The conjugation processes of a filamentous freshwater green alga Spirogyra varians were examined using FITC-lectins. Conjugation comprised five steps: 1) aligning with adjacent filaments, 2) formation of conjugation protru-sion (papilla), 3) fusion of the protrusions, 4) formation of conjugation tube,and 5) formation of zygotes. Three lectins, ConA, RCA and UEA, showed considerable labeling during the progression of conjuation. FITC-ConA labeled the surfaces of filaments throughout the whole conjugation processes. FITC-RCA labeling was observed at the conjugation protrusions only after the papilla formation. Strong labeling continued until formationg of zygotes at the contacting area where the conjugation tube developed, but no labeling was detected on the surface of vegetative filaments. The labeling decreased gradually over time and disappeared when zygotes were formed. FITC-UEA showed similar labeling pattern with FITC-RCA except that weak labeling remained after zygote formation. Inhibition experiments using RCA, UEA which are complementary to sugars L-fucose and D-galactose, showed considerable decrease of conjugation (<32% vs. 70% in control). These results suggested that the lectin-carbohydrate recognition system might be involved in the conjugation of spirogyra varians.
Kim, Dae-Seon;Im, Dong-Jung;Mun, Seong-Hun;Seo, Hyeon-Hyo;Park, Yong-Il
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.32
no.4
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pp.362-365
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2004
The fucoidan from Laminaria relicollected at Wando in Korea was purified with the yield of 2.3% in mass. The monosaccharide composiof the purified fucoidan was nearly identical to that of the commercial standard: fucose 63.71 %, xylose 22.98%, galactose 6.62%, mannose 0.24%, and uronic acid 3.26%. Microorganisms capable of degrading the purified fucoidan were isolated from the colonies on the minimal medium containing 0.2% of purified fucoidan as a sole carbon source. Of these isolates, a strain showing a relatively higher capability to degrade fucoidan, up to 63%, was partially characterized as a Gram positive, aerobic, moderately halophilic marine bacterium.
Kim, Kui-Jin;Lee, Ok-Hwan;Lee, Han-Chul;Kim, Young-Cheul;Lee, Boo-Yong
Food Science and Biotechnology
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v.16
no.2
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pp.212-217
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2007
Fucoidan (fucan sulfate) is a fucose-containing sulfated polysaccharide from brown algae such as Fucus vesiculosus, Ecklonia kurome, and Cladosiphon okamuranus. The aim of this study was to investigate the effect of fucoidan on the expression of diabetes-related genes in mouse cell line 3T3-L1. 3T3-L1 adipocytes were cultured for 48 hr with or without fucoidan (10, 100, and 500 ppm) on a 60 mm dish. Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used for measurement of peroxisome proliferators activated receptor ${\gamma}\;(PPAR{\gamma})$, CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}\;(C/EBP{\gamma})$, and glucose transporter 4 (GLUT4) RT-PCR analysis revealed that expression level of GLUT4, $PPAR{\gamma}$, and $C/EBP{\alpha}$ mRNAs increased with fucoidan treatment from 10 to 500 ppm in a dose-dependent manner. Fucoidan appears to enhance insulin sensitivity by increasing the expression level of diabetes-related genes in 3T3-L1 adipocytes. Therefore, fucoidan is potentially useful as a natural therapeutic material for hyperglycemia in type II diabetes patients.
From the hot water extract of bracken(Pteridium aquilinum var. latiusculum), a Korean win edible plant, anti-complementary acidic polysaccharides were Isolated. Crude polysaccharide fraction(HPA-1) was obtain ed by methanol reflux, ethanol precipitation, dialysis, and lyophilization. HPA-1 contained 81.80% of total sugar, 30.40% of uronic acid, and 15.60cA of protein. HPA 1 was purified consecutively by cetavlon fractionation and chromatography including ion exchange nth DEAE-Sepharose CL 6B and gel permeation with Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B. HPA-2- IVa and HPA-Va-2 were nearly homogeneous on HPLC and had 500,000 and 560,000 daltons of molecular weights, respectively. HPA-2-Wa consisted of fucose, galacturonic acid, and glucuronic acid at the molar ratio of 1.40 : 0.97 : 1.88. HPA-2-Va 2 was composed of rhamnose, galactose, and galacturonic acid at the molar ratio of 1.00 : 1.38 : 1.39. The polysaccharides were found to activate the C3 component both In the presence and In the absence of Ca2+ through the crossed-immunoelectrophoresis suggesting that those Involved in both classical and alternative complement pathway.
Kim, Dong Chung;Okuda, Hiromichi;Hwang, Woo Ik;Jung, Jin
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.43
no.4
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pp.235-239
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2000
A polysaccharide with antithrombin activity in Manda$^{(R)}& (PAM) was purified via procedures comprising three major steps, i.e. fractional precipitation with ethanol, anion exchange chromatography, and gel permeation chromatography. PAM showed a symmetrical peak on size exclusion HPLC, as assessed by refractive index, and behaved as a single band on cellulose acetate electrophoresis. The average molecular mass was estimated to be 222 kDa by gel filtration. PAM was found to be a sulfated heteropolysaccharide that contains sulfate group (20.5%, w/w) and uronic acid moiety (7.1 %, w/w) in addition to neutral sugar consisting of fucose, xylose, mannose, galactose, and glucose in a molar ratio of 1.00 : 0.35 : 0.28: 0.22 : 0.15. This polysaccharide appeared to inhibit blood coagulation via the intrinsic pathway in a dose-dependent pattern. The clotting of fibrinogen by thrombin was also significantly mitigated by the presence of PAM.
This study was conducted to understand the characteristics of fruit softening during ripening which causes deep loses in quality of horticultural products during storage and marketing process after harvest. The changes of cell wall components during ripening was investigated. The climacteric rise was between 42 and 49 days after anthesis and then decreased. Ethylene evolution was similar to respiration. The hardness of fruit decreased markedly at this climacteric period and significances of textural parameters among the ripening periods were recognized but the significance between 50 and 55 days after anthesis was not. Sugar components of cell wall polysaccharides were uronic acid, galactose, glucose, arabinose, xylose, rhamnose, mannose and fucose. The contents of arabinose and mannose in alcohol-insoluble solids fraction increased, but other sugars were not changed. In cell wall fraction, the contents of uronic acid, galactose, glucose and arabinose were comparatively high, but galactose, arabinose and ironic acid were decreased markedly during ripening. ironic acid occupied above 75% of total monosaccharide in pectin fraction and decreased markedly during ripening. In acid-soluble hemicellulose fraction, the contents of uronic acid, glucose, galactose and rhamnose were high and they decreased from 50 days after anthesis. The contents of glucose and xylose were high in a alkali-soluble hemicellulose fraction and they decreased markedly at 55days after anthesis.
생쥐의 배우자간 인식과 수란관과 난자의 상호작용을 연구하기 위하여 수정 전후의 난자와 배아에 형광으로 표지된 5가지 렉틴(UEA-1. LCA, PNA RCA-1, GSL-1)을 처리하여 투명대, 위낭강 원형질 막에서 렉틴의 결합양상을 관찰하였다. 미수정난자 및 수정란의 투명 대에는 UIA-1을 제외한 4가지 렉틴이 결합하였다. PNA RCA-1, GSL-1은 투명대의 의총보다 내층에 강하게 결합되었고 UEA-1과 LCA는 투명대의 전층에서 미약하지만 고르게 결합하였다 배란된 난자의 위난강은 LCA와 PNA에 의해 결합되었으며 UEA-1은 수정 이후부터 GSL-1은 2-세포기 이후부터 위난강에 결합하였다. 난구세포를 제거하고 체외성숙을 일으킨 난자의 위난강에는 5가지 렉틴 모두 결합하지 않았다. 난자와 배아의 원형질막은 PNA. RCA-1, GSL-1에 의해 결합되었고, LCA 및 UEA기은 수정 이후부터 원형질막에 결합하였다. 이상의 결과에서 glucosamine, N-acetylgalactoamine 관기를 함유한 물질이 난구세포에서 생성되어 위난강에 축적되며 배란 후부터 난자의 위난강내 탄수화물관기는 수란관내액의 영향을 받는 것으로 사료된다. 난자 투명대의 탄수화물관기는 내층에 밀집되어 분포하는데 이는 정자의 투명대 관입 조절과 관련된 것으로 사료된다. 수정 후 난자의 원형질막 표면에 fucose와 mannose 등의 탄수화물 잔기가 새로이 노출되며 초기배아 발생동안 위난강에 존재하는 구조물의 렉틴 결합 특성이 유지되었다.
To find pharmacologically active components of Agrocybe cylin(Iracea, its basidiocarps were extracted with water. The extracts were separated by DEAE cellulose column chromatography, Sepharose CL-4B gel filtration, and Concanavalin A-Sepharose 4B affinity chromatography. Among the obtained fractions from A, cylinclracea, fraction IN which was the neutral proteinbound-polysaccharide fraction exhibited a marked antitumor activity and it was tentatively named "Cylindan". It showed about 70% of tumor inhibition against the solid form of sarcoma 180 when a dose of 30 mg/kg/day was intraperitoneally injected into ICR mice. When each fraction was examined by chemical analysis, Cylindan consisted of 85% polysaccharide, 3% protein and 1% hexosamine. Its polysaccharide moiety contained glucose, mannose, fucose and galactose and its protein moiety contained the comparatively large amounts of aspartic acid and glycine, and other 11 amino acids.
Maysin, a C-glycosylflavone, was isolated from the silks of maize, Zea mays L. The ESI mass spectrum indicates that molecular weight of maysin is $577\textrm{M}^+$m/z, and the ether-linked sugar is rhamnose, $431\textrm{M}^+$m/z (MW$^{+}$-146). The DPPH (1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) radical scavenging activity of maysin was higher than that of rutin. However, as compared with its aglycon luteolin, maysin showed the relatively moderate DPPH scavenging activity mainly due to the glycosylation of two sugars moieties, keto-fucose and rhamnose. In the in vitro cytotoxicity test against the five human tumor cell lines such as lung (A549), ovarian (SK-OV-3), melanoma (SK-MEL-2), central nerve system (XF-489), and colon (HCT-15), maysin exhibited the relatively weaker activities than cisplatin. The $\textrm{ED}_{50}$ values of maysin were 62.24, 43.18, 16.83, 37.22, and 32.09/$m\ell$, respectively. Result suggests that maysin is a potential cytotoxicity compound, particularly for human colon, central nerve system, and melanoma tumors.s.
The adhesion of probiotic bacteria to the intestinal mucosa is one of the desirable properties for their colonization in the intestinal tract, where these bacteria constantly compete with other bacteria. The adhesion of different strains of bifidobacteria to Caco-2 cells was compared. Among the strains examined, BGN-4 showed the highest adhesion level and the greatest cell surface hydrophobicity (CSH). No close relationship was found between the adhesion and CSH of the strains. Upon protease and heat treatment, the adhesion of the BGN-4 to the Caco-2 cells decreased significantly. The cells grown at $42^{\circ}C$ showed a lower CSH and self-aggregation levels than cells grown at $37^{\circ}C$. The treatment of EGTA did not have any effect on the adhesion. The degree of adhesion did not differ among the experimental groups in which galactose, mannose, or fucose were added in the adhesion assay mixture. The results suggest that the adhesion of the Bifidobacterium to the epithelial cells may be affected by the composition and structure of the cell membrane and interacting surfaces.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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