The first priority we face in the conservation of wall paintings, is the conservation of painting layer. The 'painting layer' is sometimes called the pigment layer, and refers to the painted surface. For the consolidation of this painting layer we use 'fixative'. Fixative is a common adhesive which has been used in various field and conservators have made up for the weak points in the consolidation of wall paintings. In my thesis, I will summarise the range of use, standards of selection, and results of research on the use of fixative in the conservation of European paintings. In addition, I will describe various kinds of our traditional fixatives. As synthetic resins have proved that it is not ideal as a fixative for wall painting, conservators have studied to find an alternative. Same as European conservators, Asian scientists has researched to find alternative fixative which is more suitable to the wall paintings in Asia based on their traditional techniques and materials. Therefore, 1 have studied to find an adequate fixative for our own wall paintings and I could conclude that we can consider traditional fixative which is made of 'seaweeds' as an alternative and it is very important to proceed research and experiment on this material.
Park, Chang-Hyun;Kim, Hyun-Wook;Rhyu, Im Joo;Uhm, Chang-Sub
Applied Microscopy
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v.46
no.4
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pp.188-192
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2016
Proper sample preparation prior to microscopy is necessary for maintaining the components of tissues in a state as close to a living state as possible. For optimal preservation of biological samples, the sampling conditions are as important as the fixation itself. Various factors influence the selection and fixation efficiencies of a fixative, including sample size, osmolarity, pH, penetration rate and depth, fixative temperature, fixation time, fixative concentration, fixative amount, and retention time. Therefore, several factors for selecting and administering fixation procedures are evaluated pertaining to optimal sample preparation for transmission electron microscopy.
The present study was aimed to evaluate the influence of glutaraldehyde (GA) concentration on multiple electron microscopic (EM) immunostaining using pre-embedding peroxidase and post-embedding immunogold method. Influence of various concentrations of GA included in the fixative on immuoreactivity was assessed in the multiple immunostaining using antisera against anti-transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) for peroxidase staining and anti-GABA for immunogold labeling in the rat trigeminal caudal nucleus. Anti-TRPV1 antiserum had specificity in pre-embedding peroxidase staining when tissues were fixed with fixative containing paraformaldehyde (PFA) alone. Immunoreactivity for TRPV1 was specific in tissues fixed with fixative containing 0.5% GA at both perfusion and postfixation steps, though the immunoreactivity was weaker than in tissues fixed with fixative containing PFA alone. Tissues fixed with fixative containing 0.5% GA at the perfusion and postfixation steps showed specific immunogold staining for GABA. The results of the present study indicate that GA concentration is critical for immunoreactivity to antigens such as TRPV1 and GABA. This study also suggests that the appropriate GA concentration is 0.5% for multiple immunostaining with peroxidase labeling for TRPV1 and immunogold labeling for GABA.
Min-A Je;Haneul Lee;Heechul Park;Dong Hyeok Kim;Yeongdon Ju;Jaewon Lim;Sunghyun Kim;Jungho Kim
Biomedical Science Letters
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v.29
no.1
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pp.48-52
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2023
Formaldehyde use is associated with serious health risks, which can affect medical personnel and technicians. Therefore, we investigated the efficacy of an alternative fixative, with respect to two types of formalin fixatives, by hematoxylin and eosin (H&E) staining, periodic acid Schiff (PAS) staining, immunohistochemical (IHC) staining, and RNA extraction. For H&E staining, the circular nucleus was stained dark blue by the basic dye hematoxylin and the cytoplasm was stained red by the acid dye eosin in all three fixative samples. No difference was found in the Duksan General Science (DGS), Sigma-Aldrich, and Core-Fix fixative samples (Corebiotech) used to fix kidney tissue, after PAS staining. IHC staining showed that CD4 was significantly increased in the lippolysaccharide (LPS)-treated group compared to the control group (vehicle), confirming the changes in specific molecules. The quantity and quality of RNA from tissues fixed in the three types of fixatives were evaluated. The average concentration of RNA was 106 ng/µL and average purity at A 260/280 ratio was 1.7~2.0, regardless of fixative used. For quality of protein, glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) protein was confirmed by Western blotting. In conclusion, Core-Fix can be used as a fixative for pathological tissues, in histological and molecular diagnoses.
Using mouse tissue, we studied electron opacity effect of tannic acid for transmission electron microscopic staining. Tannic acid-glutaraldehyde in 0.1M phosphate buffer was used as a fixative. To compare with this we have tested another method consisting of heavy metal staining after treatment of tannic acid in sodium tetraborate (borax) on glutaraldehyde-fixed sections. We have achieved equally consistent electron opacity in both methods. The elastin, collagen, basal lamina of skin and gap junctions of the epithelial cells gave excellent results, while it was good for glycogen, cilia, and plasma. Also fat cells and lipid droplets gave good preservation when tannic acid was added in the fixative. However, prolonged fixation in tannic acid-added fixative was hazardous for further processing, i.e., sectioning problem and deep electron opacity background.
The most important part of conservation treatment of murals is to preserve them against the risk of a damage by injecting fixative into them when the painting loses its cohesion or powderization of pigments occurred due to occurrence of cracks inside the painting layer. However, studies on the stability of fixative used for painting layers of murals are still insufficient. This study manufactured a mural as a specimen and colored it with four kinds of pigments including oyster shell white, cinnabar, malachite and red clay and applied four kinds of fixative, including, Paraloid $B-72^{(R)}$, Caparol-$binder^{(R)}$, glue and Hydoxypropyl $cellulose^{(R)}$. artificially generated environmental changes in temperature, humidity and ultraviolet rays which may occur after the completion of conservation treatment. Then the changes in physical properties were observed in multifaceted ways such as color stability, contact angle, brilliance, adhesive strength and surface. As a result, this study found that ultraviolet rays and hot?humid environment have a large impact on color stability causing changes in brightness and chroma of all painting layers where the fixative were applied, except for oyster shell white and are considered the main factors of decomposition by accelerating the aging process of fixatives applied. In comparison to the synthetic resins that were also tested in this study, the traditional glue showed satisfactory results in terms of color stability and influence preservation and the hydrophile property. As it showed exceptionally outstanding adhesive strength in all painting layers in the aspect of adhesive strength, it is considered to be highly stabile for the fixation treatment of painting layers of mural.
The efficiency of mtCOI amplication after DNA extraction of benthic harpacticoid Tigriopus japonicus s.l. was tested under different conditions depending on fixative (99% Ethanol, or 4% Formalin) and additional chemicals (Ludox or Rose Bengal). Each experimental group by the fixative was subdivided into four groups, respectively: 1) Control (fixative only), 2) processed with Ludox HS40, 3) processed with Rose Bengal, and 4) processed with both Ludox HS40 and Rose Bengal. For the 99% ethanol-fixed sample, overall success rate of amplification by PCR was 96% or above, while for the 4% formalin-fixed one, success rate was much lower than those of ethanol-fixed: 1) Control: 27%, 2) Ludox HS40: 3%, 3) Rose Bengal: 7%, and 4) Ludox HS40 and Rose Bengal: 3%. As a result present study verify that 99% ethanol is a proper fixative for DNA extraction in meiofauna organisms.
In the past, PVAc [poly(vinyl acetate)] was used as a fixative for the conservation of the murals in the murals of the Payathonzu temple located in Bagan, Myanmar. In this study, attention was paid to gel cleaning as a method for stably removing such PVAc fixatives. Based on the recent research trend related to the cleaning of murals in Bagan ruins, 3 types of gelling agents (Nevek®, Laponite®RD, Carbopol®980) and 2 types of organic solvents (Acetone, Dimethyl carbonate) were selected. Six types of gel cleaners were prepared by mixing gelling agents and organic solvents, and the properties and fixative removability of these cleaners were compared. As a result of confirming the properties of the prepared gel cleaners, the pH of the cleaners was all in the weak acidic to weakly alkaline range, which was a stable condition for mural application. Also, there was no difference in the viscosity of the cleaners depending on the type of solvent, but there was a difference depending on the type of gelling agent used. Regarding the weight loss ratio of PVAc, which is an indicator of removability, the exposure conditions of the gel cleaners, the boiling point of the solvent used, and the viscosity of the gelling agent acted as factors affecting. As a result of comparing the removability of gel cleaners, it was confirmed that the solvent's fixative solubility, the volatility of the solvent itself, and the solvent release control properties of the gelling agent had a great effect on the removability of the gel cleaners. In Part 2, the stability and the running applicability of the gel cleaners will be investigated by making mockup samples reflecting the properties of the materials and techniques used to produce the mural paintings in the Payathonzu Temple.
Clear visualization of pepper (Capsicum annuum L.) microspore nuclei with common stains such as acetocarmine or propionocarmine is difficult, hindering cytological analysis. The DAPI stain after the addition of ferric chloride solution to fixative resulted in clear visualization of nuclei. For clear visualization of nuclei and slight fluorescence of microspore wall, addition of 40-60 ${mu}ell$ of ferric chloride solution to the 1 $m\ell$ fixative was identified as most effective. At all stages of gametophytic development, the nuclei can be distinctly visualized. Starch granules does not intefere with the fluorochrome, and so the vegetative and generative nuclei were cleary visible in binucleate pollens. With its rapidity and reliability, this technique represents an efficient tool for routine staging or investigation of the nuclear status of the microspore during culture.
There have been many problems like plasmolysis in the ultrastructural studies with kelps. The present study was conducted with series of different fixatives and buffer solutions and several resins to solve the plasmolysis phenomena. The fixative of 1470 mosmol($3\%$ glutaraldehyde, $2.4\%$ paraformaldehyde in 0.05M cacodylate buffer with 0.2M sucrose and $0.5\%$ caffeine at pH of 7.2) showed the least frequency of plasmolysis. The relationship between the concentration of primary fixatives and the frequency of plasmolysis was not found. With above fixative the possibility of plasmolysis during infiltration period was not identified using ultra-low viscosity resin. Generally, the kelp(Laminaria religiosa) contains a lot of mucilage, which interupts the infiltration of fixative. The possible physiological mechanisms related with mucilage secretion may be unable to fix the region of plasmalemma properly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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