The genetic diversity of plant growth-promoting rhizobacterial (PGPR) fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane (Saccharum officinarum L.) rhizosphere was analyzed. Selected isolates were screened for plant growthpromoting properties including production of indole acetic acid, phosphate solubilization, denitrification ability, and production of antifungal metabolites. Furthermore, 16S rDNA sequence analysis was performed to identify and differentiate these isolates. Based on 16S rDNA sequence similarity, the isolates were designated as Pseudomonas plecoglossicida, P. fluorescens, P. libaniensis, and P. aeruginosa. Differentiation of isolates belonging to the same group was achieved through different genomic DNA fingerprinting techniques, including randomly amplified polymorphic DNA (RAPD), amplified ribosomal DNA restriction analysis (ARDRA), repetitive extragenic palindromic (REP), enterobacterial repetitive intergenic consensus (ERIC), and bacterial repetitive BOX elements (BOX) analyses. The genetic diversity observed among the isolates and rep-PCR-generated fingerprinting patterns revealed that PGPR fluorescent pseudomonads are associated with the rhizosphere of sugarcane and that P. plecoglossicida is a dominant species. The knowledge obtained herein regarding the genetic and functional diversity of fluorescent pseudomonads associated with the sugarcane rhizosphere is useful for understanding their ecological role and potential utilization in sustainable agriculture.
Antagonistic fluorescent pseudomonads isolated from rhizospheric soil of rice were characterized by 16S rRNA amplicon and fatty acid methyl ester (FAME) analyses. Antagonistic isolates were grown in the fermentation media, and production of antibiotics was confirmed by thin-layer chromatography (TLC) and high-performance liquid chromatography (HPLC). Production of fungal cell-wall-degrading enzymes such as protease, cellulase, pectinase, and chitinase was determined. Dendrogram based on the major and differentiating fatty acids resulted into 5 clusters, viz., cluster I (P. pseudoalcaligenes group), cluster II (P. plecoglossicida group), cluster III (P. fluorescens group), cluster IV (P. aeruginosa group), and cluster V (P. putida group). Characteristic presence of high relative proportions of cyclopropane (17:0 CYCLO w7c) was observed in antagonistic bacteria. Data revealed biodiversity among antagonistic fluorescent pseudomonads associated with the rice rhizosphere. Results presented in this study will help to identify the antagonistic isolates and to determine their mechanisms that mediate antagonism against fungal pathogens of rice.
Rhizobacteria are used as inoculants to enhance crop yield and for biological control of fungal pathogens. Fluorescent pseudomonads isolated from the rhizosphere of groundnut showed suppression of the phytopathogen Macrophomina phaseolina that causes charcoal rot of groundnut, an economically important agroproduct. Two strains of fluorescent pseudomonads, designated as PS1 and PS2, were selected as a result of in vitro antifungal activity. After 5 days of incubation at $28{\pm}1^{\circ}C$, both PS1 and PS2 caused clear inhibition zones in dual cultures, restricting the growth of M. phaseolina by 71 % and 74%, respectively. Both the strains were capable of producing siderophores, indole acetic acid, and hydrocyanic acid, and causing phosphate solubilization under normal growth conditions. These strains, when used as inoculants in groundnut, enhanced germination up to 15% and 30% with subsequent increase in grain yield by 66% and 77%, respectively. Conversely, when the pathogen alone was tested 57% decrease in yield was recorded. Thus the studies revealed the potential of the two pseudomonads not only as biocontrol agents against M. phaseolina, but also as a good growth promoter for groundnut.
Number of bacterial isolates were collected from high mountainous areas at various locations in the whole country to select promising biocontrol agents. Most of selected isolates belonged to fluorescent pseudomonads. Population densities of fluorescent pseudomonads were examined by DLF method. Alll selected isolates rapidly multiplied on spermosphere after seed inoculation upto 24, and then the population abruptly declined. When seeds were germinated fully, bacteria moved to newly emerging radicle. The good root colonizing isolates, B16 and V13 proliferated on the growing root and moved down to the root tip and lateral roots. but the poor root colonizing isolates, MC07 and X01 moved much slower. Scanning electron microscopic observations showed that the cells of the good colonizing isolates were arranged linearly on the growing root and parallel to growing root axis and continuously existed on the root tip, Whereas the cells of poorly colonizing isolates were gathered and scattered randomly on the root surface.
Park, Yeal;Kim, Hyun Hee;Myeong-gu Yeo;Young-woo Seo;Han-cheol Koh;Young-gi Yang;Hyeon-Sook Cheong;Sung-jun Kim
Korean Journal of Microbiology
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v.30
no.4
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pp.286-290
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1992
The present study was performed to isolate the fluorescent pseudomonads from Kwang-Ju soil and to construct a mutant strain defective in siderophore biosynthesis. The siderophore-secreting pseudomonads were screened on Blue agar (Chrome Azuol S agar) plates and one strain of them was designated to Pseudominas fluorescens (P. fluorescens) PY002. To construct a mutant defective in siderophore biosynthesis, P. fluorescens PY002 was randomly mutagenized with a transposon Tn5. The location of Tn5 integrated into chromosomal of the mutants strain was determined by Southern blot analysis. The mutagenized strain showed non-fluorescent on a King's B agar plate and were defective in iron (III) acquisition ability.
Pyoverdines (PVDs) are organic compounds produced by the fluorescent Pseudomonads under iron starvation conditions. Among the isolated rhizosphere pseudomonads strains, P. putida KNUK9 showed the highest production of PVDs and its production reached to 62.81% siderophores units. DNA isolation, ligation, PCR amplification, and transformation using E. coli $DH5{\alpha}$ cells were carried out for preparing the strong pyoverdine producer strains. We detected seven genes playing the fundamental roles in the pyoverdine metabolism in Pseudomonads. According to data and analysis obtained from the study, we deduced that the strain P. putida KNUK9 contains the essential genes required for pyoverdine biosynthesis.
Among 24 isolates of fluorescent Pseudomonads, 5 isolates named as LPT1, LPT2, LPT3, LPT4 and LPT5 were screened in vitro for their nematicidal activity against cyst forming nematode, Heterodera cajani causing patchiness, poor and stunting growth besides discoloration in Sesamum indicum. Second stage juveniles of H. cajani hatched from egg masses were collected from roots of host plant and subjected to fresh and heat-treated culture filtrate of isolates for 24 h. Mortality of H. cajani was recorded on the basis of parameters used for test organism bioassay. Among these isolates, Pseudomonas aeruginosa LPT5 caused maximum mortality towards second stage juvenile of H. cajani in vitro. Five isolates were used as seed coating for the management of cyst forming nematode H. cajani on sesame in green house condition. The strains LPT5 was better than the other strains in reducing the population of H. cajani both in vitro and in vivo. The reduction in cyst and juveniles population was found to be 49 and 60%, respectively when seeds were coated with strain LPT5. Among other strains, LPT4 was also found to inhibit the cyst and juveniles population 12 and 36% respectively. Increases in early vegetative plant growth parameters recorded in both in vitro and in vivo further revealed the significance of indigenous bacteria in comparison to introduced strain.
In this study, 200 isolates of fluorescent pseudomonads were isolated from different fields of East and West Azarbaijan and Ardebil provinces of Iran. These bacterial isolates were screened on the basis of a dual culture assay, the presence of known antibiotic genes, and their ability to successfully colonize roots and to promote plant growth. Twelve isolates exhibited 30% or more inhibition of mycelia growth of $P.$$drechsleri$. Genes encoding production of the antibiotics 2,4-diacetylphloroglucinol, phenazine-1-carboxylic acid, and pyoluteorin were detected in some strains but none of the strains possessed the coding gene for production of antibiotic pyrrolnitrin. In an $in$$vitro$ test for root colonization, the population density on roots of plants treated with most of the above strains was more than 6 $\log_{10}$ CFU $g^{-1}$ roots, with a maximum of 7.99 $\log_{10}$ CFU $g^{-1}$ roots for strain 58A. Most of the strains promoted significant plant growth in comparison to non-treated controls. In green house studies, the percentage of healthy plants in pots treated with strains 58A and 8B was 90.8% and 88.7%, respectively. The difference between these treatments and treatment with the fungicide metalaxyl was not significant.
While screening for nematicidal activity of bacterial origins, various pseudomonads strains were inhabited in tomato rhizosphere. One isolate designated as $PE_{10}$ was selected for studies on nematicidal properties and plant growth-promoting (PGP) activity and was identified as Pseudomonas aeruginosa based on morphological features, biochemical and physiological tests, and carbohydrate utilization. To investigate nematicidal activity, Meloidogyne incognita juvenile mortality was determined using $PE_{10}$ culture filtrate. Inhibition of strain $PE_{10}$ against Fusarium oxysporum was observed using dual culture technique. Strain $PE_{10}$ showed good siderophore activity, HCN and IAA production abilities, and growth and development enhancement of tomato.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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