Objective: Recent studies have challenged the traditional paradigm that growth hormone receptor (GHR) displays physiological functions only in the cell membrane. It has been demonstrated that GHR localizes to the cell nucleus and still exhibits important physiological roles. The phenomenon of nuclear localization of growth hormone (GH)-induced GHR has previously been described in vitro. However, until recently, whether GH could induce nuclear localization of GHR in vivo was unclear. Methods: In the present study, we used pig as an animal model, and porcine growth hormone (pGH) or saline was injected into the inferior vena cava. We subsequently observed the localization of porcine growth hormone receptor (pGHR) using multiple techniques, including, immunoprecipitation and Western-blotting, indirect immunofluorescence assay and electronmicroscopy. Results: The results showed that pGH could induce nuclear localization of pGHR. Taken together, the results of the present study provided the first demonstration that pGHR was translocated to cell nuclei under pGH stimulation in vivo. Conclusion: Nuclear localization of pGHR induced by the in vivo pGH treatment suggests new functions and/or novel roles of nuclear pGHR, which deserve further study.
Biotinylation of recombinant proteins is a powerful tool for the detection and analysis of proteins of interest in a large variety of assay systems. The recent development of in vivo biotinylation techniques in E. coli has opened new possibilities for the production of site-specifically biotinylated proteins without the need for further manipulation after the isolation of the recombinantly expressed proteins. In the present study, a novel vector set was generated which allows the convenient cloning and expression of proteins of interest fused with an N-terminal in vivo biotinylated thioredoxin (TRX) protein. These vectors were derived from the previously reported pBIOTRX vector into which was incorporated part of the pBluescript II+phagemid multiple cloning site (MCS), amplified by PCR using a pair of sophisticated oligonucleotide primers. The functionality of these novel vectors was examined in this system by recombinant expression of rat transforming growth factor-$\beta$. Western-blot analysis using TRX-specific antibodies or peroxidase-conjugated streptavidin confirmed the successful induction of the fusion protein and the in vivo conjugation of biotin molecules, respectively. The convenience of molecular subcloning provided by the MCS and the effective in vivo biotinylation of proteins of interest makes this novel vector set an interesting alternative for the production of biotinylated proteins.
Journal of the Korean Crystal Growth and Crystal Technology
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v.15
no.6
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pp.229-233
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2005
Novel process was tried to obtain micro-porous ceramic body containing continuous pore channel. $MgAl_2O_4/MgO$ eutectic fibers and rods have been grown successfully by the micro-pulling-down method, and the microstructures and optical characterizations of grown crystals were performed. $MgAl_2O_4/MgO$ eutectic fibers of $0.3{\sim}1mm$ in diameter and about 500 mm in length, and the rods having 5 mm in diameter with approximately 60 mm in length have been grown with the $6{\sim}120mm/hr$ of growth speed. The eutectic fibers showed homogeneous microstructure in which MgO fiber aligned to the growth direction in the $MgAl_2O_4$ (spinel) matrix. The grown crystals looked semitransparency under naked eyes. Optical and orientational characterizations were performed. The second phase of MgO (periclase) was easily removed by selective etching with hydrochloric acid, and then porous bodies were obtained.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2012.08a
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pp.78-78
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2012
In this presentation I will review the expanding thermal plasma chemical vapour deposition (ETP-CVD) technology, a deposition technology capable of reaching ultrahigh deposition rates. High rate deposition of a-Si:H, ${\mu}c$-Si:H, a-SiNx:H and silicon nanocrystals will be discussed and their various applications, mainly for photovoltaic applications demonstrated. An important aspect over the years has been the fundamental investigation of the growth mechanism of these films. The various in situ (plasma) and thin film diagnostics, such as Langmuir probes, retarding field analyzer, (appearance potential) mass spectrometry and cavity ring absorption spectroscopy, spectroscopic ellipsometry to name a few, which were successfully applied to measure radical and ion density, their temperature and kinetic energy and their reactivity with the growth surface. The insights gained in the growth mechanism provided routes to novel applications of the ETP-CVD technology, such as the ultrahigh high growth rate of silicon nanorystals and surface passivation of c-Si surfaces.
Dietary flavonoids are currently receiving considerable attention in developing novel cancer-preventive approaches because of their potential capacities to actively induce apoptosis of cancer cells. In our previous report, a flavonoid fraction, which consisted mainly of protocatechuic acid, fustin, fisetin, sulfuretin, and butein and named RCMF (RVS chloroform-methanol fraction), was prepared from a crude acetone extract of Rhus verniciflua Stokes (RVS) that is traditionally used as food additive and herbal medicine. In this study, we evaluated the effects of the RCMF on cell proliferation and apoptosis using SV40-transformed tumorigenic hepatocytes, BNL SV A.8. Tritium uptake assay showing the proliferative capacity of the cells was strongly suppressed in the presence of RCMF. This anti-proliferative effect was further confirmed through trypan blue exclusion. RCMF-mediated suppression of cell growth was verified to be apoptotic, based on the increase in DNA fragmentation, low fluorescence intensity in nuclei after propidium iodide staining, and the appearance of DNA laddering. Collectively, this study demonstrated that RCMF can be approached as a potential agent that is capable of significantly inhibiting cell growth of hepatic cancer cells.
Sato Yoshinori;Kaneko Kenichi;Sasahara Takeshi;Inoue Matsuhisa
Journal of Microbiology
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v.44
no.1
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pp.98-105
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2006
Yersinia enterocolitica induces a broad range of gastrointestinal syndromes, including acute enteritis. We previously reported that the clinical isolate, Y. enterocolitica KU14, which lacks pYV, was still capable of causing clinical infection. The present study demonstrated that KU14 did not trigger the death of macrophages in vitro, unlike WA-314 (ATCC51871, which harbors the pYV virulence plasmid). However, the intracellular growth of KU14 in the macrophages was greater than that of WA-C (ATCC51872, a non-plasmid harboring the derivative pYV plasmid). Treatment with a cholesterol-binding drug $(\beta-cyclodextrin)$ that affected lipid rafts resulted in a dramatic reduction in the inracellular growth of KU14. These data clearly indicate that the enhanced inracellular growth of KU14 is related to lipid raft-mediated infection.
In the present work, a new approach is proposed for via interconnects of semiconductor devices, where multi-wall carbon nanotubes (MWCNTs) are used instead of conventional metals. In order to implement a selective growth of carbon nanotubes (CNTs) for via interconnect, the buried catalyst method is selected which is the most compatible with semiconductor processes. The cobalt catalyst for CNT growth is pre-deposited before via hole patterning, and to achieve the via etch stop on the thin catalyst layer (ca. 3nm), a novel 2-step etch scheme is designed; the first step is a conventional oxide etch while the second step chemically etches the silicon nitride layer to lower the damage of the catalyst layer. The results show that the 2-step etch scheme is a feasible candidate for the realization of CNT interconnects in conventional semiconductor devices.
Aged black garlic (ABG) was extracted with 20% ethanol and water (crude extracts) and fractionated into three categories (>10, 3-10, and <3 kDa). The effect of crude extract supplements on anti-My-10 hybridoma cell growth and IgG1 antibody production was investigated in suspension culture with a chemically defined protein-free medium. We observed that supplementation of ABG to the cell culture medium stimulated anti-My-10 hybridoma cell growth and production of IgG1 antibody, particularly with fractionated ABG of low molecular weight. The stimulation depended upon the concentration and the size of the fractionated ABG. We also found that the growth-promoting activity was not correlated with high antibody production. These results suggest that fractionated ABG is a novel and promising alternative as an animal cell culture supplement.
Heterotrimeric GTP binding proteins (G proteins) mediate signals generated by neurotransmitters and hormones Among G proteins, Go is found in a large quantity in brain and growth cone membranes of neurons. In spite of its abundance in neurons, the role of Go is not fully understood. In our previous study, we identified promyelocytic leukemia zinc finger protein (PLZF) as an interacting partner of alpha subunit of Go ($Go{\alpha}$) and confirmed their interaction employing several biochemical assays. To date, it is reported that PLZF functioned as a cell growth suppressor and a transcription repressor. To determine effect of $Go{\alpha}$ and PLZF interaction on the cellular function of PLZF, we performed luciferase reporter gene assay and BrdU incorporation assay. Co-expression of $Go{\alpha}$ and PLZF synergistically increased the effect of PLZF alone. These results suggest that $Go{\alpha}$ may act as cellular activator of PLZF. This novel feature of Go may provide insights into understanding diverse role of Go-coupled receptor as well as its cellular actions.
International Journal of Advanced Culture Technology
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v.12
no.1
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pp.85-93
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2024
In this paper, focusing on Oscar Wilde's novel "The Picture of Dorian Gray," we explore the protagonist's lack of conscience and unethical attitude, emphasizing its relevance to our self-development and growth. The primary goal is to interpret the impact of Dorian Gray's actions and choices on personal development and growth, highlighting the importance of a specific mindset and attitude to the reader. It dissects how Wilde navigates the intricate layers of Dorian's character, exposing the ethical dilemmas and transformative moments that contribute to the profound changes within him. The examination sheds light on the depth and complexity of Dorian Gray's character, offering readers a nuanced understanding of the forces at play in his moral and psychological journey. Interpretation of Wilde's intent to impart lessons on the reader's personal growth and development through Dorian's story is undertaken. The discussion also explores the impact of Dorian's unethical attitude on contemporary readers and its influence on our daily lives and values.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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