Fungal isolates from infected Chinese quince trees were found to cause black rot in Yeongcheon, Gyeongsangbuk Province, Korea. The quince leaves withered and turned reddish-brown and fruits underwent black mummification. To elucidate the cause of these symptoms, the pathogen was isolated from infected leaf and fruit tissues on potato dextrose agar and Levan media. Several fungal colonies forming a fluffy white or dark gray mycelium and two types of fungi forming an aerial white mycelium, growing widely at the edges, were isolated. Microscopic observations, investigation of fungal growth characteristics on various media, and molecular identification using an internal transcribed spacer, β-tubulin, and translation elongation factor 1-α genes were performed. The fungal pathogens were identified as Diplodia parva and Diplodia crataegicola. Pathogenicity tests revealed that the pathogen-inoculated fruits exhibited a layered pattern, turning brown rotting; leaves showed circular brown necrotic lesions. The developed symptoms were similar to those observed in the field. Fungal pathogens were reisolated to fulfill Koch's postulates. Apples were inoculated with fungal pathogens to investigate the host range. Strong pathogenicity was evident in the fruits, with browning and rotting symptoms 3 days after inoculation. To determine pathogen control, a fungicidal sensitivity test was conducted using four registered fungicides. Thiophanate-methyl, propineb, and tebuconazole inhibited the mycelial growth of pathogens. To the best of our knowledge, this is the first report on the isolation and identification of the fungal pathogens D. parva and D. crataegicola from infected fruits and leaves of Chinese quince, causing black rot disease in Korea.
After four years of cold storage, dimethachlon resistance of two laboratory-induced resistant Sclerotinia sclerotiorum isolates SCG7 and LA50 declined by 99.5% and 98.9%, respectively, and cross resistance to iprodione and procymidone also declined dramatically. Along with the decline of fungicide resistance, osmotic sensitivity to sodium chloride and glucose decreased tremendously; mycelial growth rate, sclerotia number and weight per potato dextrose agar (PDA) plate increased on average by 118.6%, 85. 5% and 64.5%, respectively; and virulence to detached leaves of oilseed rape increased by 72.7% on average. Significant negative correlations were detected between dimethachlon resistance levels and mycelial growth rate on PDA (r = -0.980, P = 0.021), and between resistance levels and lesion diameters on detached leaves of oilseed rape plants (r = -0.997, P = 0.002). These results have profound implications for assessing the potential risk for resistance development to dicarboximide fungicides in S. sclerotiorum.
To evaluate the sensitivity of Monilinia fructicola to dicarboximides used in controlling brown rot of peach, the fungus was isolated from commercial peach orchards in Chochiwon (CH), Chongdo (CD), Gyeongsan (GY), and Youngduk (YO) in Korea. The population shift of dicarboximide-resistant isolates of M. fructicola was investigated for 3 years starting 1998. The frequency of procymidone-resistant isolates (PRI) was higher in CD and GY than in CH and YO. The frequency of PRI was higher in the mid season (July-August) than in the rest of the year. Cross-resistance rate of PRI to iprodione was over 87.8% during the investigation, and double-resistance to both procymidone and carbendazim was less than 10%. However, the rate of cross-resistant isolates to vinclozolin was low. In the orchards in GY and CH without any fungicide spray, the PRI population was persistent and did not vary for 3 years. The results suggest that dicarboximide resistance of M. fructicola could be a problem in controlling brown rot and blossom blight on peach trees because it may take a long time to recover the population with sensitive isolates even in the absence of these fungicides.
A total of 24 isolates of Phytophthora infestans were tested and analyzed for their resistance to metalaxyl fungicides. Sensitivity to metalaxyl was determined by growing isolates on 20% V8 medium amended with 0, 5, and 100 ${\mu}g/ml$ metalaxyl. Four isolates among the 24 tested were resistant to metalaxyl. Eleven isolates were intermediate and nine isolates were sensitive. Amplified fragment length polymorphism(AFLP) assay was used to identify the amplification products of resistant isolates. As a result, selected fragments were cloned, sequences and primer pairs were developed which linked to metalaxyl insensitivity in P. infestans using competitive PCR.
Recently, Cryptococcus pseudolongus has been reported as a new pathogen of shiitake (Lentinula edodes). However, its pathological properties are not much known. To further understand its impact on the mushroom, we investigated the pathogen's interactions with the mycelium of shiitake, histopathological properties, host range, and sensitivity to diverse antifungal agents. The strain C. pseudolongus DUCC 4014 inhibited the mycelial growth of L. edodes strain (cultivar Sanjo 701ho) and caused browning in the mycelia confronted with the yeast on PDA. Spray inoculation of the yeast caused an abnormal browning symptom on the cap and/or gills of three shiitake cultivars grown on sawdust media in vinyl bags. Scanning electron microscopic images of the abnormally browned parts of shiitake fruit body illustrated that mushroom tissues were loosed and dispersed in the middle and edge of the cap and the arrangement of basidiospores borne on basidia in the gills was disturbed compared to those of normal shiitake fruit body. Spray inoculation also led to developing abnormal browning on the harvested fruit body, indicating C. pseudolongus could be a problem during mushroom storage. But the yeast was not able to induce abnormal browning on mushrooms of Pleurotus ferulae, Pleurotus fostreatus, and Agaricus bisporus. But it induced browning only on button mushroom (A. bisporus) when they were inoculated after wounding. Tests with 16 kinds of fungicides revealed that the cell growth of C. pseudolongus could be inhibited by benzalkonium chloride at MIC 7 ㎍/ml and benomyl at MIC 3 ㎍/ml.
Brown rot disease, caused by Monilinia spp., poses a significant threat to pome and stone fruit crops globally, resulting in substantial economic losses during pre- and post-harvest stages. Monilinia fructigena, M. laxa, and M. fructicola are identified as the key agents responsible for brown rot disease. In this study, we employed the amplified fragment length polymorphism (AFLP) method to assess the genetic diversity of 86 strains of Monilinia spp. isolated from major stone fruit cultivation regions in South Korea. Specifically, strains were collected from Chungcheong, Gangwon, Gyeonggi, Gyeongsang, and Jeolla provinces (-do). A comparative analysis of strain characteristics, such as isolation locations, host plants, and responses to chemical fungicides, was conducted. AFLP phylogenetic classification using 20 primer pairs revealed the presence of three distinct groups, with strains from Jeolla province consistently forming a separate group at a high frequency. Furthermore, M. fructicola was divided into three groups by the AFLP pattern. Principal coordinate analysis and PERMANOVA were applied to compare strain information, such as origin, host, and fungicide sensitivity, revealing significant partition patterns for AFLP according to geographic origin and host plants. This study represents the utilization of AFLP methodology to investigate the genetic variability among M. fructicola isolates, highlighting the importance of continuous monitoring and management of variations in the brown rot pathogen.
Fusarium head blight is an important disease of small grains. It is mainly caused by members of the Fusarium graminearum species complex (FGSC). Barley and wheat growers spray fungicides, especially demethylation-inhibitor fungicides, to suppress the disease. The objective of this study was to examine the changes in the sensitivity of the FGSC population to the triazole fungicide, propiconazole. A total of 124 and 350 isolates of FGSC were obtained from barley and wheat in Jeolla Province during 2010-2016 and 2020-2021, respectively. The species identity and trichothecene chemotypes of the FGSC isolates were determined based on polymerase chain reaction assays targeting translation elongation factor 1-alpha and TRI12 genes, respectively. Sensitivity to propiconazole was determined based on the effective concentration that reduced 50% of the mycelial growth (EC50) using the agar dilution method. Of all isolates, F. asiaticum with the nivalenol chemotype was the most common (83.9% in 2010-2016 and 96.0% in 2020-2021), followed by F. asiaticum with the 3-acetyl deoxynivalenol chemotype (12.1% in 2010-2016 and 2.9% in 2020-2021). The EC50 values of the isolates collected in 2010-2016 and 2020-2021 ranged from 0.0180 to 11.0166 ㎍/mL and 1.3104 to 17.9587 ㎍/mL, respectively. The mean EC50 value of the isolates increased from 3.8648 ㎍/mL in 2010-2016 to 5.9635 ㎍/mL in 2020-2021. The baseline resistance to propiconazole was determined to be 7 ㎍/mL, based on the EC50 value of isolates collected in 2010-2016, and the ratio of resistant isolates increased from 9.7% in 2010-2016 to 28.6% in 2020-2021.
Apple grower in the Cheongsong region, Korea has reported the increased loss of apple yield due to severe bitter rot incidence. We noticed that this indience is because the Colletotrichum population has developed resistance to commonly used fungicides. We isolated 39 Colletotrichum isolates from 13 orchards in Cheongsong, and all the isolated Colletotrichum species were identified as C. siamense or C. fructicola. These 39 strains were tested for mycelial growth and conidial germination against 12 fungicides. trifloxystrobin (30-55% in recommended concentrations) was shown lower inhibitory effect on mycelial growth. However, the inhibition of conidial germination was shown higher than mycelial growth (62-100%). Kresoxim-methyl was shown lower inhibitory effect on mycelial growth (29-55%). conidial germination inhibitory effect was shown 51% to 96%. dithianon was shown diversity response to inhibition of mycelial growth (43-100%). Tebuconazole was shown high inhibitory effect on mycelial growth (84-100%) and conidial germination inhibitory effect was shown to be 64 to 100%. metconazole has been found to display with high inhibitory effect on mycelial growth (79-100%) and conidial germination (70-80%). fluazinam was shown to possess high inhibitory effect on mycelial growth (87-100%) and conidial germination (94-100%). This study provides basic information for the effective management of apple bitter rot.
Kim, Joo-Hyung;Min, Ji-Young;Bae, Young-Seok;Kim, Heung-Tae
The Plant Pathology Journal
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v.25
no.4
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pp.322-327
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2009
A total of 23 isolates of Botrytis cinerea causing the grey mold were collected from infected ginseng in several fields of Korea. The sensitivity to carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb was determined through a mycelial inhibition test on PDA amended with or without fungicides. B. cinerea isolates were classified as 3 phenotypes, which were the first phenotype resistant to both of carbendazim and the mixture ($Car^RMix^R$), the second one resistant to carbendazim and sensitive to the mixture ($Car^RMix^S$), and the last one sensitive to both of them ($Car^RMix^S$). Carbendazim resistance correlated with a single mutation $\beta$-tubulin gene of B. cinerea amplified with primer pair tubkjhL and tubkjhR causing a change of glutamate to alanine at amino acid position 198. Furthermore, the substitution of valine for glutamate led the resistance to carbendazim and the mixture at the same position of amino acid. PCR-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analysis using the restriction endonuclease, Tsp451 and BstUI allowed differentiation of the PCR fragment of $\beta$-tubulin gene of $Car^SMix^S$ isolates from that of $Car^RMix^R$ and $Car^RMix^S$ isolates. This method will aid in a fast detection of resistance of carbendazim and the mixture of carbendazim plus diethofencarb in B. cinerea in ginseng field.
Hussein, Khalid Abdallah;Lee, Young-Don;Joo, Jin Ho
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.30
no.7
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pp.1018-1026
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2020
Rosemary essential oil was evaluated for antifungal potentiality against six major ginseng pathogens: Sclerotinia sclerotiorum, Sclerotinia nivalis, Cylindrocarpon destructans, Alternaria panax, Botrytis cinerea, and Fusarium oxysporum. The in vitro fungicidal effects of two commonly used fungicides, namely mancozeb and fenhexamid, and the volatile organic compounds (VOCs) of Trichoderma koningiopsis T-403 on the mycelial growth were investigated. The results showed that rosemary essential oil is active against all of the pathogenic strains of ginseng root rot, whereas rosemary oil displayed high ability to inhibit the Sclerotinia spp. growth. The highest sensitivity was S. nivalis, with complete inhibition of growth at 0.1% v/v of rosemary oil, followed by Alternaria panax, which exhibited 100% inhibition at 0.3% v/v of the oil. Minimum inhibitory concentrations (MICs) of rosemary oil ranged from 0.1 % to 0.5 % (v/v). Chemical analysis using GC-MS showed the presence of thirty-two constituents within rosemary oil from R. officinals L. Camphore type is the most frequent sesquiterpene in rosemary oil composition. Mancozeb and fenhexamid showed their highest inhibition effect (45% and 30%, respectively) against A. panax. T. koningiopsis T-403 showed its highest inhibition effect (84%) against C. destructans isolate. This study may expedite the application of antifungal natural substances from rosemary and Trichoderma in the prevention and control of phytopathogenic strains in ginseng root infections.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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