Jeong, Jin Young;Suresh, Sekar;Park, Mi Na;Jang, Mi;Park, Sungkwon;Gobianand, Kuppannan;You, Seungkwon;Yeon, Sung-Heom;Lee, Hyun-Jeong
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제27권12호
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pp.1783-1793
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2014
Capsaicin is a major constituent of hot chili peppers that influences lipid metabolism in animals. In this study, we explored the effects of capsaicin on adipogenic differentiation of bovine bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) in a dose- and time-dependent manner. The BMSCs were treated with various concentrations of capsaicin (0, 0.1, 1, 5, and $10{\mu}M$) for 2, 4, and 6 days. Capsaicin suppressed fat deposition significantly during adipogenic differentiation. Peroxisome proliferator-activated receptor gamma, cytosine-cytosine-adenosine-adenosine-thymidine/enhancer binding protein alpha, fatty acid binding protein 4, and stearoyl-CoA desaturase expression decreased after capsaicin treatment. We showed that the number of apoptotic cells increased in dose- and time-dependent manners. Furthermore, we found that capsaicin increased the expression levels of apoptotic genes, such as B-cell lymphoma 2-associated X protein and caspase 3. Overall, capsaicin inhibits fat deposition by triggering apoptosis.
본 연구에서는 쓴메밀 새싹 추출물(TBS)을 대상으로 histone acetyltransferase(HAT) 활성 저해능을 평가하고 oleic acid와 palmitic acid(OPA)를 이용하여 HepG2 세포에서 비알코올성 지방간을 유도하여 그 효과를 검토하였다. HeLa 세포의 nuclear extract(NE)를 HAT의 source로 하여 in vitro에서 TBS에 의한 HAT 활성 저해능을 평가한 결과 추출물의 처리에 의하여 HAT 활성이 억제됨을 관찰할 수 있었다. 또한, 대표적인 HAT 단백질인 p300과 CBP를 이용하여 동일한 방식으로 HAT 억제능을 평가한 결과 TBS 처리에 의하여 두 단백질 모두 활성이 감소하였으며, 특히 TBS는 p300의 활성을 특이적으로 저해함을 확인할 수 있었다. 그뿐만 아니라 HepG2 세포에 $400{\mu}M$의 oleic acid 및 $100{\mu}M$의 palmitic acid와 함께 $200{\mu}g/mL$, $500{\mu}g/mL$의 TBS를 처리한 후 NE를 이용하여 세포 내 HAT 활성을 측정한 결과 역시 추출물 처리에 의하여 세포 내 HAT 활성이 저해되어 있음이 관찰되었다. TBS에 의한 HAT 활성의 억제는 세포 내 다양한 단백질들의 아세틸화 저해와 지질축적에 의하여 아세틸화 변형을 일으키는 것으로 알려진 histone H3K9, H4K8의 아세틸화 및 H3K36의 아세틸화를 감소시켰으며, 세포 내 지질합성과 관련된 대표적 유전자인 SREBP1c, ACLY, FAS의 전사 활성 역시 저해함을 관찰하였다. 이와 같은 변화를 통하여 OPA에 의하여 HepG2 세포 내에 축적되었던 지질은 TBS의 처리에 의하여 효과적으로 감소하였으며 이때 처리된 OPA와 소재에 의한 세포 내 독성은 관찰되지 않았다. 그러므로 이러한 결과는 TBS에 의한 HAT 활성의 저해가 히스톤 단백질의 아세틸활 변형을 억제하고 이를 통하여 지방 합성 관련 유전자들의 전사 활성을 감소시켜 결과적으로 세포 내 지질축적을 방지하는 것으로 생각되며, TBS은 비알코올성 지방간질환의 예방에 좋은 천연물 소재로 활용될 수 있을 것이라 여겨진다.
Park, Younghyun;Jang, Joonseong;Lee, Dongju;Yoon, Michung
대한의생명과학회지
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제24권4호
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pp.311-318
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2018
Vitamin C (ascorbic acid) supplementation has been suggested to negatively correlate with obesity in humans and other animals. Previous studies, including ours, have demonstrated that a high-fat diet (HFD) induces obesity and related diseases such as hyperlipidemia, hyperglycemia, insulin resistance, and nonalcoholic fatty liver disease. Here, we investigated the effects of vitamin C on visceral adipocyte hypertrophy and glucose intolerance in C57BL/6J mice. Mice received a low-fat diet (LFD, 10% kcal fat), HFD (45% kcal fat), or the same HFD supplemented with vitamin C (HFD-VC, 1% w/w) for 15 weeks. Visceral adiposity and glucose intolerance were examined using metabolic measurements, histology, and gene expression analyses. Mice in the HFD-VC supplementation group had reduced body weight, mesenteric fat mass, and mesenteric adipocyte size compared with HFD-fed mice. Vitamin C intake in obese mice also decreased the mRNA levels of lipogenesis-related genes (i.e., stearoyl-CoA desaturase 1 and sterol regulatory element-binding protein 1c) in mesenteric adipose tissues, inhibited hyperglycemia, and improved glucose tolerance. In addition, vitamin C attenuated the HFD-induced increase in the size of pancreatic islets. These results suggest that vitamin C suppresses HFD-induced visceral adipocyte hypertrophy and glucose intolerance in part by decreasing the visceral adipose expression of genes involved in lipogenesis.
Objectives: Ephedrae herba (EH) and Coicis semen (CS) has been frequently prescribed for the treatment of obesity. However, effects of combinational extracts of these two herbs on non-alcoholic fatty liver disease are unknown. The aim of the present study was to investigate the effects of EH and CS on lipid accumulation and glucose absorption in free fatty acids (FFAs) or palmitic acid (PA)-treated HepG2 cells. Methods: Five samples of EH and CS were extracted by combination ratios (S1=0:100, S2=25:75, S3=50:50, S4=75:25, S5=100:0). Oil Red O staining was used to measure lipid accumulation in FFAs-induced steatosis cells. Intracellular triglycerides and total cholesterol levels were measured in FFAs-induced steatotic HepG2 cells. In PA-treated cells, intracellular 2-NBDG was detected using a fluorescence microplate reader and flow cytometry. Phosphorylation of key metabolism-related factors of AMP-activated protein kinase and acetyl-CoA carboxylase, expression of key lipid synthesis-related factors carnitine palmitoyltransferase 1 alpha (CPT1α), sterol regulatory element-binding protein 1 (SREBP1), peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARγ) and CCAAT enhancer binding protein alpha (C/EBPα) were confirmed by western blot. Results: Treatment of EH-CS combination in the FFAs-induced steatotic HepG2 cells significantly reduced lipid accumulation. As the relative ratio of Ephedrae herba increased, the lipid-lowering effects of the combination were increased. However, S1 and S5 of Ephedrae herba and Coicis semen did not significantly reduce triglycerides and total cholesterol induced by FFAs. However, the combination of Ephedrae herba and Coicis semen restored glucose absorption in PA-induced HepG2 cells. Major makers of SREBP1, PPARγ, C/EBPα, and CPT1α expression tended to decrease with EH ratio. Conclusions: The EH-CS combination has advantages over sole EH and CS extracts in improving lipid and glucose metabolism in liver steatosis models.
The epididymal fat of mouse is a part of visceral fat deposit and is divided into the distal or proximal part based on its histochemical characteristics. Even though the formation of the epididymal fat pad begins before the birth, a detailed adipogenic procedure of the epididymal fat has not been revealed. The epididymal fat pad becomes enlarged and expended with age, and expressional changes of numerous genes are associated with the maturation of fat tissues. In the present research, expressional patterns of adipose tissue-related genes in the distal epididymal fat of mouse at 2, 5, 8, and 12 months of postnatal age were determined by a quantitative real-time polymerase chain reaction (PCR) analysis. The lowest transcript levels of fatty acid binding protein 4 (Fabp4), lipoprotein lipase (Lpl), delta like non-canonical Notch ligand 1 (Dlk1), peroxisome proliferator-activated receptor gamma (Pparg), leptin (Lep), adiponectin (Adipoq), and resistin (Retn) were detected at 2 months of age, except fatty acid synthase (Fasn) showing the lowest level at 5 months of age. Even though expression of Lep and Fabp4 were gradually increased until 12 months of age, significant increases of Pparg and Adipoq transcript levels were continued until 8 months of age. The transcript levels of Lpl, Rent, Dlk1, and Fasn were significantly increased at 8 months of age, compared with those at 2 months of age. The current findings suggest that the expansion of the distal epididymal fat of mouse during postnatal period would be companied with differential expression of various adipocyte-associated molecules.
본 논문에서 돈혈을 사용한 순대와 돈혈을 혈장과 난백으로 대체한 순대의 성분 분석을 실시한 결과는 다음과 같다. (1) 돈혈을 15% 첨가한 순대의 일반성분은 수분 66.1%, 단백질 9.2%, 지방 10.4%, 회분 0.9%, 섬유소 0.5%, 탄수화물 12.7%였으며 Atwater계수로 환산한 총 칼로리는 181.92kcal/100g였다. 그러나 순대에 혈장을 대체함에 따라 163.78kcal/g으로 총 칼로리의 감소 효과를 나타냈으며 난백 첨가에 따라 총 칼로리가 230.77kcal/g으로 증가하였다. (2) 무기질은 돈혈 첨가 순대에서 Fe 함량이 8.50 mg%으로 우수한 철분 함유 식품이었으며 돈혈장, 난백 대체 비율 증가에 따라 Fe, Na, K의 함량이 감소하는 경향을 보였다. 그러나 Ca, P, Mg 함량은 시료군에 따라 유의적인 차이가 없었다. (3) 순대에서의 아미노산은 glutamic acid, leucine, lysine, glycine, alanine의 함량이 많았고 methionine, cysteine의 함량이 적었다. (4) 지방산은 palmitic acid, stearic acid, oleic acid. linoleic acid가 전체 지방산의 89.5∼93.5%를 차지하였다. 순대에서 돈혈장과 난백의 대체는 불포화/포화지방 산비와 다가불포화/포화지방산 비를 증가시키는 바람직한 영향을 주었다. 콜레스테롤 함량은 control인 혈액순대가 66.6 mg이었으나 혈장과 난백을 대체함으로써 각각 25.7%, 36.9%의 콜레스테롤 함량 저하 효과를 보였다.
Goszczynski, Daniel Estanislao;Mazzucco, Juliana Papaleo;Ripoli, Maria Veronica;Villarreal, Edgardo Leopoldo;Rogberg-Munoz, Andres;Mezzadra, Carlos Alberto;Melucci, Lilia Magdalena;Giovambattista, Guillermo
Journal of Animal Science and Technology
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제58권4호
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pp.14.1-14.9
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2016
Background: Peroxisome proliferator-activated receptor gamma (PPARG), CCAAT/enhancer binding protein alpha (CEBPA) and retinoid X receptor alpha (RXRA) are nuclear transcription factors that play important roles in regulation of adipogenesis and fat deposition. The objectives of this study were to characterise the variability of these three candidate genes in a mixed sample panel composed of several cattle breeds with different meat quality, validate single nucleotide polymorphisms (SNPs) in a local crossbred population (Angus - Hereford - Limousin) and evaluate their effects on meat quality traits (backfat thickness, intramuscular fat content and fatty acid composition), supporting the association tests with bioinformatic predictive studies. Results: Globally, nine SNPs were detected in the PPARG and CEBPA genes within our mixed panel, including a novel SNP in the latter. Three of these nine, along with seven other SNPs selected from the Single Nucleotide Polymorphism database (SNPdb), including SNPs in the RXRA gene, were validated in the crossbred population (N = 260). After validation, five of these SNPs were evaluated for genotype effects on fatty acid content and composition. Significant effects were observed on backfat thickness and different fatty acid contents (P < 0.05). Some of these SNPs caused slight differences in mRNA structure stability and/or putative binding sites for proteins. Conclusions: PPARG and CEBPA showed low to moderate variability in our sample panel. Variations in these genes, along with RXRA, may explain part of the genetic variation in fat content and composition. Our results may contribute to knowledge about genetic variation in meat quality traits in cattle and should be evaluated in larger independent populations.
Inductive expression of early growth response 1 (Egr-1) in neurons is associated with many forms of neuronal activity. However, only a few Egr-1 target genes are known in the brain. The results of this study demonstrate that Egr-1 knockout (KO) mice display impaired contextual extinction learning and normal fear acquisition relative to wild-type (WT) control animals. Genome-wide microarray experiments revealed 368 differentially expressed genes in the hippocampus of Egr-1 WT exposed to different phases of a fear conditioning paradigm compared to gene expression profiles in the hippocampus of KO mice. Some of genes, such as serotonin receptor 2C (Htr2c), neuropeptide B (Npb), neuronal PAS domain protein 4 (Npas4), NPY receptor Y1 (Npy1r), fatty acid binding protein 7 (Fabp7), and neuropeptide Y (Npy) are known to regulate processing of fearful memories, and promoter analyses demonstrated that several of these genes contained Egr-1 binding sites. This study provides a useful list of potential Egr-1 target genes which may be regulated during fear memory processing.
Objectives : In this study, we investigated the biological activities such as anti-obesity using Samwondan ethanol extract (SWD). SWD is a complex with Salicornia herbacea Linnaeus, Saururus chinensis Baill and Houttuynia cordata Thunberg as the main raw material.Methods : The SWD was extracted 80% ethanol. 3T3-L1 preadipocytes were induced adipogenesis by differentiation media with SWD at 1 μg/mL, 10 μg/mL, and 100 μg/mL. Effect of SWD performed using MTT assay, oil red O staining (observation by microscope), and reverse transcription polymerase chain reaction. Also we measured production of triglyceride (TG), fatty acid, and acetyl-CoA carboxylase (ACC).Results : Non-cytotoxicity was in all test group from range of 1 μg/mL to 100 μg/mL on pre-adipocyte. The droplet and production of lipid were decreased significantly by the SWD. And TG was decreased by approximately 89%, 85% and 82%, upon the SWD treatment at concentration of 1 μg/mL, 10 μg/mL, and 100 μg/mL. Moreover, the SWD showed inhibitory effects on the expression of the C/EBP (CCAAT/enhaner binding protein)β, C/EBPα, and peroxisome proliferator-activated receptorγgenes in adipocytes. The SWD at 100 μg/mL concentration showed inhibitory effect on fatty acid production by 79%. Also ACC production were decreased dose-dependently.Conclusions : From the results above, we concluded that the SWD indicated significantly anti-obesity effects.
Propyl gallate (PG) used as an additive in various foods has antioxidant and anti-inflammatory effects. Although the functional roles of PG in various cell types are well characterized, it is unknown whether PG has effect on stem cell differentiation. In this study, we demonstrated that PG could inhibit adipogenic differentiation in human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (hAMSCs) by decreasing the accumulation of intracellular lipid droplets. In addition, PG significantly reduced the expression of adipocyte-specific markers including peroxisome proliferator-activated receptor-${\gamma}$ (PPAR-${\gamma}$), CCAAT enhancer binding protein-${\alpha}$ (C/EBP-${\alpha}$), lipoprotein lipase (LPL), and adipocyte fatty acid-binding protein 2 (aP2). PG inhibited adipogenesis in hAMSCs through extracellular regulated kinase (ERK) pathway. Decreased adipogenesis following PG treatment was recovered in response to ERK blocking. Taken together, these results suggest a novel effect of PG on adipocyte differentiation in hAMSCs, supporting a negative role of ERK1/2 pathway in adipogenic differentiation.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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