PCR-mediated recombination describes the process of in vitro chimera formation from related template sequences present in a single PCR amplification. The high levels of genetic redundancy in eukaryotic genomes should make recombination artifacts occur readily. However, few evolutionary biologists adequately consider this phenomenon when studying gene lineages. The cytosolic glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase gene (GapC), which encodes a NADP-dependent nonphosphorylating glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in the cytosol, is a classical lowcopy nuclear gene marker and is commonly used in molecular evolutionary studies. Here, we report on the occurrence of PCR-mediated recombination in the GapC gene family of Hibiscus tiliaceus. The study suggests that recombinant areas appear to be correlated with DNA template secondary structures. Our observations highlight that recombination artifacts should be considered when studying specific and allelic phylogenies. The authors suggest that nested PCR be used to suppress PCRmediated recombination.
Human endogenous retroviral long terminal repeats (LTRs) have been found to be coexpressed with sequences of genes located nearby. It has been suggested that the LTR elements have contributed to the structural change or genetic variation of human genome connected to various diseases. The HERV-W family has been identified in the cerebrospinal fluids and brains of individuals with schizophrenia. Using a cDNA library derived from a human brain, the HERV-W LTR elements were examined and five new LTR elements were identified. These elements were examined using a YAC clone panel from the Xq21.3 region linked to psychosis that was replicated on the Y chromosome after the separation of the chimpanzee and human lineages. Fourteen elements of the HERV-W LTR were identified in that region. Those LTR elements showed a high degree of sequence similarity ($91.8-99.5\%$) with previously reported HERV-W LTR. A phylogenetic tree obtained from the neighbor-joining method revealed that new HERV-W LTR elements were closely related to the AXt000960, AF072504, and AF072506 from the GenBank database. The data indicates that several copy numbers of the HERV-W LTR elements exist on the Xq21.3 region and are also expressed in the human brain. These LTR elements need to be further investigated as potential leads to neuropsychiatric diseases.
Toxoplasma 3 main clonal lineages are designated as type I, II, and III; however, atypical and mixed genotypes were also reported. This study was conducted for detection of Toxoplasma gondii genotypes in rats (Rattus rattus) in Riyadh region, Saudi Arabia. PCR test on T. gondii B1 gene was conducted on ELISA IgM positive samples for confirmation of the infection. However, genetic analysis of the SAG2 locus was performed to determine T. gondii genotypes using PCR-RFLP technique. PCR test on T. gondii B1gene showed that 22 (81.5%) out of the 27 ELISA IgM positive samples have T. gondii DNA. Genotypic analysis shows that, of the total 22 PCR positive samples, only 13 (59.1%) were of type II, 7 (31.8%) were of type III, and 2 (9.1%) were of an unknown genotype. It is obvious that the prevalence of both type II and III is high in rats. No reports have been available on T. gondii genotypes among rats in Riyadh region, and only little is known about its seroprevalence in rats. Future studies on T. gondii genotypes in rats using multi-locus markers is needed in Riyadh region, Saudi Arabia for better understanding of T. gondii pathogenesis and treatment in humans and animals.
The occurrence of Austroboletus subflavidus and Fistulinella gloeocarpa is documented from the Dominican Republic. The latter species is reported for the first time outside its original locality in Martinique, extending the geographic range for this uncommon pinkish-spored bolete. A detailed morphological description is provided for each species and accompanied by color pictures of fresh basidiomes in habitat and line drawings of the main anatomical features. Both species represent independent lineages within their respective genera based on phylogenetic inference. In addition, A. subflavidus clusters in a sister lineage to the core Austroboletus clade (Austroboletus clade I) here named as Austroboletus clade II. In order to confirm the accuracy of species identification, their identity and relationships were subjected to multilocus phylogenetic analyses of three gene markers (ITS, nrLSU, RPB2) including genetic material already available in public databases. Austroboletus subflavidus is a widely distributed species in North and Central America, whereas F. gloeocarpa is apparently highly localized and seems to appear sparingly in the Dominican Republic, Martinque, and southern Florida. Comparisons with morphologically similar and molecularly inferred allied species are also presented and discussed.
JEONG WON JIN;LIM YOUNG WOON;LEE JIN SUNG;JUNG HACK SUNG
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.5
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pp.1028-1038
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2005
To elucidate phylogenetic relationships of Phellinus and its related genera, nuclear internal transcribed spacer and mitochondrial small subunit ribosomal DNA sequences from 65 strains were determined and compared. The combined dataset of two sequences increased informative characters and led to the production of trees with higher levels of resolution. Phylogenetic analysis of the combined dataset revealed thirteen evolutionary lineages and several unresolved species that were together subdivided into two large clusters consisting of oligonucleate species and binucleate species. These results coincided with previous cytological, morphological, and molecular studies. It is newly recognized that the Phellinus linteus complex forms a sister clade to Inonotus, and that Fulvifomes is somehow related to Inocutis. The Phellinus linteus complex of dimitic perennial taxa made an independent clade from Inonotus and suggested that hyphal miticity and fruitbody permanence had enough phylogenetic significance to keep the complex within the traditional genus Phellinus. Taxa lacking setae were clustered into Fulvifomes, Phylloporia, Inocutis, and Fomitiporia, and the first three were closely related sister groups, but Fomitiporia was a genus distantly related to them. Several taxa with branched setae were shown among distantly related genera. Molecular evidence indicated that the ancestral nuclear type could be a binucleate feature, and that there might be parallel gains of branched setae and parallel losses of setae in the Hymenochaetales.
The variability of mtDNA hypervariable segment I (HVS I) sequences was investigated in a total of 48 birds belonging to 12 Chinese native chicken breeds. Sixteen haplotypes were identified from 35 polymorphic nucleotide sites which accounted for 6.4% of a sequenced 544 bp fragment. Diversity analysis of the haplotypes showed that Tibetan, Langshan and Henan cockfight chicken had only one haplotype, while ancient haplotypes existed in Taihe silky and Chahua chicken. Phylogenetic analysis of the haplotypes suggested that Chinese native chicken breeds shared 5 maternal lineages and some breeds would share the same maternal lineage, regardless of their external features and ecological types. Both divergent and phylogenetic analysis of the haplotypes indicated the close genetic relationships between the Chinese native chicken breeds and G. g. gallus and G. g. spadiceus from different areas, which implied that G. g. gallus and G. g. spadiceus were the original ancestors of the Chinese native chicken breeds.
Kim, Yoo-Kyung;Park, Su-Gon;Han, Sang-Hoon;Han, Sang-Hyun;Oh, Hong-Shik
Journal of Life Science
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v.26
no.7
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pp.749-757
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2016
This study was carried out to reveal the genetic population structure of the Jeju Island population and the phylogenetic relationship of East Asian populations of the large-footed bat (Myotis macrodactylus) based on the genetic polymorphisms of mitochondrial cytochrome B (CYTB) and NADH dehydrogenase subunit 1 (ND1) gene sequences. A total of fourteen and nine haplotypes were found in the CYTB and ND1 sequences from East Asian bats, respectively. Haplotype distribution showed locality specific patterns. The results from ND1 haplotype analysis showed that the Jeju Island population has four haplotypes: the Mt. Halla and Western subpopulations have three ND1 haplotypes, but the Eastern subpopulation has just a single haplotype Nd03, which is commonly found on this island. The neighbor-joining (NJ) tree showed the closer relationship between Jeju Island and Japan rather than that between Jeju and Gangwon-do Province. The divergence time between the maternal ancestor lineages of Japanese and Chinese populations was estimated to be 0.789±0.063 MYBP. The secondary divergence between Jeju and Japanese bats was calculated about to be 0.168±0.013 MYBP. The Jeju population has immigrated to the island at least fifty thousand years ago. In addition, ND1 haplotype analysis suggested that the insular bats have experienced at least two further genetic differentiation events within this island. Consequently, these findings suggested that the results of this study may play a critical role in understanding the phylogenetic relationship among East Asian bat populations of M. macrodactylus. To prepare more explainable information on evolutionary correlation, analysis is still required to examine using expanded samples from China, Russia, and southern parts of the Korean Peninsula.
Lee, Young Sun;Kim, Gyoung Hee;Koh, Young Jin;Jung, Jae Sung
Journal of Life Science
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v.30
no.1
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pp.1-9
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2020
Pseudomonas syringae pv. actinidiae, the causal agent of a bacterial canker disease in kiwifruit, is subdivided into five genetically distinct populations, namely biovars 1, 2, 3, 5, and 6. Of these, strains belonging to biovar 3 are responsible for a pandemic bacterial canker of kiwifruits since 2008. This study aimed to characterize the structure of the biovar 3 population and investigate the origin of biovar 3 strains isolated in Korea. The genetic variability of fifteen biovar 3 strains, thirteen Korean and two Chinese, were evaluated through random amplified polymorphic DNA (RAPD)-PCR. The RAPD results revealed the presence of eight lineages, designated as subgroups I-VIII, across the biovar 3 strains used in this study. As the strains in subgroups II and III from China were not found in the Korean examples, we concluded that six genetically different biovar 3 subgroups (I, IV, V, VI, VII, and VIII) are present in Korea. In PCR analysis using primers specific to the strains of New Zealand and Europe, Korean strains in subgroups V and VI amplified the relevant DNA bands, suggesting that these were introduced from these two origins, respectively. PCR primers specific to subgroup VIII were developed to monitor the spread of the first biovar 3 strain in Korea, and investigations revealed that this strain was not found in Korea after its first occurrence.
Kim, Jae-Hwan;Cho, Chang-Yeon;Choi, Seong-Bok;Cho, Young-Moo;Yeon, Seung-Hum;Yang, Boh-Suk
Journal of Life Science
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v.21
no.9
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pp.1329-1335
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2011
Korean native goats, which are characterized by black coat color, have existed on the Korean peninsula for a long time. Until now, there has been no comprehensive investigation concerning their genetic diversity, phylogenetic analysis or origin. In this study, we investigated the genetic diversity and verified phylogenetic status of the Korean native goat using the 453-bp fragment of the hypervariable fragment I (HVI) of mitochondrial DNA (mtDNA) D-loop region from 60 individuals among 5 populations. The Korean native goat showed less haplotype diversity when compared with goats from other countries. In addition, 6 haplotypes that had not been previously reported were verified in this study. In phylogenetic analyses with other country's goats, 10 haplotypes from Korean native goats were classified into mtDNA lineage A. Moreover, in a phylogenetic tree for goats which contained mtDNA lineage A, 8 of 10 haplotypes could be included in a subgroup with goats from Vietnam and an area of China. However, none of the remaining haplotypes belonged to a major group of Korean native goats and were located on different independent positions. These results suggest that almost Korean native goats aligned more closely to China and Vietnam breeds in mtDNA lineage A and there was no gene flow from other mtDNA lineages. Our results will contribute to conservation strategies and genetic breeding of Korean native goats.
Kim, Yu Rim;Jang, Ji Eun;Choi, Hee-kyu;Lee, Hyuk Je
Korean Journal of Environmental Biology
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v.38
no.4
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pp.650-657
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2020
We conducted a phylogeographic analysis of Korean endemic Zacco koreanus populations inhabiting the East-flowing river (Gangneung Yeongokcheon; GY, Yangyang Namdaecheon; YN), the Han River (Seomgang; SG, Soksacheon; SS), and the Nakdong River(Gilancheon; GA) using the mitochondrial DNA cytochrome oxidase I (COI) gene (619 bp). Population genetic analysis was further performed to assess the population connectivity for the GY river where there is a large number of human-made artificial weirs with several fishways. The phylogeographic analysis revealed that while the populations of the East-flowing river and those of the Han River formed a monophyletic lineage, the Nakdong River individuals represented a distinct lineage with 3.7-4.2% (mean=4.0%) genetic distance from the other lineages. The population genetic analysis of the GY showed that a mid-stream population harbored relatively higher mitochondrial diversity relative to up- and down-stream populations, and there was no genetic differentiation between these three populations. The latter findings might suggest high genetic connectivity between the populations via genetic flow along the fishways. However, an analysis using faster-evolving genetic markers, such as microsatellites, is needed to confirm the findings of high population connectivity. Our study suggests the possibility of the presence of cryptic species in Z. koreanus in the Nakdong River basin. However, further study with more individual samples as well as additional markers or even more advanced genomic tools is required to test our hypothesis. Ecological or phenotypic analyses should be conducted to test whether the observed Nakdong River lineage represents a different or cryptic species, or simply hidden, but excessive, intraspecific diversity.
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