac-7) contained the identical 3.5kb Hind III fragment as determined by restriction mapping and Southern hybridization, and expressed avicelase efficiently and constituvely using its own promoter in the heterologous host. From the immunoblotting analysis, a polypeptide which showed a CMCase activity with an Mr of 54000 was detected.

• Food Science and Biotechnology
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• 제15권3호
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• pp.385-391
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• 2006

In Korea, different kinds of genetically modified (GM) crops are under development, including GM-rice expressing insecticidal crystal (Cry) proteins of Bacillus thuringiensis (Bt) modified to change a single amino acid. In this study, amino acid (aa) sequences of modified Cry proteins were compared to that of known allergens, and Cry proteins expressed in GM-rice were identified by using Cry protein specific polyclonal antibody. The antigen-antibody reactions were compared between GM and commercial rice to assess the allergic risk of Cry proteins. This analysis showed no known allergen to have more than 35% aa sequence homology with modified Cry proteins in Bt rice over an 80 aa window or to have more than 8 consecutive identical aa. Sera from allergic patients showed some IgE reactivity via immunoblotting and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), although no differences were seen between GM and commercial rice. Based on these results we conclude that GM rice with modified Cry proteins has no differences in its protein composition or allergenicity relative to commercial rice.

• 대한약리학회지
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• 제29권2호
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• pp.275-282
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• 1993

Microsomal epoxide hydrolase (mEH)은 epoxide형 중간대사물을 해독화하는 효소이다. 본 실험실에서는 thiazole 또는 pyrazine을 rat에 투여할 때 mEH mRNA수준이 증가되고 mEH가 유도증가한다는 것을 밝힌바 있다(Carcinogenesis, Kim et al, 1993). 본 연구에서는 Thiazole처리를 한 rat의 간 microsome 분획으로 부터 DEAE-cellulose column chromatography를 이용하여 mEH를 순수분리하였고, 이를 SDS-PAGE분석 및 N 말단 amino acid 서열분석으로 확인하였다. Pyrazine처리를 한 rat의 간 microsome분획에서는 mEH와 더불어 이와 관련된 43 kDa 단백질이 함께 정제되었다. 정제된 thiazole 유도성 mEH를 토끼에 주사하여 항체를 생산하였고, 이 항체를 이용한 immunoblot 분석을 하였을 때 간 microsome 분획의 mEH가 thiazole투여군에서는 대조군에 비하여 10배, pyrazine 투여군에서 7배 증가하였다. Pyrazine처치한 rat의 간 microsome 분획에서는 mEH 관련성 43 kDa 단백질이 동시 유도증가하는 것을 면역화학적 반응으로도 확인하였다. 이때 Pyrazine으로 유도된 rat의 간 microsome 분획 또는 정제분획에 존재하는 43 kDa 단백질과 mEH의 비율은 1 : 15로 나타났다. 정제된 mEH와 43 kDa 단백질의 N 말단 amino acid 서열을 분석하였을때 43 kDa 단백질의 N 말단이 mEH와 동일하게 나타나 관련 단백질임을 확인하였다. 이러한 mEN 유도현상에 종차가 있는지를 알아보기 위하여 thiazole과 pyrazine을 각각 rabbit에 투여하였을 때 rabbit에서 는 mEH의 유도증가가 일어나지 않았으며, pyrazine 투여군에서 43 kDa 단백질의 증가는 관찰 되었다. 본 연구는 thiazole 또는 pyrazine 투여후 mEH 발현이 유도증가되며, pyrazine 투여 후에는 mEH 및 이와 관련된 43 kDa 단백질이 동시유도되고, 이러한 mEH 유도발현에 rat와 rabbit간에는 종차가 있음을 보여준다.

• Journal of Breast Disease
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• 제6권2호
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• pp.39-45
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• 2018

Purpose: Dieckol, a phlorotannin compound isolated from Ecklonia cava, has been reported to have antioxidant, antiviral, anti-inflammatory, and anticancer properties. The purpose of this study was to investigate its anticancer effects on human breast cancer cell lines. Methods: In this study, the viability of two human breast cancer cell lines SK-BR-3 and MCF-7 was investigated after dieckol treatment using a WST-1 assay. Apoptosis and cell cycle distribution were assayed via Annexin V-fluorescein isothiocyanate and propidium iodide staining followed by flow cytometric analysis. Immunoblotting analysis was also performed using Bax/Bcl-2 to determine whether the dieckol-induced apoptosis was mediated by the intrinsic apoptotic pathway. Results: In a dose dependent manner, dieckol reduced the number of viable cells and increased the number of apoptotic cells. The effect of dieckol on the cell cycle distribution was analyzed using flow cytometry. Dieckol treatment significantly increased the percentage of MCF-7 and SK-BR-3 in the G2/M phase. Immunoblot analysis revealed that 24 hours of dieckol exposure increased the Bax/Bcl-2 ratio. Conclusion: Dieckol induced cytotoxicity in MCF-7 and SK-BR-3 human breast cancer cells inducing apoptosis and cell cycle arrest. Therefore, it is suggested that dieckol may be a potential therapeutic agent for breast cancer.