• 한국어병학회지
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• 제22권3호
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• pp.327-334
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• 2009

본 연구는 넙치, Paralichthys olivaceus에서 Edwardsiella tarda와 Streptococcus iniae에 대한 혼합백신의 효능과 안전성에 대해 조사하고자 하였다. 혼합백신을 주사한 넙치에서 2, 4, 6, 8주 째에 채혈하여 E. tarda와 S. iniae에 대한 항체가 를 microtitre 법으로 조사하였다. 백신 주사 후 3주째에 E. tarda와 S. iniae를 각각 인위감염 시켰을 때 백신구에서 81.0-92.8%의 높은 상대생존율을 보여 혼합백신에 의한 항병력의 증가가 확인되었다. 백신 주사 후 초기에 백신구가 대조구에 비해 체중 증가가 느렸으나 사육기간이 길어지면서 회복되어 대조구와 백신구 체중의 차이를 보이지 않았다. 이 결과는 백신 주사가 넙치의 성장에 영향을 주지 않고 에드와드병과 연쇄구균증을 예방할 수 있음을 보여준다.

• 수산해양교육연구
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• 제27권3호
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• pp.672-681
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• 2015

본 연구는 뱀장어 양식에서 오랜 기간 문제시되고 있는 에드와드병(Edwardsiellosis)에 대한 효과적인 백신 투여 방법의 가능성을 알아보고자하였다. 뱀장어 유래의 Edwardsiella tarda로부터 포르말린 불활화백신(FKC)을 제작하여, 크기가 다른 3개 그룹의 뱀장어($26.8{\pm}1.2g$, $7.1{\pm}0.7g$, $2.2{\pm}0.4g$)에 침지 및 경구 투여를 실시하였다. 그리고 혈청 응집항체가의 활성과 E. tarda 공격접종에 대한 방어력(상대생존율, RSP)의 변화를 조사하였다. 모든 그룹에서 응집항체가와 공격접종에 의한 방어력은 상관성이 없었다. 그러나 $26.8g{\pm}1.2g$그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)와 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 각각 62.6% 및 52.2%를 나타내었으며, $7.1{\pm}0.7g$ 그룹의 경우, 침지(10 mg/mL)+경구(10 mg/g) 실험구에서 RSP는 56.8%로 나타나서 방어력(RPS>50%)이 확인되었다.

• 한국어병학회지
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• 제16권3호
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• pp.175-181
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• 2003

양식 잉어류에서 심각한 피해를 야기하고 있는 VSNCV에 대한 백신을 제작하여 잉어에 투여한 후 특이적 및 비특이적 면역반응을 조사하였다. 백신은 포르마린처리백신 (FKV)과 가온처리백신 (HKV)를 제작하여 건강한 잉어에 0.2㎖씩 복강주사 하였으며, 2주 후 동일한 방법으로 boost 처리하였다. 백신 투여 후 비특이적 면역반응 중 혈청 라이소자임 활성과 대식세포의 chemiluminescent (CL) reponses은 1차 주사 후 및 boost 처리 후 2일째부터 7일째까지 유의적인 증가를 나타내었으며, 이후 대조구 수준으로 감소하였다. ELISA법으로 항체가를 조사한 결과 대조구를 제외한 FKV와 HKV 투여구에서 주사 후 2주 째부터 boost 처리 후 6주 째까지 유의적으로 증가하였으며, 그 중에서도 boost 처리 후 2주 째 최고치를 나타내었다. 각 시험구별로 boost 처리 후 2주 째에 VSNCV로 공격 실험한 결과 FKV 투여구에서는 20%의 누적폐사율을 나타내어 방어력이 인정되었으나, HKV 투여구에서는 70%의 누적폐사율이 나타나 방어효과가 거의 없는 것으로 나타났다.

• 한국수산과학회지
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• 제45권4호
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• pp.367-371
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• 2012

To investigate the relationship between metabolic changes in $^1H$-nuclear magnetic resonance (NMR) spectra and fish vaccination, serum was collected from olive flounders treated with a formalin-killed Edwardsiella tarda vaccine and used for $^1H$-NMR metabolite profiling. Principal component analysis and partial least squares were applied to the $^1H$-NMR profile to reduce its complexity and establish class-related clusters. Relative lipid regions were distinguished in vaccinated and non-vaccinated serum. Then, the lipids were extracted from the serum and analyzed. Triolein was identified.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제34권3호
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• pp.273-277
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• 2006

본 연구에서는 병원성 Pasteurella multocida D:4 외막 단백질 H의 방어적 면역성과 백신으로서의 가능성을 검정하고자, 외막 단백질 H 유전자를 대장균에서 발현, Trx와 융합된 형태의 재조합 외막 단백질 H를 분리하여 면역화와 백신 실험에 항원으로 사용하였다. 면역 실험에서 재조합 외막 단백질 H는 높은 역가의 항체를 유도하였으며, 불활화한 사균 백신과 유사한 수준의 백신 효과를 나타내었다.

• 수산해양교육연구
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• 제27권5호
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• pp.1491-1498
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• 2015

In this study we investigated the effect of vaccine efficacy and immune activities by feeding additives several natural herbal remedies extracts of Sweet Wormwood (Artemisia annua), Galla Rhois, Oriental raisin tree (Havenia Dulicis) and 6-mixed herb to Oilve flounder, Paralichthys olivaceus. Each group of fish fed with the herbal remedies added feed and basic formula during the seven weeks and vaccinated with Edwardsiella tarda Formalin killed vaccine after 4 weeks feeding. Relative Percentage Survival values (RPS) in the group was assessed by the challenge with E.tarda. All groups with the herbal remedies added feed enhanced growth rate, but there were not significantly different in lysozyme activity and agglutination titer. In a challenge experiment with E.tarda, RPS in the all groups feeding additives natural herbal remedies was higher than that of the control group. These results suggest that the natural herbal remedies extracts of Sweet Wormwood (Artemisia annua), Galla Rhois, Oriental raisin tree (Havenia Dulicis) and 6-mixed herb would be effective to enhance efficacy of vaccination to Olive flounder.

• 수산해양교육연구
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• 제26권6호
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• pp.1366-1372
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• 2014

본 연구의 목적은 해산어류와 갑각류에 심각한 위해를 끼치고 있는 V. harveyi에 대한 백신개발을 위하여 V. harveyi 백신생산에 적합한 배양배지를 탐색하고 적정 투여량을 조사하며 또한 S. parauberis 백신과 혼합백신의 형태로 투여시 백신효능에 대해 조사하는 것이다. 이를 위하여 2-2'-dipyridyl이 첨가되거나 첨가되지 않은 TSB와 BHIB에 배양 후 FKC 백신을 제작한 후 넙치에 투여하여 응집항체가의 생산변화와 공격실험에서의 상대생존율을 비교분석하였다. 또한 V. harveyi 백신의 적정 투여량을 정하기 위하여 어체중 kg 당 10mg 또는 20mg을 투여하여 면역반응을 비교하였으며 S. parauberis 백신을 혼합한 백신을 투여한 후 면역반응을 비교하였다. 그 결과 2-2'-dipyridyl이 들어간 TSB와 BHIB에 배양된 V. harveyi 백신은 응집항체형성과 방어력에서 차이를 보이지 않았다. 또한 백신 투여량에 따른 응집항체가에 있어서 큰 차이는 없었으나 어체중 kg 당 10mg을 투여한 실험구가 조금 높은 방어력을 나타내었다. S. parauberis 백신과 혼합한 dual 백신을 투여시 V. harveyi 백신만을 단독으로 투여했을 때와 비교해 방어력이 현저히 증가하였으며 특히 어체중 kg당 두가지 백신을 각각 10mg씩 혼합하여 투여한 실험구에서는 28일동안 폐사가 전혀 일어나지 않아 백신효능이 매우 뛰어난 것으로 나타났다. 결론적으로 넙치를 위한 V. harveyi 백신을 개발할 때는 2-2'-dipyridyl가 첨가된 TSB에 배양 후 제작된 V. harveyi 백신을 어체중 kg당 10mg의 투여량으로서 S. parauberis 백신과 혼합투여하는 것이 효능과 경제적인 면에서 바람직하다고 생각된다.

• 미생물학회지
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• 제43권1호
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• pp.7-13
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• 2007

Pasteurella multocida는 돼지에서 위축성 비염, 폐렴을 비롯한 다양한 호흡기 질환을 일으키는 병원균이다. 본 연구에서는 돼지 위축성 비염에 대한 효과적인 순수정제 백신을 개발하고자 하는 기초 연구로서 P. multocida의 외막 단백질 H에 의해 유도되는 방어적 항체와 면역을 확인하였다. P. multocida의 외막 단백질을 포함하는 분획은 호흡기 질병 혼합 백신에 대한 항혈청과 불활화된 사균 세포에 대한 항혈청 모두에서 면역학적으로 검출 가능하였다. 선행 연구에서 분리한 외막 단백질 H 유전자는 재조합 발현 백터 제작에 이용되어 대장균으로부터 재조합 외막단백질 H를 정제하였다. 실험 동물 면역과 항혈청의 교차반응, ELISA를 통한 항체 역가의 측정 및 공격접종을 통하여, 재조합 외막 단백질 H는 높은항원성을 가지며, 지속적인 체액성 면역을 유도하는 것을 확인하였다. 외막 단백질 H는 순수정제 항원으로서 P. multocida에 의한 호흡기 질환에 대한 효과적인 방어를 유도할 수 있는 단위 백신 후보 단백질로 여겨진다.

• 한국어병학회지
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• 제19권1호
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• pp.45-54
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• 2006

E. tarda의 독성 비교를 위하여 일반 TSB, iron-chelate인 2,2‘-dipyridyl 첨가 TSB 및 Fe 첨가 TSB의 세 가지 조건에서 E. tarda를 배양하였다. 독성시험의 결과는 iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda에서 가장 낮은 독성을 나타내었다. 그리고 각각의 OMPs와 IROMPs을 분리하여 SDS-PAGE로 항원성을 비교한 결과, iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda IROMPs에서 68, 73 kDa 크기의 분자들이 더 많이 발현된다는 것을 확인할 수 있었다. 두 가지 vaccine 투여구 중에서 2,2‘-dipyridyl 첨가 배지로 배양한 균체로 제작한 DP-FKC 항원 투여구가 응집 항체가가 더 높게 나타났다. 면역반응의 변화를 알기 위한 응집 항체가 조사에서는 FKC 항원과 DP-FKC 항원 투여구에서 모두 대조구보다 높은 값을 나타내었고, 3주 째에 최고치를 나타내었다. ELISPOT을 이용한 항체 생성 세포 수의 검출에서도 응집 항체가와 유사한 pattern을 나타내었는데, 두 가지 vaccine 투여구에서 2주 째에 가장 많은 항체 생성 세포 수를 나타내었다. 공격실험에서는 3주 째에 FKC 항원 투여구가 50%, DP-FKC 항원 투여구에서는 80%의 생존율을 나타내었다. 전체적으로 DP-FKC 항원 투여구의 생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과로부터 넙치에 대한 E. tarda의 vaccine으로는 현재 연구되고 있는 FKC vaccine보다 철 결핍 조건에서 배양된 균체의 항원인 DP-FKC vaccine이 동일한 조건으로 사용하였을 때 더 나은 방어력을 가진다는 것을 알 수 있었다.

• 한국어병학회지
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• 제19권2호
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• pp.173-181
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• 2006

Miamiensis avidus는 넙치에 폐사를 일으키는 스쿠티카 섬모충이다. M. avidus에 대한 넙치의 면역반응을 측정하기 위하여 FKC (formalin killed cell)를 마리당 2.6 × 106 cells을 복강주사하고, FKC를 초음파처리한 것을 2.4 × 106 cells/㎖로 14.9 cm (26.8 g)의 넙치에 2주 간격으로 두 번 면역하였다. 면역한 넙치의 항체는 충체의 운동성둔화 (immobilization)와 응집 (agglutination)을 유발하였다. 면역한 그룹은 면역하지 않은 그룹보다 높은 ELISA항체가를 나타내었다. 또한, 복강주사로 면역한 넙치에서 유의적으로 높은 phagocytic ratio, phagocytic index와 주화활성을 나타내었다. FKC의 면역방어효과를 검증하기 위하여 8.6 cm (6.3 g)의 넙치에 마리당 1.43 × 105 cells을 복강주사면역하고 2.2 ×105 cells/㎖의 농도로 침지면역했다. 2주 간격으로 두 번 면역하고 2.0 × 104과 2.0 × 103 cells/㎖ 농도로 침지 공격 감염시킨 후 폐사율을 관찰하였다. 감염시킨 3주 후 폐사율은 복강주사구에서 감소하였고 침지면역구는 폐사가 지연되었다. 위의 결과로부터 M. avidus의 불활화백신을 넙치에 면역하면 충에 대한 특이면역이 증강되며 증강된 면역반응이 방어력을 제공했을 것으로 생각되었다.