Sachil-Tang (SCT) has been traditionally used as a prescription of spasm of the esophagus by stress, pectoralgia and oppressive feeling of the chest in Oriental medicine. This study was carried out to investigate the antioxidant activities of the ethanol extract of SCT and its inhibitory effect on intracellular oxidation and vascular cell adhesion molecule-1 expression in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) using various methods. The SCT extract showed a strong inhibitory effect on free radical generating model systems, including DPPH radical, superoxide anions, hydroxyl radical, peroxynirite and nitric oxide. Besides, the SCT extract exhibited a strong inhibitory effect on lipid peroxidation in rat liver homogenate induced by $FeCl_2$-ascorbic acid, and protected plasmid DNA against the strand breakage in a Fenton's reaction system. The SCT extract also inhibited copper-mediated oxidation of human low-density lipoprotein (LDL), and repressed relative electrophoretic mobility of LDL. Furthermore, the SCT extract protected intracellular oxidation induced by various free radical generators and inhibited expression of vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) in HUVECs. These results suggest that SCT can be an effective natural antioxidant and a possible medicine of atherosclerosis.
This study investigated the protective effect of the butanol (BuOH) fraction from Laminaria japonica (BFLJ) extract on high glucose-induced oxidative stress in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Freeze-dried L japonica was extracted with distilled water, and the extracted solution was mixed with ethanol then centrifuged. The supernatant was subjected to sequential fractionation with various solvents. The BuOH fraction was used in this study because it possessed the strongest antioxidant activity among the various solvent fractions. To determine the protective effect of the BFLJ, oxidative stress was induced by exposing of HUVECs to the high glucose (30 mM) or normal glucose (5.5 mM) for 48 hr. Cell viability, lipid peroxidation, glutathione (GSH) concentration, and antioxidant enzyme activities such as catalase, superoxide dismutase (SOD), glutathione peroxidase (GSH-px), and glutathion reductase (GSH-re) were measured. Exposure of HUVECs to high glucose for 48 hr resulted in a significant (p<0.05) decrease in cell viability, SOD, GSH-px and GSH-re and a significant (p<0.05) increase in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) formation in comparison to the cells treated with 5.5 mM glucose or untreated with glucose. BFLJ treatment decreased TBARS formation and increased cell viability, GSH concentration, and activities of antioxidant enzymes including catalase, SOD, GSH-px, and GSH-re in high glucose pretreated HUVECs. These results suggest that BFLJ may be able to protect HUVECs from high glucose-induced oxidative stress, partially through the antioxidative defence systems.
Cigarette smoke is considered a major risk factor for vascular diseases. There are many toxic compounds in cigarette smoke, including acrolein and other ${\alpha},{\beta}$-unsaturated aldehydes, which are regarded as mediators of inflammation and vascular dysfunction. Furthermore, recent studies have revealed that acrolein, an ${\alpha},{\beta}$-unsaturated aldehyde in cigarette smoke, induces inflammatory mediator expression, which is known to be related to vascular diseases. In this study, we investigated whether Korean Red Ginseng (KRG) water extract suppressed acrolein-induced cyclooxygenase (COX)-2 expression in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Acrolein-induced COX-2 expression was accompanied by increased levels of phosphorylated p38 in HUVECs and KRG inhibited COX-2 expression in HUVECs. These results suggest that KRG suppresses acrolein-induced COX-2 expression via inhibition of the p38 mitogen-activated protein kinase signaling pathway. In addition, KRG exhibited an inhibitory effect on acrolein-induced apoptosis, as demonstrated by annexin Vepropidium iodide staining and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end-labeling assay. Consistent with these results, KRG may exert a vasculoprotective effect through inhibition of COX-2 expression in acrolein-stimulated human endothelial cells.
Hyperglycemia or high glucose (HG), is the hallmark of diabetes, known to induce oxidative stress, release of chemokines, and cytokines, which confer endothelial cell damage. On the other hand, microbial transformation of organic materials often leads to certain changes in their product structures which could enhance their biological activities. The aim of this study was to investigate the beneficial effects of fermented Gastrodia elata (FGE) in HG induced human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) dysfunction. GE, fermented by Saccharomyces cerevisiae, which has an extensive history of safe use, exhibited higher phenolic compounds content than those of Gastrodia elata (GE). The HG-induced production of nitric oxide (NO) and interleukin-8 (IL-8) were significantly attenuated by FGE pretreatment to the cells, in a concentration dependent manner. In addition, FGE showed marked activity in free radical scavenging. These results suggest that FGE possesses beneficial effects in protecting against the oxidative stress, and inflammatory conditions in endothelial cells, caused by HG.
Among pteridophytes, Selaginella involvens Spring and Equisetum orvense L. are used in folk medicine in Eastern Asian countries including Korea. The water extracts from Selaginella involvens spring (SW) and from Equistum arvense L (EW) did not affect viability of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). However, SW dose-dependently inhibited tube formation and migration of HUVECs, whereas EW did not. These results suggest that the water extract from Selaginella involvens Spring may have anti-angiogenic activity.
Inflammatory processes of vascular endothelial cells play a key role in the development ofatherosclerosis. We determined the anti-inflammatory effects and mechanisms of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) on LPS-treated human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) to evaluate their cardioproteerive potential. Cells were pretreated with DHA, EPA, or troglitazone prior to activation with LPS. Expression of COX-2, prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) and IL-6 production, and $NF-{\kappa}B$ activity were measured by Western blot, ELISA, and luciferase activity, respectively. Results showed that EPA, DHA, or troglitazone significantly reduced COX-2 expression, $NF-{\kappa}B$ luciferase activity, and $PGE_2$ and IL-6 production in a dose-dependent fashion. Interestingly, low doses (10 ${\mu}$M) of DHA and EPA, but not troglitozone, significantly increased the activity of $NF-{\kappa}B$ in resting HUVECs. Our study suggests that while DHA, EPA, and troglitazone may be protective on HUVECs under inflammatory conditions in a dose-dependent manner. However there may be some negative effects when the concentrations are abnormally low, even in normal endothelium.
Objective : Activated endothelial cells mediate the cascade of reactions in response to hypoxia for adaptation to the stress. It has been suggested that hypoxia, by itself, without reperfusion, can activate the endothelial cells and initiate complex responses. In this study, we investigated whether hypoxia-induced endothelial products alter the endothelial permeability and have a direct cytotoxic effect on nerve cells. Methods : Hypoxic condition of primary human umbilical vein endothelial cells[HUVEC] was induced by $CoCl_2$ treatment in culture medium. Cell growth was evaluated by 3,4,5-dimethyl thiazole-3,5-diphenyl tetrazolium bromide [MTT] assay Hypoxia-induced products [$IL-1{\beta},\;TGF-{\beta}1,\;IFN-{\gamma},\;TNF-{\alpha}$, IL-10, IL-6, IL-8, MCP-l and VEGF] were assessed by enzyme-linked immunosorbent assay. Endothelial permeability was evaluated by Western blotting. Results : Prolonged hypoxia caused endothelial cells to secrete IL -6, IL -8, MCP-1 and VEGF. However, the levels of IL -1, IL -10, $TNF-{\alpha},\;TGF-{\beta},\;IFN-{\gamma}$ and nitric oxide remained unchanged over 48 h hypoxia. Hypoxic exposure to endothelial cells induced the time-dependent down regulation of the expression of cadherin and catenin protein. The conditioned medium taken from hypoxic HUVECs had the cytotoxic effect selectively on neuroblastoma cells, but not on astroglioma cells. Conclusion : These results suggest the possibility that endothelial cell derived cytokines or other secreted products with the increased endothelial permeability might directly contribute to nerve cell injury followed by hypoxia.
Choi, Jong Seob;Piao, Yunxian;Kim, Kyung Hoon;Seo, Tae Seok
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2013년도 제45회 하계 정기학술대회 초록집
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pp.274.2-274.2
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2013
We described a simple and efficient fabrication method for generating microfluidic channels with a circular-cross sectional geometry by exploiting the reflow phenomenon of a thick positive photoresist. Initial rectangular shaped positive photoresist micropatterns on a silicon wafer, which were fabricated by a conventional photolithography process, were converted into a half-circular shape by tuning the temperature to around $105^{\circ}C$. Through optimization of the reflow conditions, we could obtain a perfect circular micropattern of the positive photoresist, and control the diameter in a range from 100 to 400 ${\mu}m$. The resultant convex half-circular photoresist was used as a template for fabricating a concave polydimethylsiloxane (PDMS) through a replica molding process, and a circular PDMS microchannel was produced by bonding two half-circular PDMS layers. A variety of channel dimensions and patterns can be easily prepared, including straight, S-curve, X-, Y-, and T-shapes to mimic an in vivo vascular network. To inform an endothelial cell layer, we cultured primary human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) inside circular PDMS microchannels, and demonstrated successful cell adhesion, proliferation, and alignment along the channel.
Ginseng is a widely-used alternative medicine for the treatment of cancer, diabetes, and cardiovascular diseases. Active components of P. ginseng, absorbed through gastrointestinal tract are the fermented ginsenosides by intestinal microorganisms. In the present study, we investigated the inhibitory effects of fermented ginseng with bifidobacterium (FGb) on the angiogenesis by analyzing in vitro tube formation and invasion assay using human umbilical vein endothelial cells (HUVECs), and in vivo angiogenesis using chick chorioallantoic membrane (CAM) assay. Treatment with FGb inhibited tube-like structure formation in a concentration-dependent manner. In addition, FGb significantly suppressed HUVEC invasion through Matrigel. Moreover, FGb dosedependently inhibited VEGF-induced angiogenesis in a CAM assay. These results suggest that FGb is a valuable anti-angiogenic remedy.
Kim, Ji-Hye;Kim, Gee-Hye;Kim, Jae-Won;Pyeon, Hee Jang;Lee, Jae Cheoun;Lee, Gene;Nam, Hyun
Molecules and Cells
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제39권11호
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pp.790-796
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2016
Dental pulp is a highly vascularized tissue requiring adequate blood supply for successful regeneration. In this study, we investigated the functional role of stem cells from human exfoliated deciduous teeth (SHEDs) as a perivascular source for in vivo formation of vessel-like structures. Primarily isolated SHEDs showed mesenchymal stem cell (MSC)-like characteristics including the expression of surface antigens and in vitro osteogenic and adipogenic differentiation potentials. Moreover, SHEDs were positive for NG2, ${\alpha}$-smooth muscle actin (SMA), platelet-derived growth factor receptor beta ($PDGFR{\beta}$), and CD146 as pericyte markers. To prove feasibility of SHEDs as perivascular source, SHEDs were transplanted into immunodeficient mouse using Matrigel with or without human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Transplantation of SHEDs alone or HUVECs alone resulted in no formation of vessel-like structures with enough red blood cells. However, when SHEDs and HUVECs were transplanted together, extensive vessel-like structures were formed. The presence of murine erythrocytes within lumens suggested the formation of anastomoses between newly formed vessel-like structures in Matrigel plug and the host circulatory system. To understand underlying mechanisms of in vivo angiogenesis, the expression of angiogenic cytokine and chemokine, their receptors, and MMPs was compared between SHEDs and HUVECs. SHEDs showed higher expression of1VEGF, SDF-$1{\alpha}$, and $PDGFR{\beta}$ than HUVECs. On the contrary, HUVECs showed higher expression of VEGF receptors, CXCR4, and PDGF-BB than SHEDs. This differential expression pattern suggested reciprocal interactions between SHEDs and HUVECs and their involvement during in vivo angiogenesis. In conclusion, SHEDs could be a feasible source of perivascular cells for in vivo angiogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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