Control of food pathogens is critical in food safety field. Norovirus is one of the major causes of gastroenteritis and food poisoning worldwide, however, currently, there is not a vaccine or a specific drug available for its treatment. There are several methods to inactivate norovirus during food processing by chemical and physical treatments, however, the use of natural substance has been suggested as an optional strategy due to their safety and consumer preference. In this study supported by Ministry of Food and Drug Safety in Korea, we identified novel plant-derived substances with significant anti-norovirus activities. The aim of this project was to determine the antiviral activity of a wide range of natural substances, including plant-derived extracts and essential oils, using a norovirus surrogate system, human norovirus replicon-bearing cells, and mouse in vivo experiments. During the activity screening test, we identified novel anti-norovirus substances or oils using plaque assay with MNV-1. Six selected substances were formulated into an optimum mixture and used as an ingredient for salad sauce of which anti-novovirus activity was confirmed(pending for patent and paper submission). The potential application of selected natural substances as a metal surface sanitizer was also tested. Interestingly, the mixture of selected natural compounds showed a significant inhibitory effect against norovirus. These results suggest that these substances may be used as food ingredient with anti-norovirus antivity or components for surface sanitizers to prevent norovirus contamination.
노로바이러스는 전 세계적으로 산발적인 발병 관련 비세균성 위장염의 주요 원인 물질이다. 노로바이러스 검출을 위해 역전사 실시간 PCR (RT qPCR)이 그 민감도와 특이성으로 인해 주요 수단으로 빠르게 자리 잡았다. 그러나 RT qPCR 분석을 위해서는 정확한 바이러스 RNA 추출방법이 필수적이다. TRIzol 시약은 생물학적 물질로부터 RNA의 추출에 이용되고 따라서 노로바이러스 RNA 추출에도 널리 사용된다. 이 연구에서는 인체 노로바이러스 유전체 그룹 I (GI) 및 유전자 그룹 II (GII)와 생쥐 노로바이러스(GV) 중에서 GII로부터의 TRIzol 을 이용한 바이러스 RNA의 추출률이 바이러스 시료 용액의 pH에 의존했다는 내용이 다루어졌다. 실시간 PCR의 Ct값으로 비교한 RNA 추출 수율은 산성 영역보다 알칼리성 pH에서 높았다. 이 연구 결과로 부터 TRIzol을 이용하여 GII RNA를 추출하여 노로바이러스를 정량적으로 분석할 때 pH조건이 대단히 중요하다는 것을 알 수 있었다.
Kim, Eun-Jin;Lee, Young-Duck;Kim, Kwang-Yup;Park, Jong-Hyun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제25권12호
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pp.2106-2109
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2015
The synergy effect of trisodium phosphate (TSP) and ethanol against murine norovirus 1 (MNV-1), as a surrogate for human noroviruses, on fresh produces was evaluated. More than 2% (w/v) of TSP effectively inactivated MNV-1. The single treatment of 1% TSP or 30% ethanol for 30 min was not effective on MNV-1; however, cotreatment showed inactivation of MNV-1 on stainless steel and the produces of lettuce and bell pepper under 15 min. The results suggest that cotreatment of TSP and ethanol at a low concentration and a short time of exposure might be useful for the reduction of norovirus in some produce.
Objectives: For our survey of the incidence of norovirus infections and the genogroup distribution of norovirus in Seoul, Republic of Korea, we evaluated through regular surveillance the prevalence of norovirus infections in patients with acute gastroenteritis occurring in Seoul from January 2007 to July 2011. Methods: For norovirus detection, we conducted epidemiological analyses on the basis of the junction of ORF1 and ORF2 (approximately 314 bp). 11,202 fecal specimens were collected from patients in Seoul with acute gastroenteritis between January 2007 and July 2011 and then tested for the presence of NoV via reverse transcription (RT) - polymerase chain reaction (PCR). Results: 16.6% (1,861/11,202) of the fecal specimens were determined to be positive for noroviruses. The incidences of norovirus infection in Seoul in the case of acute gastroenteritis with regular surveillance were 28.0% in 2007, 14.6% in 2008, 9.1% in 2009, 14.1% in 2010, and 12.9% in 2011, which shows that noroviruses constituted a major causative agent of acute gastroenteritis. Also, the incidence of noroviral infection in patients with acute gastroenteritis increased after the large-scale new influenza in 2009. Conclusions: The genetic characteristics of norovirus and the epidemiologic patterns of a viral pathogen in acute gastroenteritis patients may provide potentially effective data for epidemiological studies in Seoul, Korea.
This study investigated the reduction in human norovirus (HNV) GII. 4 count in pacific oyster Crassostrea gigas using electron beam irradiation. Infectious HNV GII. 4 was detected using RT-qPCR (real time reverse transcription-quantitative polymerase chain reaction) with PMA (propidium monoazide)/sarkosyl. At electron beam doses 1, 5, 7, and 10 kGy, the count of HNV GII. 4 was 2.74, 2.37, 2.06, and 1.55 log copies/μL (control, 3.01 log copy/μL), respectively, confirming that as the irradiation dose increased, norovirus count reduced significantly (P<0.05). After PMA/sarkosyl treatment, the counts further reduced at the same irradiation dose, and 10 kGy showed significant differences between the non-treated and PMA/sarkosyl-treated samples (P<0.05). The Ed (decimal reduction dose of electron beam) value based on the first-order kinetic model was 7.33 kGy (R2=0.98). No significant difference was observed in the pH values of the control (6.2) and electron beam-irradiated samples at all doses (6.1). For sensory evaluation, the non-treated sample scored the highest in all categories (5.25-6.17), while the samples treated with 10 kGy showed the lowest score (4.67-5.33), although without statistical significance (P>0.05). Overall, our results suggest that 7 kGy electron beam is sufficient for the non-thermal sterilization of oysters without causing significant changes in quality.
2003년부터 2007년까지 서울지역 집단식중독 환자에 대하여 RT-PCR을 이용하여 노로바이러스를 검출하였으며, 총 4,685건 중 노로바이러스가 383건(8.2%)이 검출되었다. 식중독 발생 사례는 2003년부터 2007년까지 57사례가 발생하였다. 계절별 유행양상은 겨울철에 가장 많이 검출되었다. 섭취장소별 유행양상은 학교급식 중 위탁경영에 의한 발생이 32%로 나타났으며, 일반음식점에 의한 발생이 29%로 나타났다. 본 연구는 서울지역 노로바이러스성 식중독 관리를 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
Korean red ginseng has been studied various biological activities such as immune, anti-oxidative, anti-microbial, and anticancer activities but antiviral mechanism needs further studies. In this study, we aimed to examine the antiviral effects of Korea red ginseng extract and ginsenosides on norovirus surrogate, including murine norovirus (MNV) and feline calicivirus (FCV). We evaluated the pre-, co-, and post-treatment effects of Korean red ginseng (KRG), ginsenosides $Rb_1$ and $Rg_1$. To measure the antiviral effect and cytotoxicity of KRG extract, and ginsenosides $Rb_1$ and $Rg_1$, we treated Crandell-Reese Feline Kidney for FCV or RAW264.7 cells for MNV with concentrations of 0, 5, 6.7, 10, 20 ug/mL total saponin. There was cytotoxic effect in the highest concentration 20 ug/mL of KRG extract so this concentration was excluded in this study. The FCV titer was significantly reduced to 0.23-0.83 $log_{10}$ 50% tissue culture infectious dose ($TCID_{50}$)/mL in groups pre-treated with red ginseng extract or ginsenosides. The titer of MNV was significantly reduced to 0.37-1.48 $log_{10}$$TCID_{50}$/mL in groups pre-treated with red ginseng extract or ginsenosides. However, there was no observed antiviral effect in groups co-treated or post-treated with KRG and its constituents. Our data suggest that KRG extract has an antiviral effect against norovirus surrogates. The antiviral mechanisms of KRG and ginsenosides should be addressed in future studies.
Antibacterial activity against foodborne bacteria (Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Salmonella Enteritidis) and inhibitory activity against murine norovirus, a human norovirus surrogate, of 28 extracts from plants endemic to Korea were investigated in this study. All plant extracts showed antibacterial activity only against gram-positive bacteria, B. cereus and S. aureus. Extracts from Callistemon speciosus and Nymphaea tetragona showed inhibition zones of 16.54 and 24.35 mm against B. cereus and S. aureus, respectively, presenting the highest antibacterial activities recorded in this study. Among all samples, Ardisia japonica extract at concentrations of 100 and 200 ㎍/mL showed the highest virucidal activities of 96.6 and 100.0%, respectively. Ardisia japonica, Duchesnea indica, Polygonum aviculare, and Geum japonicum extracts showed high antibacterial and virucidal activity simultaneously without Raw 264.7 cell cytotoxicity. These plant extracts may serve as potential antimicrobials to control foodborne infections.
인간노로바이러스는 바이러스성 식중독 원인의 대부분을 차지한다. 노로바이러스가 건강한 성인에 감염하면 설사 등의 병변을 몇 일간 일으키다 대부분 별다른 처치 없이도 치유되는 경우가 대부분이다. 그러나 면역기능이 약화된 환자에게 감염한 경우, 만성감염 내지 치명적 감염도 가능한 것으로 보고 되고 있다. 1968년에 처음 노로바이러스가 보고된 이후 세포 감염모델과 소동물감염 모델을 만들고자 하는 시도가 이어져 왔으나 대부분 실패하였다. 그러나 최근들어 세포감염 모델 개발에 있어 주목할 만한 기념비적인 연구들이 이루어졌다 것이 고무적이다 할 수 있다. 이번 총설에서는 새로 개발된 감염 모델들의 특징과 장단점을 살펴보고, 이를 더욱 개선할 수 있는 방향에 대하여 살펴보고자 한다.
노로바이러스는 국내에서도 지속적으로 유행성 바이러스성 위장염을 일으키고 있다. 노로바이러스 저감화사업단(NOROTECL)의 1중 2세부과제에서는 농산물의 노로바이러스 오염 원인을 추적조사하여 노로바이러스 전파를 예방하고 저감화하기 위한 과제를 수행하였다. 2015년 1월부터 11월 사이에 노로바이러스와 관련이 있을 것으로 추정되는 80개 농산물, 80개 토양, 78개 인체분변, 3개 가축분변, 80개 농업용수, 80개 하천수 시료를 대상으로 노로바이러스, Male specific coliphage (MSC), 위생지표세균(Coliform, E. coli) 세 가지 검사를 통해 오염현황을 조사하였다. Semi-nested PCR과 DNA sequencing을 통해 18개의 Genogroup I과 3개의 Genogroup II 노로바이러스가 총 18개의 시료에서 발견되었다. Genogroup이 확정된 노로바이러스에 대하여 RT-PCR을 진행하였다. 대장균군과 대장균은 농산물에서 68%와 1%, 토양에서 88%와 7.5%, 인체분변에서 44%와 12.8%, 가축 분변에서 67%와 67%, 농업용수에서 74%와 30%, 하천수에서 96%와 51%의 검출율을 각각 나타냈다. MSC 결과에서는 14개의 시료가 양성으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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