Kim, Su-Jung;Kim, Hong-Gyum;Kim, Byung-Chul;Kim, Kyunghoon;Park, Eun-Hee;Lim, Chang-Jin
Journal of Microbiology
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제42권3호
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pp.233-238
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2004
Transcriptional regulation of the Schizosaccharomyces pombe y-glutamylcysteine synthetase (GCS) gene was examined using the two GCS-lacZ fusion plasmids pUGCS101 and pUGCS102, which harbor 607 bp and 447 bp upstream regions, respectively. The negatively-acting sequence was located in the -607 - -447 bp upstream region of the GCS gene. The upstream sequence responsible for induction by menadione(MD) and L-buthionine-(S, R)-sulfoximine (BSO) resides in the -607 - -447 bp region, whereas the sequence which codes for nitric oxide induction is located within the -447 bp region, measured from the translational initiation point. Carbon source-dependent regulation of the GCS gene appeared to be dependent on the nucleotide sequence within -447 bp region. The transcription factor Papl is involved in the induction of the GCS gene by MD and BSO, but not by nitric oxide. Induction of the GCS gene occurring due to low glucose concentration does not depend on the presence of Pap1. These data imply that induction by MD and BSO may be mediated by the Pap1 binding site, probably located in the -607 - -447 region, and also that the nitric oxide-mediated regulation of the S. pombe GCS gene may share a similar mechanism with its carbon-dependent induction.
글루타치온 생산증대를 도모하기 위하여 글루타치온 합성에 관여하는 효소들인 GSH-I 및 GSH-II 유전자들 pBR322 벡터에 클로닝하였다. gshI 유전자를 클로닝하기 위하여 GSH-I 효소활성이 결여된 GS903 균주를 분리하였다. E. coli K-12 염색체 DNA로부터 분리된 3.6Kb PstI DNA 절편을 pBR322 벡터에 클로닝하였다. gshII 유전자는 2.2Kb PstI-BamHI DNA 절편내에 존재하며 이 절편을 pUC13 벡터에 클로닝하였다. 플라스미드의 copy number와 gsh 유전자들을 포함하고 있는 삽입 DNA의 크기의 차이에 의한 gsh 유전자들의 발현 정도를 조사하기 위하여 pGH1090, pGH101, pGH200, pGH201, pLF4, pLF6 그리고 pGH300같은 여러 플라스미드를 사용함으로써 gshI 유전자의 발현이 의해 2배이상 증가하였다. 그러나 벡터 플라스미드내에 존재하는 gsh 유전자들을 포함하는 삽입 DNA의 크기의 차이에 의해서는 gsh 유전자들의 발현이 영향을 받지 않았다.
Aging occurs as a part of maturation as the time progresses which manifests in the human body causing morphological and functional degeneration, eventually leading to death. This experimental study was conducted to investigate a herbal formula to fortify the heart with easy clinical applications. Sungshimsan was chosen to study its effects in heart lipid peroxide and metabolic enzyme system in senescence induced rats. After pre-treatment of Sungshimsan for 2 weeks at the dosage of A (100mg/kg), B (250mg/kg), C (350mg/kg), and D (500mg/kg), a lipid peroxide and metabolic enzyme system changes of the heart were meaured in 32 weeks old rats. The following results were obtained in this study: 1. The contents of lipid peroxide was significantly reduced in the experimental groups treated with greater than 2 weeks at 250mg/kg. 2. The enzymatic activity of cytochrome P-450, cytochrome b5, and NADPH-cytochrome P450 reductase were significantly decreased in the 250mg/kg, 350mg/kg, and 500mg/kg experimental groups. 3. The activity of glutathione and glutathione S-transferase were significantly increased in the 250mg/kg, 350mg/kg, and 500mg/kg experimental groups. 4. The activity of glutathione reductase and glutathione peroxidase were not influenced compared to the control group. 5. The activity of ${\gamma}$-glutamylcystein synthetase was significantly increased in the 250mg/kg, 350mg/kg, and 500mg/kg experimental groups. 6. The activity of enzymes detoxificatioon superoxide dismutase and catalase were not influenced compared to the control group. Summarizing above results suggest that the Sungshimsan has profound effects in the heart lipid peroxide, free radicals, and delaying the heart aging process. Further clinical researches and application can be anticipated on the topic of senility and gerontology.
엽산과 유사한 구조를 가져 관절염 치료제로 쓰이는 methotrexate (MTX)의 당뇨병 쥐에서의 신독성 기전을 구명할 목적으로 실험동물 정상군과 STZ로 당뇨를 유발한군에 MTX률 투여하여 신장 독성을 유발하여 혈중 생화학적 변화를 관찰하고 free radical의 생성계와 해독계의 활성에 미치는 영향을 관찰하였다. 혈중 신장기능 지표 효소 및 신장조직의 지질과산화 함량이 정상군에 MTX를 투여한 군에 비해 당뇨쥐에 MTX를 투여한 군에서 현저히 증가하였다. 당뇨쥐에 MTX를 투여함으로써 활성산소 생성계인 phase I 단계 중 cytosol 효소계 활성이 정상쥐에 MTX를 투여한 군에 비하여 현저히 증가하였고, phase II 단계 중 glutathione S-transferase의 활성이 정상쥐에 MTX를 투여하였을때에 비하여 당뇨쥐에 MTX를 투여하였을때 현저히 감소하였다. 신조직 중 glutathione의 함량 또한 당뇨쥐에 MTX를 투여했을때 현저히 감소하였고 이러한 결과는 $\gamma$-glutamylcysteine synthetase와 glutathione reductase의 활성을 감소시킨 결과로 생각된다. 이상의 결과를 종합하여 볼때 당뇨쥐에 MTX를 투여하면 신독성이 증가함을 확인할 수 있었고, 그 기전은 cytosol계 효소 활성을 증가시켜 MTX의 대사계를 촉진시킴으로 독성물질의 생성을 증가시키고, 이로 인한 신조직중의 지질과산화 함량의 증가는 glutathione의 함량 감소에 의해 나타나는 결과로 사료되어진다.
In this study, we investgated the effect of Red Ginseng (KRG) on liver damage induced by carbon tetrachloride (CTC) and galactosamine (GalN) in rats using indicator enzymes such as serum alanine/aspartate aminotransferases, sorbital dehydrogenase, lactate dehydrogenase, and ${\gamma}$-glutamyltransferase. Treatment of KRG restored these enzyme activities to near normal level compared to CTC or GalN treatment alone. Treatment of KRG also enhanced hepatic microsomal enzyme system, malondialdehyde formation, and depletion of reduced glutathione content, which were reduced by CTC or GalN. We also found that the decreased activities of glutathione S-transferase and glutathine reductase but not ${\gamma}$-glutamycysteine synthetase after KRG treatment restored to normal level. These results indicate that KRG has potent therapeutic activity against CTC- and GalN-induced hepatotoxicity in rat.
Delphinidin, an aglycone form of anthocyanins, was demonstrated to have anti-carcinogenic potential. The compound at $50\;{\mu}g/mL$ caused a significant increase of quinone reductase activity, an anti-carcinogenic marker enzyme, in mouse hepatoma cell lines (Hepa1c1c7 and BPRc1). Delphinidin enhanced the expression of other detoxifying or antioxidant enzymes including glutathione s-transferase, gamma-glutamylcysteine synthetase, heme oxygenase 1, and glutathione reductase. It suppressed the proliferation of murine hepatoma cells in a dose-dependent manner, with approximately $IC_{50}$ of $70\;{\mu}g/mL$. These results suggest that delphinidin might be useful for cancer prevention.
The experimental studies were carried out in order to prove the effect of BSH water extract on Renal lipid peroxide content and metabolic enzyme system experimental studies about peroxide content, transferase, enzyme activity were carried out. The result were obtained as follows : 1. In the change of lipid peroxide of renal tissue, all group was decreased, more of two weeks was decreased. 2. In the Change of BUN of renal tissue, all group was decreased. 3. In the change of LDH of urine, all group was not significant. 4. In the change of ${\gamma}$-glutamyltransferasde, Xanthine oxidase, Aldehyde oxidase of urine, all group was decreased. 5. In the change of protein-bound SH, nonprotein-bound SH, glutathione, glutathione S-transferase, ${\gamma}$-Glutamylcystein synthetase of renal tissue, all group was increased. From above results, BSH was had significant effects on the senile, so it is expected to clinical application on senility and geratology.
In beer, glutathione works as the main antioxidant compound, which also correlates with the stability of the beer flavor. In addition, high residual sugars in beer contribute to major nonvolatile components, which are reflected in a high caloric content. Therefore, in this study, the Saccharomyces cerevisiae GSH1 gene encoding glutamylcysteine synthetase and the Saccharomycopsis fibuligera ALP1 gene encoding ${\alpha}$-amylase were coexpressed in industrial brewing yeast strain Y31 targeting the ${\alpha}$-acetolactate synthase (AHAS) gene (ILV2) and alcohol dehydrogenase gene (ADH2), resulting in the new recombinant strain TY3. The glutathione content in the fermentation broth of TY3 increased to 43.83 mg/l as compared with 33.34 mg/l in the fermentation broth of Y31. The recombinant strain showed a high ${\alpha}$-amylase activity and utilized more than 46% of the starch as the sole carbon source after 5 days. European Brewery Convention tube fermentation tests comparing the fermentation broths of TY3 and Y31 showed that the flavor stability index for TY3 was 1.3-fold higher, whereas its residual sugar concentration was 76.8% lower. Owing to the interruption of the ILV2 gene and ADH2 gene, the contents of diacetyl and acetaldehyde as off-flavor compounds were reduced by 56.93% and 31.25%, respectively, when compared with the contents in the Y31 fermentation broth. In addition, since no drug-resistant genes were introduced to the new recombinant strain, it should be more suitable for use in the beer industry, owing to its better flavor stability and other beneficial characteristics.
Bobitang(BBT) is one of the most important prescription that has been used in oriental medicine(dongyibogam) for recovering spleen condition. The study was done to evaluate effects of BBT water extract on the spleen lipid peroxide content and metabolic enzyme system changes. After pretreatment of BBT I (100mg/kg), BBT II(250mg/kg), BBT III(350mg/kg), BBT IV(500mg/kg) for 1 week, lipid peroxide content and metabolic enzyme system changes of the spleen was measured in 8 months rats. The results were obtained as follows : 1. The content of spleen lipid peroxide was significantly decreased in all experimental groups as compared with control, and best in BBT III IV treated groups. 2. The activity of spleen superoxide generation was significantly decreased in all experimental groups as compared with control, and best in BBT IV III treated groups. 3. The activity of cytochrome P-450 and aminopyrine demethylase wasn't significant change. 4. The activity of aniline hydroxylase was significantly decreased in BBT IV II treated groups, xanthine oxidase was significantly decreased in all experimental groups, aldehyde oxidase was significantly decreased in BBT IV treated group as compared with control. 5. The activity of antioxidant enzymes as superoxide dismutase, catalase, glutathione peroxidase was significantly increased in all experimental groups as compared with control. 6. The activity of glutathion S-transferase was significantly increased in all experimental groups, the concentration of spleen glutathione was significantly increased in BBT IV treated group as compared with control. 7. The activity of ${\gamma}$ -glutamylcystein synthetase was significantly increased in BBT III IV I treated groups as compared with control, the activity of glutathione reductase wasn't significant change. From the above results, BBT is cosidered to have effect of remove peroxide content and free radical that was made during ageing process. It is expected that treatment of BBT can be applied in future clinical study of delaying the ageing process.
Background: Panax notoginseng saponins (PNS) are bioactive substances extracted from P. notoginseng that are widely used to treat cardiovascular and cerebrovascular diseases and interstitial diseases. PNS have the functions of scavenging free radicals, anti-inflammation, improving blood supply for tissue and so on. Objectives: The aim of this study was to investigate the effects of PNS on the oxidative stress of immune cells induced by porcine circovirus 2 (PCV2) infection in vitro and in vivo. Methods: Using an oxidative stress model of PCV2 infection in a porcine lung cell line (3D4/2 cells) and mice, the levels of nitric oxide (NO), reactive oxygen species (ROS), total glutathione (T-GSH), reduced glutathione (GSH), and oxidized glutathione (GSSG) and the activities of xanthine oxidase (XOD), myeloperoxidase (MPO) and inducible nitric oxide synthetase (iNOS) were determined to evaluate the regulatory effects of PNS on oxidative stress. Results: PNS treatment significantly reduced the levels of NO and ROS, the content of GSSG and the activities of XOD, MPO, and iNOS (p < 0.05), while significantly increasing GSH and the ratio of GSH/GSSG in infected 3D4/2 cells (p < 0.05).Similarly, in the in vivo study, PNS treatment significantly decreased the level of ROS in spleen lymphocytes of infected mice (p < 0.05), increased the levels of GSH and T-GSH (p < 0.05), significantly decreased the GSSG level (p < 0.05), and decreased the activities of XOD, MPO, and iNOS. Conclusions: PNS could regulate the oxidative stress of immune cells induced by PCV2 infection in vitro and in vivo.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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