Objectives : This study was undertaken to investigate the effects of the GGEx18 ethyl acetate fraction (EF) on lipid accumulation and gene expression of fatty acid-oxidizing enzymes using 3T3-L1 adipocytes, C2C12 skeletal muscle cells, and NMu2Li liver cells. Methods : PPAR${\alpha}$, AMPK and UCPs transactivation was examined in NMu2Li hepatocytes, C2C12 myocytes, and 3T3-L1 preadipocytes using transient transfection assays. Results : 1. Compared with control, EF significantly increased the mRNA expression of VLCAD in 3T3-L1 adipocytes. 2. Compared with control, EF (0.1 ${\mu}g/ml$) significantly inhibited lipid accumulation in 3T3-L1 adipocytes. 3. EF significantly increased the mRNA expression of AMPK${\alpha}$1, AMPK${\alpha}$2 and PPAR${\alpha}$ in C2C12 skeletal muscle cells compared with control. 4. EF significantly increased the mRNA expression of genes involved in fatty acid ${\beta}$-oxidation, such as thiolase, MCAD, and CPT-1 in C2C12 skeletal muscle cells compared with control. 5. EF significantly increased the mRNA expression of UCP2 involved in energy expenditure in C2C12 skeletal muscle cells compared with control. 6. Compared with control, EF (10 ${\mu}g/ml$) significantly inhibited lipid accumulation in C2C12 skeletal muscle cells. 7. EF (10 ${\mu}g/ml$) significantly increased the mRNA expression of ACOX, HD, VLCAD and MCAD in NMu2Li liver cells compared with control. Conclusions : These results suggest that EF may prevent obesity by increasing the mRNA expression of mitochondrial fatty acid ${\beta}$-oxidizing enzymes in 3T3-L1 adipocytes, by not only regulating the fatty acid oxidation through activation of AMPK and PPAR${\alpha}$, but also increasing the UCP2 mRNA expression in C2C12 skeletal muscle cells, and by stimulating the mRNA expression of fatty acid-oxidizing enzymes in NMu2Li liver cells.
Antimicrobial activities were assayed through the hot-water extracts from 41 species of medicinal plants against Helicobacter pylori which is known as the ulcerogenic phathogen. Opuntia ficus-indica, Houttuynia cordata, Sinomenium acutum, and Coptis japonica showed the MIC at the concentrations less than 100 ppm, Pulsatilla koreana, Forsythia koreana, Rheum undulatum, and Perilla frutescens less than 200 ppm, Belamcanda chinensis, Arctium lappa, Cassia tora, Citrus tachibana, Siegesbeckia orientalis, and Caesalpinia sappan less than 300 ppm by the 2-fold dilution method. In disc method only three of them were confirmed to have antimicrobial activities which were increased in the order Perilla frutescens, Coptis japonica, Caesalpinia sappan. Three extracts were partitioned with chloroform, ethyl acetate and butanol in sequence and examined for the activity to inhibit H. pylori. The major ativities were observed in ethyl acetate fraction of Caesalpinia sappan, butanol fraction of Perilla frutescens, butanol and chloroform fraction of Coptis japonica. The partitioned fractions were found to have increased antimicrobial activities in all extracts. The experiments in which the extracts were added into urea R broth containing the crude urease derived from H. pylori resulted in the increase of pH and optical density at 560 nm to 8.15 and 1.7 respectively. Urease activity of H. pylori was inhibited over 80% by Caesalpinia sappan, Perilla frutescens, and Coptis japonica, of which Caesalpinia sappan suppressed up to 95%.
Journal of the Society of Cosmetic Scientists of Korea
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v.42
no.3
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pp.257-268
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2016
The functions of anti-oxidation and anti-inflammation were investigated with the crude 80% methanol extract, subfractions and henryin isolated from Isodon inflexus (Thunb.) Kudo (I. inflexus (Thunb.) Kudo). Antioxidative ability was evaluated by bioassays using 2, 2-diphenyl-1-1-picrydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity, xanthine oxidase inhibition, and superoxide radical scavenging effects. Ethyl acetate and butanol fractions exhibited free radical scavenging activity on superoxide with $IC_{50}$ values of $0.9{\mu}g/mL$, $0.2{\mu}g/mL$, respectively, which were stronger activity than that of allopurinol ($2.2{\mu}g/mL$) as reference. For the inhibition of anti-inflammatory activity in RAW 264.7 cell, the ethyl acetate fraction showed strong inhibition activity NO production, and henryin isolated from its subfraction reduced the activity in a dose-dependent manner. Ethyl acetate fraction and henryin suppressed not only mRNA expression of iNOS and COX-2, but also the mRNA expression of pre-inflammatory cytokines such as, TNF-${\alpha}$, 1L-$1{\beta}$, IL-6, in a dose-dependent manner. These results suggested that ethyl acetate fraction of I. inflexus (Thunb.) Kudo has considerable potential as a cosmetics ingredient with an antioxidant and anti-inflammatory effects and henryin can be applied as an functional reference.
Tyrosinase is a key enzyme to control the biosynthesis of melanin pigments and has two enzyme activities, namely of 1-tyrosine hydroxylase and of 1-dopa oxidase. Thus, tyrosinase is regarded as a target in skin-whitening and therapeutic intervention of local hyperpigmentation diseases. We have tested tyrosinase inhibitory activity on the water extracts of 50 species oriental medicinal plant. Among them, five medicinal plants, Linderae Radix, Clematidis Radix, Cinnamomi Cortex Spissus, Fritillariae Thunbergii Bulbus and Bulbus Fritillariae Cirrhosae were investigated strong inhibition effect. Five medicinal plants were fractionated using organic solvents (methylene chloride, ethyl acetate, n-butanol, water). Cinnamomi Cortex Spissus (ethyl acetate fraction) was investigated strong inhibition effect. Tyrosinase inhibitory activity below $IC_{50}\;40{\mu}g/ml$ is confirmed in five herbal plants that are Linderae Radix, Clematidis Radix, Cinnamomi Cortex Spissus, Fritillariae Thunbergii Bulbus and Bulbus Fritillariae Cirrhosae. Tyrosinase inhibitory levels ($IC_{50}\;{\mu}g/ml$) of each plants were 15.56, 35.02, 25.14, 15.20 and 39.77. We also investigate the effect of effective plant's fraction. in dose of $100{\mu}g/ml$, Cinnamomi Cortex Spissus (P-36) EtOAc fraction significant inhibitory effect over 50%. Clematidis Radix (P-35) and Cinnamomi Cortex Spissus (P-36) MC fraction inhibit tyrosinase each 36.60% and 43.21%. inhibitory rates of Fritillariae Thunbergii Bulbus (P-40) EtOAc and $H_2O$ fraction are 31.40% and 31.51%. Bulbus Fritillariae Cirrhosae (P-45) BuOH fraction regulate tyrosinase activity to 37.71%. We examined tyrosinase inhibitory activity of natural products and these results suggest that several herbs have potential as a new whitening material.
Kim, Junseong;Lakmal, H.H. Chaminda;Lee, Ji-Hyeok;Lee, WonWoo;Jeon, You-Jin
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.47
no.6
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pp.770-775
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2014
The green microalga of the genus Nannochloropsis (class Eustigmatophyceae) is a leading candidate for biofuel production due to its ability to accumulate high oil content (28.7% of cellular ash-free dry weight). We investigated the anti-inflammatory and anticancer activities of sterol-rich fraction from nannochloropsis oculata n-hexane (NOH) extract after saponification of the microalga. Among the fractions with n-hexane, chloroform and ethyl acetate, the n-hexane fraction showed the highest anti-inflammatory activity in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophage as well as anticancer activity against human leukemia HL-60 cells without the cytotoxity. And the sterol-rich fraction was obtained from the n-hexane fraction by open silica column under the gradient solvent condition with 100% hexane (1L), hexane : ethyl acetate (20 : 1, 10 : 1, 5 : 1, 1 : 1, v/v). Among the four fractions (NOH-1~4), especially NOH-1 contained the highest content of sterols. NOH1 showed the highest HL-60 (about 85%) and NO inhibitory activities at the concentration of $100{\mu}g/mL$. These results demonstrated that the sterol-rich fraction from N. oculata might be a useful candidate as anti-inflammatory and anticancer agents for anti-inflammatory and anticancer activity.
This study was conducted to investigate the anti-oxidative, anti-oxidative and tyrosinase inhibitory effects of MeOH 80% extract and hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and aqueous fraction on three kinds of compositae plants in Korea. In the antimicrobial effect, the extract and chloroform fraction of Eclipta prostrata and hexane fraction of Carpesium abrotanoides L. and chloroform fraction of Siegesbeckia glabrescens exhibited significant inhibition. The antioxidant activity of ethyl acetate and butanol fractions was more than 90% in all three plants. In case of tyrosinase activity, showed a potent inhibition ethlyacetate fraction of Siegesbeckia glabrescens and Carpesium abrotanoides L, which were higher than control group. In MeOH 80% extracts, there was not found to have antimicrobial, anti-oxidant and tyrosinase inhibitory activity, however there was ethylacetate fraction of Siegesbeckia glabrescens to show effectss commonly in the three assay system.
This study was performed to evaluate the antioxidant and antimicrobial activity of methanol extract from Rosmarinus officinalis L. and its fractions. The ethyl acetate fraction of rosemary had a higher antioxidant activity in both DPPH ($3.22\;{\mu}g/ml$) and ABTS ($5.05\;{\mu}g/ml$) compared to other extracts and fractions. Based on the results of the FRAP assay, the ethyl acetate fraction of rosemary showed a value of $5.9{\pm}0.3\;{\mu}M/{\mu}g$, and buthanol fraction and rosmarinic acid exhibited values of $4.8{\pm}0.2\;{\mu}M/{\mu}g$ and $5.1{\pm}0.1\;{\mu}M/{\mu}M$, respectively. Measurements of the antimicrobial activities of the extracts, fraction against gram positive, negative bacteria revealed that the methanol extract, hexane, ethyl acetate, and chloroform fraction of rosemary caused Staphylococcus aureus and Escherichia coli to form clear zones greater than 12 mm. Furthermore, the methanol extract and chloroform fraction showed high antibacterial activity, with inhibition zone exceeding 13 mm. The methanol extract and chloroform fraction of rosemary had broad antimicrobial spectrums and low MIC values. Therefore, methanol extracts of rosemary could serve as potential antibacterial agents to inhibit pathogen growth in food and hand sanitizers.
Hyun, Ju Mi;Park, Kyung Jin;Kim, Sang Suk;Park, Suk Man;Lee, Young Jae;An, Hyun Joo
Journal of Life Science
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v.25
no.10
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pp.1132-1138
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2015
This study investigated the anti-oxidative and anti-inflammatory activity of unripe fruit peel solvent fractions of the native jeju citrus ‘Hongkyool’ (Citrus tachibana Tanaka) and ‘Pyunkyool’ (C. tangerina Hort. ex Tanaka). The total polyphenol content and total flavonoid content were highest in the butanol fraction of both ‘Hongkyool’ (534.4 mg/g, 431.8 mg/g) and ‘Pyunkyool’ (342.9 mg/g, 415.7 mg/g). In both cultivars, the butanol fraction showed the strong antioxidant activity by DPPH radical scavenging and ABTS radical scavenging. The DPPH radical scavenging of the butanol fraction from ‘Hongkyool’ and ‘Pyunkyool’ was 89% and 64% at a concentration of 1 mg/ml, respectively. The ABTS radical scavenging of the butanol fraction from ‘Hongkyool’ and ‘Pyunkyool‘ was 94% and 85% at a concentration of 1 mg/ml, respectively. We investigated the effect of the anti-inflammatory activity of the ethyl acetate fraction from ‘Hongkyool’ and ‘Pyunkyool’ on LPS-induced NO production, IL-6, iNOS, and COX-2 protein expression in Raw 264.7 cells. At concentrations of 50 and 100 μg/ml of the ‘Hongkyool’ ethyl acetate fraction, the anti-inflammatory effect was excellent. These results suggest that ethyl acetate and butanol fractions from ‘Hongkyool’ and ‘Pyunkyool’ could be useful functional materials, with anti-oxidative and anti-inflammatory properties.
The antioxidant and anti-inflammatory effects of active ingredients in cosmetics are very important. The effects are closely related to the prevention of skin aging. Among medicinal plants, Bletilla striata Reichenbach fil. has well-known pharmacological activity. Extracted samples were prepared using sequential fractionation of ethyl acetate, butanol, and water. The antioxidant effect of the fractions was confirmed by DPPH and ABTS+ radical scavenging. Among the various fractions of B. striata Reichenbach fil., ethyl acetate was associated with a reduction in nitric oxide production, which was induced by LPS (lipopolysaccharide) treatment in a dose-dependent manner. In addition, the production of iNOS (inducible nitric oxide synthase) and COX-2 (cyclooxygenase-2), which are upstream regulators of nitric oxide production, was also inhibited. Thus, the ethyl acetate fraction of B. striata Reichenbach fil. appears to be a potential active ingredient for use in cosmetics.
Objectives: It is reported that tumor-associated macrophages (TAMs) contribute to cancer progression by promoting tumor growth and metastasis. The purpose of this study is to investigate the effect of different fractions of Adenophora triphylla var. japonica (AT) on the polarization of macrophages into the M2 phenotype, a major phenotype of TAMs. Methods: We isolated hexane, ethyl acetate, and butanol fractions from crude ethanol extract of AT. The cytotoxicity of AT in RAW264.7 cells was examined by 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay. RAW264.7 cells were polarized into the M2 phenotype by treatment with interleukin (IL)-4 and IL-13. The expression of M2 macrophage marker genes was detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The phosphorylation level of signal transducer and activator of transcription 6 (STAT6) was investigated by western blot analysis. The migration of Lewis lung carcinoma (LLC) cells was examined by transwell migration assay using conditioned media (CM) collected from RAW264.7 cells as a chemoattractant. Results: Among various fractions of AT, the ethyl acetate fraction of AT (EAT) showed the most significant suppressive effect on the mRNA expression of M2 macrophage markers, including arginase-1, interleukin (IL)-10 and mannose receptor C type 1 (MRC-1), up-regulated by treatment of IL-4 and IL-13. In addition, EAT suppressed the phosphorylation of STAT6, a critical regulator of IL-4 and IL-13-induced M2 macrophage polarization. Finally, the increased migration of Lewis lung carcinoma (LLC) cells by CM from M2-polarized RAW264.7 cells was reduced by CM from RAW264.7 cells co-treated with EAT and M2 polarization inducers. Conclusion: We demonstrated that EAT attenuated cancer cell migration through suppression of macrophage polarization toward the M2 phenotype. Additional preclinical or clinical researches are needed to evaluate its regulatory effects on macrophage polarization and anti-cancer activities.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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