We characterized tissue specific-expressed genes in the posterior silk gland of Bombyx mori using by the Annealing Control Primer based differential display-PCR manner. In this study, we isolated 34 differentially expressed PCR amplicons, which one of these was identified as a novel transcript named as ACP-16 (366 bp), its expression was observed only in the posterior silk glands by Northern blot analysis. To determine promoter region of the ACP-16, we isolated and analyzed a phage DNA having 1.7 kb-long genome DNA including the open reading flame and 5'- upstream untranslated region of the ACP-16 gene from a genomic DNA library. We have estimated a promoter region of the ACP-16 gene by a web promoter prediction engine, which locates -750 ~ -165 from translation initiation site (ATG, +1). ACP-16 gene is necessary to more studies about critical biological role in order to apply the silkworm's transgenic system.
Regenerated Antheraea pernyi silk sponge was prepared using calcium nitrate 4 hydrate melt and examined the conformational changes treated with aqueous ethanol solution. The conformation of silk sponges was changed from random coil structure to ${\beta}$-sheet and ${\alpha}$-helix conformation with low ethanol concentration (50 ~ 70%). On the other hand, that of silk sponges with 80% ethanol treatment showed ${\beta}$-sheet ($700cm^{-1}$), ${\alpha}$-helix ($625cm^{-1}$), and random coil ($660cm^{-1}$) specific peaks. Wound healing effect in vitro was observed by cytoslective wound healing kit. Therefore, regenerated Antheraea pernyi silk sponges might be used as promising wound dressing materials.
This experiment was carried out to analyze genetic parameters for the selection of silkworm by diallel-crossing with three Japanese and four Chiness silkworm races. Heritability, genetic correlation and path coefficient were calculated as the statistical parameters to evaluate direct or indirect effects of various gentic characters on bave weight. The heritabilities of fifth instar period, cocoon weight, cocoon layer weight, cocoon layer ration, fibroin contents, boiling off ratio and bave weight were over 76.65% in both F1 and F2 generations. There were positive coefficients in both phenotypic and genotypic correlations between male and female of both F1 and F2 generations. The latter showed greater values in general. The correlation between bave weight and the characters of cocoon weight, cocoon layer weight, cocoon layer ratio, fibroin contents were over 0.727 in both sexes of F1 and F2. Therefore, these results suggest that above characters would be useful for genetic selection of silkworms. As result of path coefficient analysis, there was a direct effect with path coefficient value of 0.991 between bave weight and F1 female cocoon layer weight, and with the value of 0.803 between bave weight and F1 male cocoon weight. In F2 the effect showed 0.938 between bave weight and male cocoon weight and cocoon layer weight had greater influence on direct or indirect effects (in path coefficient) than the others.
Antheraea pernyi silk powder was prepared by treatment with HCl and NaOH. The degree of hydrolysis of Antheraea pernyi silk fiber was examined. The morphology and structural characteristics of Antheraea pernyi silk powder were investigated by using SEM, FTIR and X-ray diffractometer. As the concentration of HCl and NaOH and tratment temperature increased, in general, the degree of hydrolysis of Antheraea pernyi silk fiber increased. On the other hand, the degree of hydrolysis of Antheraea pernyi treated with 3 N NaOH at 120$^{\circ}C$ for 24 hr was 70 wt%, which was lower than that of 90$^{\circ}C$(83 wt%). The morphology of acid/alkali resistance fraction of Antheraea pernyi silk fibroin was transformed from fiber form to powered one with an increase of hydrolysis. The conformation of Antheraea pernyi silk powder characterized by FT-IR spectrometer and X-ray diffractometer ${\beta}$-sheet and ${\alpha}$-helix structure.
Sericin hydrolyzing enzyme, produced by the selected bacteria, S4-1-1, was studied and following properties were obtained. 1. The activity of this bacterial sericinase was not decreased for 30 days of storage at $5^{\circ}C$. But at $20^{\circ}C$, for 30 hrs. was the maximum period to keep the initial activity of this enzyme. 2. This bacterial enzyme gave only sericinase activity but never indicated fibroin hydrolyzing activity. 3. The chelating reagent of EDTA and Ag or Hg ions were classified as strung inhibitors but Cu and Cd ions were indicated as moderate inhibitors to this enzyme action. 4. This enzyme was not inhibited by the surface active agent, Peretex-N, but strongly activated by this agent at low concentration. In the other hand, by the application of this enzyme to the unwinding works on the mulberry cocoon, the following results were also obtained. 1. On the weight and length, nonbreaking Length, size, colour and unwinding ratio of have, the enzyme appling method was superior to generally used cooking method. 2. The tested results of strength and elongation, bouchon, haririness loops, neatness and evenness of have were also indicated spuerior properties.
Changes of silk protein compositions of average molecular weight (Mw) and free amino acid composition to different solubility conditions were studied by SDS-polyacrylamide electropholesis, gel permeation chromatography (GPC), and free amino acid analysis method. We can not detected average molecular weight distribution of different hydrochloric acid (HCl) conditions as SDS-polyacrylamide method, but as using GPC method, molecular weight distribution of 2N-HCl, 1N-HCl and 0.5N-HCl (3 hrs at $110^{\circ}C$ treated) are confirmed Mw 800, 1,500 and 3,700, respectively. The average molecular weight of calcium chroride and calcium chloride-enzyme treated samples are shown Mw 46,800 and 12,500, respectively. The degree of hydrolysis and the composition of the free amino acid in the fibroin hydrolysates effected significantly composition of free amino acids of the fibroin powder. The increase of the degree of hydrolysis and ratio of free amino acids and oligopeptides were found to be directly related to the concentration of hydrochloric acid and treatment of enzyme, resulting in the increase of water solubility.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.34
no.1
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pp.6-10
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2017
Dissolution of Antheraea yamamai silkworm cocoon was carried out in various solvent systems with various dissolving conditions including dissolution salts, salt concentration, dissolving temperature, and time. General chaotropic salt for Bombyx mori silk fibroin does not work for A. yamamai silkworm cocoon. Lithium bromide 9.3 M at $100^{\circ}C$ also does not work to dissolve wild silkworm cocoon. However, 9 M of lithium thiocyanate treatment at $100^{\circ}C$ induced 100% dissolution of wild silkworm cocoon. But it could not be dissolved lower than $60^{\circ}C$. Like lithium thiocyanate, less than $60^{\circ}C$ treatment with molten calcium nitrate 4 hydrate could not dissolve wild silkworm cocoon. As the dissolution temperature increased up to $100^{\circ}C$, the solubility of wild one was reached over 90%. SDS-PAGE showed broad tailing stream pattern that means the molecule of wild silk was depolymerized with dissolution temperature and time. From the above results, the best chaotropic salt for A.yamamai silkworm cocoon is calcium nitrate 4 hydrate.
Kim, Sung-Kuk;Jo, You-Young;Lee, Kwang-Gill;Lee, Heui-Sam;Yeo, Joo-Hong;Kweon, HaeYong
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.28
no.2
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pp.66-70
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2014
In order to the feasibility of silk materials as protein delivery system, silk beads incorporated with bovine serum albumin (BSA) were prepared by dropping silk fibroin extract into dope solution composed of ethanol and dichloromethane. Structural and morphological characteristics of silk beads were examined using scanning electron microscopy (SEM), infrared spectrometry, and X-ray diffractometry. Swelling ratio of silk beads was also measured. Release behavior of prototypical protein, BSA, was studied by observing the electropheretic phenomenon and release profile. SEM showed that silk beads are spherical with porous interior structure. Infrared spectrometry and X-ray diffraction confirm that the silk beads have a ${\beta}$-sheet conformation. The swelling capability of silk beads increased with the incorporation of the protein. The protein was released from the beads with slow release following an initial burst release. Therefore, silk beads show promise as materials for encasing protein drugs to be delivered to targets in the human body.
Journal of the Korean Society of Clothing and Textiles
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v.27
no.5
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pp.517-523
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2003
We studied the physical properties of silk fabrics after degumming, the dyeability and the color fastness of silk fabrics after degumming and sericin fixing. As the sericin was removed from silk fabrics, the rate of weight loss increased and both the abrasion resistance and the drape coefficient decreased. This means that the amount of the sericin remained in silk fabrics significantly affects the physical properties of silk fabrics. On the surface and the cross-section of silk fabrics, the silk fibers enclosed by the sericin seemed to be in a lump shape. Each fibroin strand, however, got scattered, as the process of degumming went through. The dyeability of silk fabrics degummed decreased at between 20$^{\circ}C$∼80$^{\circ}C$ the dyeing temperature, on the other hand, it significantly increased over 80$^{\circ}C$. The dyeability of the sericin-fixed silk fabrics was lower than that of the non-serin-fixed silk fabrics, to a little extent. The colorfastness of crocking in the dyed-silk fabrics was a little low and that of the sweat was much lower in a basic sweat. Especially, the colorfastness of the partially degummed silk fabrics was low, because the sericin was not stable in the condition of sweat. Therefore, the process of sericin fixing is essentially required, for the partially degummed silk fabrics and the process of degumming itself.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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