호기성 균주인 Streptoverticillium mobaraense에 의해 생산되는 Transglutaminase의 고수율을 위한 실험을 하였다. 라틴방격법에 의해 실험을 설계하여 최적 배지를 확정하였고, 호기성 균주인만큼 공기공급을 위한 통기 및 교반이 중요하게 작용됨을 관찰하였다. 이를 위해 임펠러의 형태 및 크기에 관한 실험을 수행하였고, 향후 부피산소공기전달 속도를 vvm과 교반속도에 따라 측정하도록 할 것이다. 또한 미생물의 증식 및 효소생산성에 미치는 온도 및 pH의 조건에 대해 실험한 결과 온도보다는 산성 및 중성에서의 pH가 효소생산성에 높은 영향을 미치고 있다. 플라스크 배양에서 평균적으로 1.3 U/mL 활성의 효소생산이 가능했으며 동일조건의 발효조 배양시 0.7 U/mL로 생산성이 감소하였다.
Bifidobacteria의 배양효율을 증대하기 위하여 완충제로써 $CaCO_3$를 Ca-alginate에 고정화한 비드를 제조하여 사용하였다. B. longum KCTC 3218과 한국인 분변에서 분리한 B. longum HLC 3742 균주를 $CaCO_3$ 비드, NaOH, $Na_2CO_3$, $NH_4OH$ 등을 완충제로 각각 사용한 2.5-liter 발효기에서 각각 배양하여 균 증식과 저장에 따른 생존력을 조사한 결과 $CaCO_3$ 비드를 완충제로 사용한 경우가 다른 완충제를 사용한 경우보다 균 증식과 저장 안정성에서 효과적임을 알 수 있었다. 따라서 완충제로써 $CaCO_3$ 비드는 bifidobacteria의 고농도 배양과 생존력 증대에 유용할 것으로 사료되었다.
본 연구의 목적은 식품부산물로부터 유기산 생산 및 분리 농축에 있다. 회분식 발효를 실시하여 균주의 최적 발효조건을 구하여 세포 재순환식 연속 발효공정에 적용한 결과, CSL의 최적 함량은 2.5%로 나타났으며 수율과 생산성은 각각 0.80g total acid/g glucose, 0.26g total acid/L/h로 향상 되었다. 세포 재순환식 연속발효 결과, 최대 유기산 생산성은 희석률 0.2/h에서 3.32g organic acid/L/h로 회분식 발효와 비교해 볼 때 최대 생산성으로는 13배, 세포량으로는 22배 증가한 것으로 나타났다. 또한, 최적 추출시스템은 30%w/w TOA/MIBK로 나타났으며, 발효액내의 유기산을 약 90%까지 분리 및 농축할 수 있음을 확인하였다.
발효기에서의 균사체 생장과 세포외다당류의 생산을 위한 최적 배양조건을 조사하기 위하여 회분식 반응기를 이용하여 연구한 결과 최적 회전속도와 통기량은 각각 200 rpm과 1.5 vvm 었다. 최적 배양 환경하에서 5L발효기(working volume 2 L)에서 배양한 결과 각각 10.21 g/L 와 3.56 g/L의 mycelial growth와 exo- polysaccharide를 얻었다.
한지자숙폐액을 사료첨가효모의 생산기질로 재이용할 수 있는 가를 검토하기 위하여 사료첨가효모제품으로부터 분리한 Saccha aromyces CereVlSlae종을 한지자숙폐액에 배양하였다. 자숙폐액원액에서는 균이 증식하지 못하였으나, 희석액에서는 증식하였으 며, 증류수로 7.5배 희석시 최대증식을 보였다. Jar fennenter배양 에서의 최대총균수는 $1.34{\times}107/mL$이었으며, 최대생균수는 $1.1{\times}107/mL$이었다. 배양액의 균체농도를 증가시키기 위하여 배양중 에 자숙폐액원액을 침가하여 총균수를 최대 $8.2{\times}107/mL$까지 증 가시킬 수 있었다. 지숙폐액원액과 함께 $(NH_4)_2S0_4 및 KH_2P0_4$ 까지 첨가함으로써 최대균체농도에 도달하는 시간을 단축시킬 수 있었다.
As a result of broth substitutions when each culture-mediums were difference, whole culture-medium was found to be best feeding solution for production of PS-7 by B. indica. Maximal production of PS-7 was 1$10.0\;g/{\ell}$ and its conversion rate from 2% (w/v) glucose to PS-7 was 50%. After 48 hr, 50%(v/v) medium of working volume began to substitute in 7L jar fermenter. Production of PS-7 increased after 48hr, recovered productivity of PS-7. Following this preliminary culture, the resultant culture was subjected to continuous flow conditions controlled that the dilution rate were $0.01\;{\sim}\;0.04\;h^{-1}$. Production of PS-7 increased at dilution rate $0.0100\;h^{-1}$ whereas productivity of PS-7 decreased gradually in dilution rate $0.0200\;{\sim}\;0.0400\;h^{-1}$. Maximal production of PS-7 was $10.0\;g/{\ell}$ in continuous culture.
LEE , DAE-HEE;JUN, WOO-JIN;YOON, JEONG-WEON;CHO, HONG-YON;HONG, BUM-SHIK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제14권6호
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pp.1310-1317
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2004
The extracellular production of 5-aminolevulinic acid (ALA) by recombinant E. coli BL21 harboring a fusion gene hemA was investigated in a fermenter. For this purpose, the effects of various physiological factors, such as isopropylthio$\beta$-D-galactopyranoside (IPTG) concentrations and the time of induction, on enzyme activity were studied. Optimum concentrations of glycine and succinic acid were found to be 30 mM and 90 mM, respectively. When the cells were permitted to grow for 2 h prior to the addition of 0.1 mM IPTG, the activity of ALA synthase was higher than when IPTG was initially added. A 36-fold increase in the activity was observed with only 0.1 mM IPTG added. The pH of the medium also influenced the ALA synthase activity with the maximal activity occurring at pH 6.5. In recombinant E. coli extracts, the repeated addition of glycine and D-glucose increased the production of ALA and the inhibited intracellular ALA dehydratase activity, with up to 32 mM ALA being produced in the cultivation.
Mutation and its pilot-scale fermentation were conducted for the production of teicoplanin from Actinoplanes teichomyceticus. The fermentation medium was optimized by replacement and Plackett-Burman experimental design. A maximum production of 1,500 mg/l teicoplanin was obtained by pilot-scale fermentation in an optimized medium containing (g/l): 30 g maltodextrin, 5 g glucose, 5 g yeast extract, 5 g soybean meal, 0.5 g $MgSO_4{\cdot}7H_2O$, 0.1 g NaCl, 0.1 g $CaCl_2{\cdot}2H_2O$, and 50 g Diaion HP-20. The production of teicoplanin was improved 3-fold from the parental strain by mutation, media optimization, and fermentation, and laboratory-scale fermentation was successfully demonstrated in a pilot-scale fermenter for the industrial production of teicoplanin.
키토산분해효소를 분비하는 세균 Bacillus sp. P16의 최적배양조건을 조사하였다. 키토산분해효소 생산을 위한 최적 탄소원은 0.5%분말 키토산이었으며, 최적 질소원은 1% tryptone이었다. 최적온도는 $37^{\circ}C$였으며, 최적 초기 pH는 7.0이었다. 이 조건에서 $60{\sim}$72시간 배양하였을 때 효소 생산이 최고에 도달하였으며, 효소활성은 약 30% 증가하였다. 이를 발효조에서 배양하면 $6{\sim}$12시간 배양으로 최대활성에 도달하였으며, 효소 생산은 약 100% 증가하였다.
In order to develop the method for mass production of natural food colorant from Monascus anka, optimum cultivation conditions for producing red and yellow pigments by cultiva- ting the mold in a jar fermenter and their color characteristics were investigated. The mold produced red and yellow pigments both intracellularly and extracellularly. These pigments showed unique light absorption characteristics with maximum absorption of 494, 380, 506, and 388 nm for extracellular red pigment (ERP), extracellular yellow pigment (EYP), intracellular red pigment (IRP), and intracellular yellow pigment (IYP), respectively. Optimum conditions for producing red pigments were found to be temperature 30$\circ$C, initial pH 6.0, rice powder 3-5%, peptone 0.05%, magnesium sulfate 0.25%, aeration rate 0.1 vvm. Optimum temperature for producing yellow pigments was around 35$\circ$C which is higher than that of producing red pigments. The initial pH and rice powder concentration for producing yellow pigments were the same as those of producing red pigments. The higher concentration of nitrogen source and inorganic salt, aeration rate, the more the yellow pigments were produced. The optimum agitation speed was 100 - 300 rpm for pigment production.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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