• 제목/요약/키워드: fish cell line

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E-SCREEN Assay를 이용한 내분비계 장애물질의 정량적 평가 (Quantitative Assessment of Xenoestrogenic Environmental Pollutants using E-SCREEN Assay)

  • 오승민;이상기;정규혁
    • 약학회지
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    • 제44권5호
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    • pp.416-423
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    • 2000
  • There is a growing concern that a wide variety of chemicals released into the environment can disrupt the endocrine system of fish, wildlife and humans. Endocrine disrupting chemicals (EDCs) include pesticides such as DDT lindane and atrazine, the food packaging chemicals, phthalates and bisphenol A, alkylphenol ethoxylate detergents and the chemical industry by-products, dioxins. Xenoestrogens in the environment have been argued about health risk, because of estrogen mimetic chemicals are exposed only small amounts to human. A number of in vivo and in vitro assays are now in use to assess the activity of xenoestrogens in the environment. A human breast cancer cell line (MCF-7) was used to develop in vitro screening assay for the detection of xenoestrogenic environmental pollutants. The E-SCREEN (MCF7-BUS) assay is proposed as a reliable, easy and rapid-to-perform method. To optimize and validate this method before it can be used routinely, several phenol compounds and pesticides suspected to be estrogenic were tested using I-SCREEN assay. The results showed that this method is a valuable tool for screening potential estrogen-mimicking environmental pollutants and quantitative determination of estrogeniciy.

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Streptococcus iniae의 형태학적 특성과 병원성 (Morphological Characteristics and Pathogenicity of Streptococcus iniae)

  • 김현정;우승호;김진우;박수일
    • 한국어병학회지
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    • 제18권2호
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    • pp.167-178
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    • 2005
  • 본 연구에서는 S. iniae의 병원성 요인으로 작용할 수 있는 capsule의 존재 여부를 확인하고 그에 따른 capsule과 병원성과의 상관 관계를 조사하였다. 즉, 집락의 형태학적 특성에 따라 viscous form (V+)과 non-viscous form (V-)의 균주로 구분하여 그 특성을 비교 분석하였다. 분리균의 생리학적 및 생화학적 특성으로는 숙주의 방어 기작에 대한 저항성이나 병원성 차이를 구분할 수 없었으나 형태학적으로 큰 차이를 있음을 알 수 있었다. 즉, V+인 경우 cell wall 표면에 capsule이 존재하지만 V-에서는 capsule이 존재하지 않는 것으로 확인되었다. V+는 넙치 혈청에서 증식할 수 있지만 V-는 넙치 혈청에 의해 살균되는 것으로 나타나 capsule의 유무에 따라 넙치의 체액성 면역 요소에 대한 저항력에서 차이가 나는 것을 알 수 있었다. 또한, V+는 넙치 신선 혈청으로 감작한 경우에도 V-에 비해 macrophage의 식균율이 낮았으며 식균된 이후에는 균 수가 지속적으로 감소하는 것을 확인할 수 있었고 일반 어류 주화 세포 내로 침입하여 생존 및 증식할 수 있는 것으로 나타났다. 이들 결과는 앞으로의 백신 개발에 유용한 기초 자료로 사용될 수 있을 것으로 사료되었다.

Identification of a Novel PGE2 Regulated Gene in SNU1 Gastric Cancer Cell

  • Park, Min-Seon;Kim, Hong-Tae;Min, Byung-Re;Kimm, Ku-Chan;Nam, Myeong-Jin
    • BMB Reports
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    • 제33권2호
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    • pp.184-187
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    • 2000
  • Prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) plays an important role in the regulation of various gastric functions, and the growth-inhibitory activities on tumor cells are studied in vitro and in vivo. Although the mechanisms have attracted many researchers in the past decade, the molecular mechanisms of cell cycle arrest, or induction of apoptosis by $PGE_2$, is unclear. We investigated the effects of $PGE_2$ on the growth of the human gastric carcinoma cell line SNU1 and genes that are regulated by $PGE_2$ and isolated them using differential display RT-PCR (DD RT-PCR). FACS analysis suggested that SNU1 cells were arrested at the G1 phase by $PGE_2$ treatment. This growth inhibitory effect was in a time- and dose-dependent manner. Treatment of SNU1 cells with $10\;{\mu}g/ml$ $PGE_2$, followed by DD RT-PCR analysis, revealed differently expressed bands patterns from the control. Among the differently expressed clones, we found an unidentified cDNA clone (HGP-27) overexpressed in $PGE_2$-treated cells. The full-length cDNA of HGP-27 was isolated using RACE, which consisted of a 30-nt 5'-noncoding region, a 891-nt ORF encoding the 296 amino acid protein, and a 738-nt 3'-noncoding region including a poly(a) signal. This gene was localized on the short arm of chromosome number 11. Using the Motif Finder program, a myb-DNA binding repeat signature was detected on the ORF region. The COOH-terminal half was shown to have similarity with the $NH_3$-terminal domain of thioredoxin (Trx). This relation between HGP-27 and Trx implied a potential role for HGP-27 in modulating the DNA binding function of a transcription factor, myb.

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배양 조건이 Photobacterium damselae subsp. damselae의 미생물학적 성상 및 병원성에 미치는 영향 (Effects of the microbiological properties and pathogenicity of Photobacterium damselae subsp. damselae under different culture conditions)

  • 권문경;조병열;박명애
    • 한국어병학회지
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    • 제22권3호
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    • pp.239-251
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    • 2009
  • 배양 온도, 배양 배지 중의 pH, NaCl 농도, iron 농도와 같은 배양 조건이 P. damselae의 미생물학적 성상 및 병원성에 미치는 영향을 조사하였다. P. damselae는 배양 온도 15-30${^{\circ}C}$에서 배지의 pH 5-9, NaCl 농도 0-6%와 $FeCl_{3}$ 첨가시 성장이 촉진되었지만, iron-chelator 첨가 시성장이 억제되었다. Iron-limited 조건에서 배양시 ECPs protein 농도, phospholipase, 용혈능, siderophore 및 cytotoxicity 활성 이 높게 나타났고, 넙치 혈청의 살균작용 대한 생존율도 증가 되었으나, iron-added 조건에서는 감소되어, 배양 조건 중 iron 농도에 영향을 가장 많이 받는 것으로 나타났다. 따라서, 본 연구에서 적용한 iron-limited 조건은 철농도가 낮은 숙주 내와 유사한 환경이므로 iron-limited에서 P. damselae 배양 시 나타나는 병원성의 증가는 어체에 감염시 나타나는 병원성 발현 기전과 유사할 것으로 사료된다.

능성어 (Epinephelus septemfasciatus) 자어의 소화기관 구조 및 조직학적 특징 (The Structure of Digestive Tract and Histological Features of the Larvae in Sevenband Grouper, Epinephelus septemfasciatus)

  • 박종연;김나리;박재민;명정인;조재권
    • 한국어류학회지
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    • 제28권1호
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    • pp.9-18
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    • 2016
  • 이 연구는 능성어 (Epinephelus septemfasciatus)의 소화관 발달과정을 형태학적과 조직학적인 방법으로 부화 후부터 60일 동안 관찰하였다. 먹이 급이는 부화 후 2일부터 20일 동안 Rotifer (Brachionus rotundiformis)와 클로렐라 (Chlorella ellipsoidea)를 급이 하였고, 20일부터 Rotifer와 brine shrimp (Artemia salina)를 급이 하였으며, 23일부터 Rotifer와 Artemia, 배합사료를 급이 하였다. 자치어 10마리를 임의로 선택하여 10% 중성포르말린에 고정한 후 형태학적 관찰과 파라핀포매법에 의한 조직학적인 관찰을 하였다. 능성어의 RLG는 평균 0.87으로 육식성어류의 특성을 보여주었다. 부화 직후의 자어는 입과 항문은 열려있지 않았고, 소화관은 난황을 따라 일직선상으로 관찰되었다. 부화 후 5일째 후기 자어는 입과 항문이 열리면서 첫 섭식 활동이 관찰되었고, 부화 후 8일째 변태가 시작되었다. 부화 후 11일째 후기 자어 식도는 네 개의 층이 구분 되었으며, 식도와 중장, 직장에서는 배상세포가 관찰되었다. 부화 후 19일째 후기 자어는 공식이 시작되었으며, 그로인해 개체의 성장차이가 관찰되었다. 위는 내부가 팽창되면서 분문위, 위체부 및 유문위의 구분이 가능해졌고, 유문수가 분화되었으며, 장 전체에서는 배상세포를 관찰할 수 있었다. 부화 후 28일째 위내부에 위선이 분화되었다. 부화 후 38일째 후기 자어는 위에서 위액이 분비되는 것을 확인할 수 있었고, 유문수에 점막주름이 확인되었다. 부화 후 38일째에서 치어기로 이행하는 시기 동안 위 내강은 넓어지고, 위선의 숫자와 장내점액세포, 점막주름은 지속적으로 증가하거나 길어졌으나 조직화학적인 변화는 관찰되지 않았다. 따라서 본 연구는 형태학적 및 조직학적 방법을 이용하여 능성어의 소화관 분화 및 발달에 관한 정보를 얻고자 하였으며, 초기 종묘생산과정에서 적절한 먹이투여시기를 확립함으로써 성장 및 생존율 향상에 기초자료를 제공하고자 하였다.

Antiviral Efficacy of an Aquatic Disinfectant Tablet Composed to Calcium Hypochlorite Against Red Sea Bream Iridovirus

  • Cha, Chun-Nam;Lee, Yeo-Eun;Kang, In-Jin;Yoo, Chang-Yeul;Park, Eun-Kee;Kim, Suk;Lee, Hu-Jang
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제27권3호
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    • pp.285-289
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    • 2012
  • In this study, the veridical efficacy of an aquatic disinfectant tablet composed to calcium hypochlorite against red sea bream iridovirus (RBIV). A veridical efficacy was determined with the viability of RBIV contacted with the disinfectant in viral stock cultured in fat head minnow cell line. An aquatic disinfectant tablet and RBIV were reacted on the distilled water (DW), hard water (HW) or organic matter suspension (OM) condition. On DW and HW condition, RBIV was inactivated with 25,000 fold dilutions of an aquatic disinfectant tablet. With the investigation of the antiviral effect of the disinfectant on OM condition, RBIV was inactivated on 22,000 fold dilutions of an aquatic disinfectant tablet. As an aquatic disinfectant tablet possesses veridical efficacy against RBIV, the disinfectant solution can be used to limit the spread of cultured marine fish viral disease.

방사선 조사 사료를 섭취한 Mouse의 혈장, 간, 소장 점막의 과산화지질과 림프구 DNA의 산화적 손상 (Plasma, Tissue Thiobarbituric Acid Reactive Substance and Lymphocyte Oxidative DNA Damage in Mouse Fed Gamma Irradiated Diet)

  • 장현희;강명희;양재승;이선영
    • Journal of Nutrition and Health
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    • 제36권3호
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    • pp.255-261
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    • 2003
  • Food irradiation has been steadily increasing in many countries in line with increasing international trade and concerns about naturally occurring harmful contaminants in food. Although irradiation provides an excellent safeguard for the consumer by destroying almost 100% of harmful bacteria, it is necessary to ensure the safety of irradiated foods. This study was performed to investigate the effect of an irradiated diet on lipid peroxidation in the plasma, liver, small intestinal mucosa, and lymphocyte DNA damage in mice. Eight-week old ICR mice were assigned to two groups to receive either non-irradiated or irradiated (10 kGy) diets containing 20.38% fish powder and 6.06% sesame seeds for 4 weeks. The resulting changes in the degrees of lipid peroxidation were evaluated based on the level of plasma and liver thiobarbituric acid reactive substance (TBARS), transmission electron micrograph of jejunal mucosa, and free radical-induced oxidative DNA damage in lymphocytes, as measured by alkaline comet assay (single cell gel electrophoresis). The peroxide values of the gamma irradiated diet were measured every week, and the sample for comet assay was taken at the end of the four week experimental period. There was no significant difference in food efficiency ratio between the two groups. The peroxide values of the diet were immediately increased to 35.5% after gamma irradiation and kept on increasing during storage. After 4 weeks, no differences in tissue or plasma TBARS value were observed between the two groups, but epithelial cells of jejumum showed osmiophillic laminated membranous structures, considered as myelin figures,. The oxidative DNA damage expressed as tail moment (TM) increased 30% in the blood lymphocytes of the mice fed the irradiated diet. In conclusion, the comet assay sensitively detected differences in lymphocyte DNA damage after feeding with the irradiated diet for 4 weeks. However, in order to ensure the safety of irradiated foods, it would be more useful to conduct a long-term feeding regimen using an irradiated diet and examine the level of lipid peroxidation and the state of oxidative stress in a greater range of organs.

Antiviral Efficacy of an Aquatic Disinfectant Tablet Composed of Calcium Hypochlorite Against Viral Hemorrhagic Septicemia Virus

  • Park, Eun-Kee;Yu, Eun-Ah;Cha, Chun-Nam;Yoo, Chang-Yeul;Choi, Hyunju;Kim, Suk;Lee, Hu-Jang
    • 한국환경보건학회지
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    • 제39권4호
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    • pp.376-382
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    • 2013
  • Objectives: The objectives of this study were to identify the virucidal efficacy against the viral hemorrhagic septicemia virus (VHSV) of an aquatic disinfectant tablet composed of calcium hypochlorite. Methods: Virucidal efficacy was determined through the viability of VHSV contacted with the disinfectant in a viral stock cultured in a fathead minnow cell line. An aquatic disinfectant tablet and VHSV were reacted under distilled water (DW), hard water (HW) or organic matter suspension (OM) conditions. Results: Under DW and HW conditions, VHSV was inactivated with 24,000- and 2000-fold dilutions of the aquatic disinfectant tablet, respectively. With the investigation of the antiviral effect of the disinfectant under OM conditions, VHSV was inactivated with a 16,000-fold dilution of the aquatic disinfectant tablet. Conclusions: The results from this study showed that the aquatic disinfectant tablet was a highly effective disinfectant against VHSV. In the future, a controlled field trial is required to determine whether the use of an aquatic disinfectant tablet will be able to reduce VHSV in a cultured marine fish farm.

In vitro 검출시스템을 이용한 해양생물 추출물로부터 에스트로겐 활성 검증 (Verification of Estrogenic Activity in Ethanol Extracts of Marine Organisms Using in vitro Test System.)

  • 하종명;이상현
    • 생명과학회지
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    • 제13권6호
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    • pp.799-804
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    • 2003
  • 천연물에 포함되어 있는 에스트로겐 효과를 가지는 성분의 생체 내에서의 직접적인 효과를 검정하기 위하여, 에스트로겐 수용체를 발현하는 것으로 알려진 인체 유방암 세포주 MCF7에 에스트로겐에 반응성을 나타내도록 고안된 CAT 리포터 플라스미드를 도입한 in vitro 검출시스템을 사용하여 에스트로겐 활성을 측정하였다. 이미 여러 분야에서 그 기능성의 연구가 활발히 진행되고 있는 광합성 조류인 스피루리나(spirulina)와 파래 등의 해양식물을 대상으로 에스트로겐 반응 리포터 시스템을 이용하여 에스트로겐 활성을 측정하였다. 그 결과, 스피루리나 에탄올 추출물의 CAT 활성은 $500\mug/ml\; 와\; 50 \mug/ml$의 농도에서 표준물질인 $17\beta-estradiol$의 농도 $10^{-8}$ M과 비슷한 정도의 에스트로겐 활성 효과를 나타내었고, $5\mug/ml$의 농도에서는 표준물질인 $17\beta-estradiol$의 농도 $10^{-10}$ M과 비슷한 정도의 에스트로겐 활성 효과를 나타내었다. 하지만 파래 추출물의 경우에는 에탄올을 처리한 대조군과 비교하여 유의한 CAT활성 변화를 나타내지 않았다 한편, 불가사리와 새우 등의 해양동물을 대상으로 한 실험에서는 에탄올을 처리한 대조군과 비교하여 유의한 CAT 활성 변화를 나타내지 않았다. 이 연구 결과로 광합성 조류인 스피루리나에 에스트로겐 활성을 효과적으로 나타내는 생리활성성분이 포함되어 있을 수 있다는 가능성을 확인하였다.