미생물 균체로부터 유용 물질을 추출해 내는 기작(機作)을 조사하기 위하여 Rhodotorula rubra YUFE 1526의 냉동 건조 균체로 부터의 균체 유지 추출을 통하여 고찰하였으며, 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 균체 유지의 최적 추출 용매로는 메탈알코홀이 적합하였으며, extractable total lipid의 량은 균체량의 19.17 % 이었다. 2. 교반 속도의 영향은 없었으며, 최적 추출 온도는 $50^{\circ}C$이었고, 2시간 동안의 추출에서 90 %의 추출률을 보였다. 3. 균체 유지의 확산도는 $50^{\circ}C$에서 $9.4{\times}10^{-9}\;mm^2/min.$로서 최대를 보였으며 추출 온도에 따른 확산도는 다음과 같았다. $D=2.2e^{0002907T}{\times}10^{-9}\;mm^{2}/min\;20^{\circ}C{\leq}T{\leq}50^{\circ}C$ 4. 균체내의 유지 함유량이 변화되어도 확산도 값은 $9.4{\times}10^{-9}\;mm^2/min.$로서 거의 일정하였다. 5. 추출 모델의 설정을 통해 구해진 이론식이 실험치와 거의 일치하고 있었다.
Objectives : This study was conducted to evaluate the effects of Corni Fructus, the dried fruits of Cornus officinalis Sieb., on unilateral common carotid artery occlusion (UCCAO) in mouse model. Methods : The Corni Fructus used in the experiment was extracted with anhydrous methanol, then filtered and freeze-dried. C57BL/6 mice used in the experiments were conducted left UCCAO surgery to set up UCCAO rodent model for mice. The mice were divided into five groups for evaluate the effect of methanol extract of Corni Fructus (COM) on UCCAO induced ischemic brain injury. The expression levels of nitric oxide in cerebrum and serum, body weight change were measured. To determine the effect of UCCAO and COM administration on brain neurons, morphological changes of the cerebrum through a microscope was conducted. And western blot was performed to confirm the underlying mechanism of neuroprotective effect of COM administration. Results : COM administered UCCAO groups (CO50, CO150, and CO500) had no significant effects on nitric oxide production in ipsilateral hemisphere proteins and sera. The CO500, 500 mg/kg COM administration, attenuated UCCAO-induced p38 inflammatory signaling pathway and inflammatory mediators such as iNOS and COX-2. The CO500 group showed resilient morphological changes of hippocampus neuronal cells about brain damage caused by decreased flow of blood. These group also showed decreased inflammation and cellular stress response in neuronal cells. Conclusions : From these results, COM has a neuroprotective property via moderating inflammatory factors and cellular stress inducing factors in brain cells.
Objective : The purpose of this study was to investigate effects of Taklihwajung-Tang on the proliferation of cancer cells land immunocytes focusing around combined effects of anticarcinogen. Materials and Method : We used Taklihwajung-Tang extract(THT) with freeze-dried, 8wks-old male balb/c mice and cancer cell lines(L1210, S-180) for this study. The proliferation of cells was tested using a colorimetric tetrazoliun assay(MIT assay). Results and Conclusion : The results of this study were obtained as follow ; 1. THT was significantly showed cytotoxicity on the L1210 cell lines and S-180 cell lines. 2. THT was significantly increased in the proliferation of thymocytes and splenocytes in vitro. 3. In combined effects of THT and vincristine(0.005mg/kg), THT was significantly inhibited proliferation of S-180 cell lines compared with positive control group. 4. In combined effects of THT and vincristine(0.005mg/kg), THT was significantly decreased in the weight of sarcoma compared with positive control group. 5. In combined effects of THT and vincristine, THT was significantly inhibited the hematological side reaction compared with positive control group. The present author thought that THT had action of anti-cancer and immune-activity, and in combined effects of vincristine, THT had recoverable effects on damage by anticarcinogen.
본 연구는 모시잎의 건조방법에 따른 항산화 및 암세포 증식억제효과를 비교 분석하였다. 80% 에탄올로 추출한 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 총 폴리페놀 함량은 건조방법에 따른 유의적 차이를 보이지 않았다. 반면 총 플라보노이드 함량은 열풍건조 모시잎이 동결건조 모시잎에 비하여 유의하게 높게 나타났다. 1,000 ppm에서 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 DPPH 라디칼 소거능은 각각 77.74%와 77.29%의 비슷한 라디칼 소거능을 보였으며, Rancimat으로 측정한 열풍건조 및 동결건조 모시잎의 항산화지수는 각각 1.38과 1.32로 BHT, BHA 및 비타민 C에 비해서는 낮았으나 시료를 미첨가한 음성대조군보다는 높은 항산화력을 보였다. 위암(AGS), 간암(Hep G2) 및 폐암(A549) 세포에 대한 모시잎 에탄올 추출물의 암세포 증식 억제효과를 알아본 결과, 열풍건조 및 동결건조 모시잎 에탄올 추출물의 농도가 증가할수록 암세포의 증식 억제 활성은 농도 의존적으로 증가되었다. 건조방법에 따른 항암활성은 비슷한 경향이었으며 가장 높은 농도인 $800{\mu}g/mL$에서 80% 이상의 간암 및 폐암세포의 증식 억제 활성을 보였고, 위암세포에서는 75%이상의 증식 억제 활성을 보였다. 이상의 결과 열풍건조 및 동결건조 모시잎 에탄올 추출물은 in vitro에서 항산화효과와 암세포의 증식 억제효과를 보였고, 건조방법에 따른 모시잎 에탄올 추출물의 항산화 활성 및 암세포 증식 억제 활성은 비슷한 경향으로 나타났다.
본 연구는 식물성장촉진 근권세균인 Bacillus sp. SH1RP8를 친환경 생물비료로 이용하기 위하여 수행되었다. SH1RP8 균주를 동결건조시 세포의 용혈을 방지하도록 여러 가지 동결건조 보호제를 첨가하여 균주의 성장과 활성에 미치는 영향을 알아보았다. SH1RP8 균주의 동결건조 시 동결건조 보호제로 skim milk, glucose, peptone 등을 이용하였을 때, 그 중 5%의 skim milk를 첨가하였을 때 가장 높은 (30.6%)의 생존율을 보였다. 또한, 균주의 성장을 촉진하는 기질 그룹을 첨가하여 5%의 skim milk 단독으로 첨가한 경우와 기질 그룹을 각각 첨가한 경우의 동결건조 보호 효과를 비교하여 보았다. 그 결과 5% skim milk에 glycerol을 동시에 첨가할 경우 균주의 생존율이 skim milk 단독 첨가효과와 비교 시 214.29%의 향상율을 보여주었다. 또한 동결건조된 Bacillus sp. SH1RP8 은 매우 효과적인 PGPR로 활성을 보여주어 생물비료로서의 훌륭한 기능이 기대된다.
Objectives : Sam-Myo-Whan(SMW) has been known traditional prescription with anti- anthritis activities. We investigated inhibitory effects of SMW on lipopolysaccharide (LPS)-induced nitric oxide(NO), $TNF-{\alpha}$ and inducible nitric oxide synthase(iNOS) production from RAW264.7 cells and BV-2 Microglia cells. Methods : SMW, which had been extracted with 70% MeOH, concentrated and freeze-dried was used for this experiment. After BV2 mouse brain macrophages and RAW264.7 mouse peritoneal macrophages were pretreated with increasing concentrations of SMW extract for 30min, and then activated with LPS. To investigate cytotoxicity of SMW extract, cell viability was measured by MTT assay. NO production was measured in each culture supernatant by Griess reaction. mRNA expression of iNOS in two type cells was investigated by RT-PCR. $TNF-{\alpha}$ production was measured in each culture supernatant by ELISA. Results : SMW extract significantly inhibited LPS-induced NO and $TNF-{\alpha}$ production in BV2 cells and RAW264.7 cells dose-dependently. SMW extract also greatly suppressed mRNA expression of iNOS in both type cells activated with LPS. Conclusion : These data suggests that SMW extract may have an anti-inflammatory effect through the inhibition of iNOS expression.
The cytotoxicity of the ethanol extracts of varietal samples of mulberry leaves and branches and silkworm feces was measured using CT-26 cells originated from murine metastatic colon cancer, using dye uptake assay in order to find potential anticancer agents. Two ethanol extracts (varietal mulberry leaves and mulberry branches) were prepared from 16 varietal mulberries and used as partial extract materials for the activity assay. Among these, the ethanol extracts from Shinkwangppong leaves showed a little anticancer activity, and those from Sugaeppong, Cheongunppong and Gumsulppong branches showed some anticancer activity as well as cytotoxicity. In contrast, ethanol extracts from freeze-dried, the 3rd day of 5th instar feces showed more potent anticancer activity than that of other mulberry leaves, mulberry branches and other 5th silkworm instar larva feces on the basis of high UV absorbance at 665 nm.
For the development of probiotics in aquaculture of marine organisms, three strains having psychrophilic and salt tolerant characteristics were isolated from Kimchi. Amng the isolated strains. MG19, MG89 and MG208 were identified as Lactobacillus brevis, Enterococcus faecium and Lactobacillus plantarum, respectively. The neutralized culture broth of isolated strains were tested in order to evaluate the antibactrial activity, 조초 showed high antibacterial activity against Edwardsiella tarda, Vibrio cholerae andPseudomonas fluorescens. In mixed culture of pathogens and isolated strain,pathogens were signifi-cantly inhibited after 2 days of cultivation but the isolated strains showed normal growth. When the Edwardsiella tarda was cultured with three isolated strains, its growth was completely inhibited after 254 hours of cultivation. The effect of isolated three strains as probiotics was investigated based on the changes in body weight of aquacultured flounder. After 50 days feeding trial, it was found that the mean body weight gain of the tested group fed freeze-dried isolated cells was significantly greater than that of the control group. These results suggest that these isolated strains can play an important role as probiotics in aquaculture.
The present study was designed to evaluate the inhibitory effects of fermented Liriope platyphylla extract on the production of inflammation-related mediators (NO, ROS, NF-${\kappa}B$, iNOS and COX-2) and pro-inflammatory cytokines (TNF-${\alpha}$, IL-$1{\beta}$, IL-6) in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 macrophages. Freeze-dried Liriope platyphylla was fermented by Saccharomyces cerevisiae and extracted with 70% ethanol. In lipopolysaccharide-stimulated macrophage cells, the treatment with fermented Liriope platyphylla extract decreased the generation of intracellular reactive oxygen species dose-dependently and increased antioxidant enzyme activities, including superoxide dismutase, catalase and glutathione peroxidase. Fermented Liriope platyphylla extract also inhibited NO production in lipopolysaccharide-stimulated RAW 264.7 cell. The expressions of NF-${\kappa}B$, iNOS, COX-2 and pro-inflammatory cytokines were inhibited by the treatment with fermented Liriope platyphylla extract. Thus, this study shows the fermented Liriope platyphylla extract could be effective at inhibiting the inflammation process.
This study was designed to investigate the protective effect of a methanol extract of Chungkookjang (CKJ) on high glucose induced oxidative stress in LLC-$PK_1$ cells (renal tubular epithelial cells), which are susceptible to oxidative stress. Freeze dried CKJ powder was extracted with methanol, and the extract solution was concentrated, and then used in this study. To determine the protective effect of CKJ extract, oxidative stress was induced by exposing of LLC-$PK_1$ cells to high glucose (30 mM) or normal glucose (5 mM) for 24 hr. Exposure of LLC-$PK_1$ cells to high glucose for 24 hr resulted in a significant (p<0.05) decrease in cell viability, catalase, SOD and GSH-px activity and a significant (p<0.05) increase in intracellular ROS level and thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) formation in comparison to the cells treated with 5 mM glucose. CKJ extract treatment decreased intracellular ROS level and TBARS formation, and increased cell viability and activities of antioxidant enzymes including catalase, SOD and GSH-px in high glucose pretreated LLC-$PK_1$ cells. These results suggest that CKJ extract may be able to protect LLC-$PK_1$ cells from high glucose-induced oxidative stress, partially through the antioxidative defense systems.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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