우리나라 주요 담수 어종인 미꾸라지(Misgurnus mizolepis)를 실험 모델로 이용하여 실험적으로 설정한 고온 노출($32^{\circ}C$)에 특이적으로 반응하는 유전자들을 cDNA microarray 분석을 통해 탐색하였다. 미꾸라지 간조직 expressed sequence tag (EST) 데이터베이스 분석을 통해 1,124개의 unigene들을 선발하여 제작한 cDNA microarray을 이용하여 $23^{\circ}C$ 및 $32^{\circ}C$에 4주간 노출된 실험어의 간(liver)조직의 전사 발현 양상을 3반복 분석하였다. 다양한 유전자군이 $32^{\circ}C$ 고온 노출에 전사 발현의 증감 또는 감소 양상을 보였으며 $23^{\circ}C$에 비해 $32^{\circ}C$군에서 2배 이상의 발현 증가를 보인 클론들은 총 93종류로서 에너지 대사, 단백질 대사, 면역/항산화 기능, 세포골격 및 구조, 물질수송 및 세포 신호전달등에 관여하는 단백질들을 암호화하는 유전자들이었고 최대 15배 이상의 전사발현이 관찰되었다. 반면 고온 노출군에서 유의적인 발현 감소(50% 이하)를 보인 유전자들(n=85) 역시 탐색되어 상기 단백질 분류군외에 vitellogenin 전구체들 및 리보좀 단백질류에서 특이적인 전사활성의 저하가 관찰되었고, vitellogenin 유전자에서 가장 많은 mRNA 수준의 감소가 관찰되었다.
개 말초혈액 다형핵백혈구(PMNs)의 유주활성에 대한 fucoidan의 면역증효과를 검토하였다. Fucoidan 그 자체는 PMNs에 대해 직접적인 유주활성 효과를 보이지 않았다. 그러나 recombinant IL-8에 대한 PMNs의 유주활성과 유사하게 fucoidan으로 배양한 말초혈액 단핵구세포(PBMCs)의 배양상층액은 PMNs에 대해 유주활성을 증가시켰다. 또한, fucoidan으로 배양한 PBMCs의 배양상층액에 대한 PMNs의 유주활성 증가효과는 anti-IL-8 pAb를 처리했을 때 억제되었다. PBMCs 배양 상층액 속의 IL-8의 양을 정량한 결과 fucoidan무처치 대조군에 비해 증가하였다. 이상의 결과로부터, fucoidan은 개 PMNs의 유주능에 대하여 면역증가 작용을 가지고 있으며, 이것은 fucoidan의 자극에 의해 PBMCs에서 생산되어 분비되는 IL-8에 의해 나타나는 것으로 사료되었다.
Objective: The objective of this study was to examine the effects of alfalfa flavonoids on the production performance, immunity, and ruminal fermentation of dairy cows. Methods: The experiments employed four primiparous Holstein cows fitted with ruminal cannulas, and used a $4{\times}4$ Latin square design. Cattle were fed total mixed ration supplemented with 0 (control group, Con), 20, 60, or 100 mg of alfalfa flavonoids extract (AFE) per kg of dairy cow body weight (BW). Results: The feed intake of the group receiving 60 mg/kg BW of AFE were significantly higher (p<0.05) than that of the group receiving 100 mg/kg BW. Milk yields and the fat, protein and lactose of milk were unaffected by AFE, while the total solids content of milk reduced (p = 0.05) linearly as AFE supplementation was increased. The somatic cell count of milk in group receiving 60 mg/kg BW of AFE was significantly lower (p<0.05) than that of the control group. Apparent total-tract digestibility of neutral detergent fiber and crude protein showed a tendency to increase (0.05<$p{\leq}0.10$) with ingestion of AFE. Methane dicarboxylic aldehyde concentration decreased (p = 0.03) linearly, whereas superoxide dismutase activity showed a tendency to increase (p = 0.10) quadratically, with increasing levels of AFE supplementation. The lymphocyte count and the proportion of lymphocytes decreased (p = 0.03) linearly, whereas the proportion of neutrophil granulocytes increased (p = 0.01) linearly with increasing levels of dietary AFE supplementation. The valeric acid/total volatile fatty acid (TVFA) ratio was increased (p = 0.01) linearly with increasing of the level of AFE supplementation, the other ruminal fermentation parameters were not affected by AFE supplementation. Relative levels of the rumen microbe Ruminococcus flavefaciens tended to decrease (p = 0.09) quadratically, whereas those of Butyrivibrio fibrisolvens showed a tendency to increase (p = 0.07) quadratically in response to AFE supplementation. Conclusion: The results of this study demonstrate that AFE supplementation can alter composition of milk, and may also have an increase tendency of nutrient digestion by regulating populations of microbes in the rumen, improve antioxidant properties by increasing antioxidant enzyme activities, and affect immunity by altering the proportions of lymphocyte and neutrophil granulocytes in dairy cows. The addition of 60 mg/kg BW of AFE to the diet of dairy cows was shown to be beneficial in this study.
Background and Objective : Chungsangboha-tang (CSBHT) has analgesic, sedative, anti-convulsive and anti-histamine effects, so it alleviates the symptoms of asthma. For the comparison of anti-inflammatory effect(s) on CSBHT, PD098059 was used as a negative control. Materials and Methods : This study emphasized THP-1 cells, which had been well characterized as a human monocytic leukemic cell line. The cells resemble monocytes with respect to several criteria and can be differentiated into macrophage-like cells by treatment with PMA. By using the MTS assay, it was possible to prove the safety of CSBHT. Results : Results shows that the CSBHT did not affected cell survival within $10^{1}$ ng/ml to $10^{5}$ ng/ml. Especially, $10^{5}$ ng/ml CSBHT treated cells show 70% deduction of $TNF-{\alpha}$ gene expression against that of LPS treated group. Furthermore, $IL-1{\beta}$, IL-6, IL-8, IL-10 and $TNF-{\alpha}$ levels are down-regulated when treated with CSBHT with concentrations up to 100 ug/ml on monocyte-derived macrophages. Interestingly, CSBHT-treated samples showed that overall transcriptional activities were down-regulated to 20% of that of PD098059 ($TNF-{\alpha}$ inhibitor). At protein level, the expression of $TNF-{\alpha}$ showed similar results as that of transcriptional activity. Results show that the protein level decreased more in the CSBHT-treated group (487 ${\pm}$ 87 pg/ml) than in the LPS-treated group (703 ${\pm}$ 103 pg/ml). In addition, the protein level of IL-8 in the CSBHT treated-group (9.84 ${\pm}$ 3.28 ng/ml) decreased similar as the expression of the control and PD098059-treated groups. Conclusion : CSBHT affects immune response, especially allergic responses and suppression of inflammatory reaction. The results provide us an alternative way to care for clinical inflammatory diseases, not only asthma but also the other possible general inflammatory and allergic diseases.
본 연구는 카로티노이드 생합성 유전자군이 형질전환된 Escherichia coli에서 archaea chaperonin을 공발현 시킴으로 카로티노이드의 생산량을 증대시키는 것이 목표이다. 카로티노이드는 식물, 박테이라, 조류 등이 생합성하는 노란색, 오렌지색, 붉은색 계통의 색소로 이들은 식품 또는 양식 사료로 주로 이용되는 물질이다. 본 연구자들은 선행연구를 통하여 Paracoccus haeundaensis로부터 카로티노이드 유전자군을 cloning하였고 이들 유전자군의 생화학 및 효소학적 기능성을 분석하는 연구 결과와 카로티노이드 생합성 유전자군(crtE, crtB, crtI, crtY, crtZ, crtW, crtX)을 대장균에 형질전환하여 400 μg/g dry cell weight (DCW)의 아스타잔틴을 생산하는 연구 결과를 보고 하였다. 본 연구에서는 이들 유전자군과 archaea chaperonin을 공발현시켜 대장균에서 astaxanthin을 890 μg/g dry cell weight (DCW)로 생산하였으며, 이는 선행 연구된 결과 보다 약 2배 이상의 astaxanthin 생산량을 향상 시키는 연구 결과이다.
동애등에(Hermetia illucens)를 포함한 곤충은 불량환경에서 오랜 진화의 역사를 통해 병원균 침입에 대응하기 위하여 강력한 항균 펩타이드를 발현하는 선천성 면역기전을 보유하고 있다. 동애등에 생체 내 항균펩타이드를 인위적으로 유도하기 위하여, E. faecalis 포함한 5종의 세균을 한방침에 묻혀 주사하였다. 5종 세균에 의해 면역이 유도된 동애등에로부터 혈림프를 채취하여 각 세균에 따른 항균펩타이드 유도효과에 의한 항균활성을 그람양성균인 S. aureus와 그람음성균인 E. coli에 대해 비교 분석하였다. 그 결과, 고초균인 B. subtilis은 5종 세균 중 그람양성 및 음성균 둘 다에 대해서 가장 높은 항균활성을 나타내었다. B. subtilis ($1{\times}10^9cfu/ml$)에 의해 면역이 유도된 동애등에는 주사 후 24시간째 가장 강한 항균활성을 나타내었다. 또한 B. subtilis에 의해 면역이 유도된 동애등에는 가금류의 주요 병원균인 S. enteritidis, S. typhimurium 및 S. pullorum에 대해서도 높은 항균활성을 나타내었다. 이상의 결과로써, B. subtilis에 의해 면역이 유도된 동애등에는 가축 성장촉진용 항생제를 대체할 수 있는 사료첨가제로써 매우 유용할 것으로 판단된다.
장수상황버섯(Phellinus baumii)의 균사체 성장 및 세포외 다당체(exopolysaccharides) 생산을 위한 액체배양의 최적 배지 및 배양조건에 관한 실험을 수행한 결과, 최적배양 온도와 초기 pH는 각각 3$0^{\circ}C$와 5.0으로 결정되었다. 탄소원의 경우, cellobiose와 maltose가 균사체 성장에는 양호하였으나 저조한 세포외 다당체 생산을 보였으며, 반면에 fructose 와 mannitol 은 상대적으로 높은 수율의 세포외 다당체 생산과 균사체 성장 또한 양호하였다. 최적 질소원으로는 yeast extract가 균사체 성장뿐만 아니라 세포외 다당체 생산에 효과적인 것으로 결정되었다. 최적 배지의 조성은 fructose 20 g/L, yeast extract 20 g/L 및 $CaCl_2$ 0.55 g/L이었으며, 최적 배양조건 하에서 5-L 교반 발효조를 운전한 결과, 최대 균사체 성장(17.43 g/L)과 최대 세포외 다당체 생산(3.6 g/L)을 얻을 수 있었다. 회수된 세포외 다당체는 glycoprotein이었으며 그 조성은 amino acid분석 결과 주로 arginine (14.1%)과 glycin (12.0%)이었으며, cabohydrate의 경우는 mannose (48.7%)와 arabinose (38.4%)이 주성분이었다.
청각은 녹조류로서 김치의 부재료로 널리 사용되는 것으로 청각 추출물이 젖산균의 생육 및 cellulase 활성에 미치는 영향과 항산화 및 면역기능에 미치는 영향을 조사하였다. 청각추출물이 젖산균의 생육에 미치는 영향은 김치의 중기이후 젖산 생성에 중요한 Lactobacillus plantarum KCTC 3105의 생육을 2배정도 촉진하였으며 과숙 김치의 경도유지에 중요한 cellulase의 활성을 약 60% 정도 저해하는 효과를 보였다. 청각추출물의 항산화력은 DPPH 방법이나 SOD 유사활성등에서 비슷한 항산화력을 나타내고 있으며 특히 ethyl acetate 층에서 높은 항산화력을 나타내었는데 이러한 결과는 청각에 존재한 phenolic compound가 관여하는 것으로 생각된다. 청각추출물의 항염증효과는 RAW264.7 세포에서 조사되었는데 특히 치주질환균에서 유도된 LPS를 처리하여 유도된 NO 활성을 현저히 감소시킴으로서 높은 항염증 효과를 나타내었으며 이러한 결과는 iNOS 활성에서도 유사한 결과를 나타내었다.
본 연구에 목적은 경호원의 직무유형과 스트레스 수준이 8-OHdG, 면역 글로브린, T-cell, NK-cell과 항산화 효소 등에 미치는 영향을 알아보는 있었다. 연구 대상은 경호원 경력이 2년 이상으로 경호업무를 수행하는 경호원 60명으로 하였다. 집단 구분 및 집단별 인원 분포는 경호직무에 따른 집단은 국가요인경호집단(N=23명), 사설개인경호집단(N=23명), 기타 경호집단(N=14명) 등으로 구분하였다. 집단 스트레스 수준에 따른 집단은 스트레스 수준을 측정하여 스트레스 측정 점수에 따라 집단을 낮은 하(下)스트레스 집단(N=14명), 중(中)스트레스 집단(N=26명), 고(高)스트레스 집단(N=20명) 등 세 집단으로 구분하였다. 실험은 직무 유형에 따라 대상별로 스트레스를 측정한 후 혈액을 채혈하여 직무유형과 스트레스에 따른 생화적 변인의 결과치를 변량분석하여 검증한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 첫째, 경호원의 직무유형에 따라 스트레스 수준은 국가요인 경호집단의 스트레스 수준이 가장 높게 나타났다(p<.05). 둘째, 경호원의 직무유형과 스트레스 수준에 따른 8-OHdG는 직무유형에 따라서는 차이가 없었으며(p>.05), 스트레스 수준에 따라서는 유의한 차이가 있었다(p<.05).
본 연구는 면역억제 마우스에서 양강 에탄올 추출물이 면역증강에 미치는 영향을 평가해보았다. 마우스에 cyclophosphamide를 2회 복강 주사한 후 양강 추출물을 30, 100, 300 mg/kg 용량으로 4주간 경구투여 한 후, 체중 및 면역장기 무게, 비장세포수, 혈청 사이토카인 농도 및 혈청 면역글로불린의 농도를 측정하였다. 실험 결과 체중과 비장세포수는 양강 추출물 투여 시 대조군과 비교하여 유의한 차이를 보이지 않았다. 혈청의 IL-2, TGF-${\beta}$ 및 IFN-${\gamma}$ 농도는 AO 100군에서 대조군에 비해 유의적인 증가를 보였고(p<0.05) IL-4 농도는 실험군에서 유의한 차이를 보이지 않았다. 혈청 내 IgM의 농도는 대조군에 비해 양강 추출물 투여군 모두에서 유의적으로 증가하였고 (p<0.05), IgA의 농도는 양강 추출물 투여군에서 증가하는 경향을 보였는데 특히 AO100군에서 유의성 있게 증가하였다(p<0.05). 본 연구 결과는 양강 에탄올 추출물은 혈청 내 사이토카인 농도와 면역글로불린 농도를 증가시켜 면역력 증강에 기여할 것으로 보이며 특히 100 mg/kg을 투여하였을 때 효과가 가장 큰 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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