Gummy stem blight caused by Didymella bryoniae occurs exclusively in cucurbits. This fungus has been known not to produce its pycnidium in vitro unless irradiated. In this study, cultural conditions for the mass-production of pycnidiospore by Metal Halide (MH) lamp irradiation were maximized. The mycelia were cultured at $26^{\circ}C$ on PDA for 2 days under dark condition, and then the plate was illuminated with MH lamp continuously for 3-4 days at $26^{\circ}C$. Results show that a great number of pycnidia were simultaneously formed. The pycnidiospores produced were then used as immunogen. Fusions of myeloma cell (v-653) with splenocytes from immunized mice were carried out. Two hybridoma cell lines that recognized the immunogen D. bryoniae were obtained. One monoclonal antibody (MAb), Dbl, recognized the supernatant while another MAb, Db15, recognized the spore. Two clones were selected which were used to produce ascite fluid of the two MAb, Dbl and Db15, the immunotypes of which were identified as IgG1 and IgG2b, respectively. Titers of MAb Dbl and MAb Db15 were measured and the absorbance exceeded 0.5 even at a $10^{-5}$ dilution. The MAbs reacted positively with D. bryoniae but none reacted with other viral isolates, Cucumber mosaic virus and Cucumber green mottle mosaic virus. Sensitivity of MAb was precise enough to detect spore concentration as low as $10^{-3}$/well by indirect ELISA. Characterization of the MAbs Dbl, Db15 antigen by heat and protease treatments, which suggests that the epitope recognized by these two MAbs was glycoprotein.
Many lichens have been used as bioindicators for air pollutants such as $SO_2$. The first ecological study on lichens in Korea was conducted in 1975 by Kim and Lee, disclosing that areas adjacent to the center of Seoul were lichen deserts. Air quality in Seoul has improved significantly since the 1980s. However, the distribution of lichen species has not been reevaluated since then. We examined the spatial and temporal pattern of lichen distribution by selecting six (inner city green [ICG] and four (outer city green [OCG]) sites, based on the distance from the city center of Seoul and the land use pattern. The change in lichen distribution was related to yearly mean concentrations of $SO_2$, $NO_2$, and $O_3$ for the years 1980-2009. Four and 13 lichen species were found in ICGs and OCGs, respectively. Although mean sample numbers per species were much higher in the former, species richness tended to increase with distance from the city center. Since 1980, $SO_2$ has declined drastically to < 0.01 ppm in both ICGs and OCGs, indicating that $SO_2$ is no longer a limiting factor for lichen establishment and growth. In contrast, $NO_2$ has increased steadily for 20 years (1989-2009) and a considerable proportion of lichen species in both ICGs and OCGs are known as nitrophilic or pollution-tolerant species. Appearance of nitrophiles in both ICGs and OCGs and the dominance of a few lichen species in ICGs may reflect the effects of the increase in $NO_2$. In contrast to $SO_2$ and $NO_2$, $O_3$ was higher in OCGs, but it was difficult to identify a causal relationship between $O_3$ and lichen distribution.
Philip Robinson, J.;Jyoti, Prasad Kakati;Sebastinraj, J.;Suriya, K
Journal of Plant Biotechnology
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제44권3호
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pp.343-348
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2017
Cymbidium aloifolium (L). Sw. is an exquisite epiphytic orchid of the Kolli Hills (Eastern Ghats) of Tamil Nadu in Southern India. It is fast disappearing from its natural habitats due to deforestation and low germination rate in natural habitat. In the present study, an attempt was made to germinate the seeds from un-dehisced capsule of Cymbidium aloifolium (L). Sw under in vitro condition. The seed germination and protocorm development were recorded in three different well known media namely Knudson C (KC), Half strength Murashige & Skoog (1/2 MS) and Vacin & Went (VW) media. The highest seed germination of 90% was observed KC basal media after $30^{th}$ days whereas germination percentages were 40% and 30% on 1/2 MS and VW media respectively. The well-developed protocorm were transferred to KC media supplemented with 6-Benzyl Amino Purine (BAP) and Naphthalene acetic acid (NAA) where BAP (1.0 mg/l) and NAA (1.0 mg/l) together were found to be optimum for the highest shoot formation. About 90% of the shoots found to be well rooted after transfer to the KC medium differently supplemented with 1.5 mg/l Indole-3-acetic acid (IAA) and 1.0 mg/l Indole-3-butyric acid (IBA). Though rooting also took place in the two basic media but the duration was longer when compared with the hormone-supplemented media. The rooted plantlets were hardened and kept under greenhouse conditions which can be relocated in natural habitats.
Gonzalez-Perez, C.J.;Vargas-Arispuro, I.;Aispuro-Hernandez, E.;Aguilar-Gil, C.L.;Aguirre-Guzman, Y.E.;Castillo, A.;Hernandez-Mendoza, A.;Ayala-Zavala, J.F.;Martinez-Tellez, M.A.
한국미생물·생명공학회지
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제47권2호
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pp.183-194
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2019
The consumption of fresh vegetables has been related to recurrent outbreaks of foodborne diseases (FBD) worldwide. Therefore, the development of effective alternative technologies is necessary to improve the safety of these products. This study aimed to isolate and identify epiphytic lactic acid bacteria (LAB) from fresh fruits and leafy vegetables and characterize their antagonistic capacity due to their ability to produce bacteriocins or antibacterial compounds. For this, 92 LAB isolates from fruits and leafy vegetables were screened for antagonistic activity. Two strains with the highest and broadest antagonistic activities were selected for further characterization; one from cantaloupe melon (strain CM175) and one from cilantro leaves (strain C15). The cell-free supernatants (CFS) of CM175 and C15 were found to exhibit antagonistic activity against FBD-causing pathogens. The CM175 and C15 strains were identified as Pediococcus pentosaceus and Lactobacillus graminis, respectively. Notably, the P. pentosaceus CM175 CFS stopped the growth of Salmonella Typhimurium, Salmonella Saintpaul, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytogenes, and delayed Escherichia coli O157:H7 growth. Moreover, L. graminis C15 CFS delayed the growth of all indicator pathogens, but did not completely stop it. Organic acids and bacteriocin-like molecules were determined to be possibly exerting the observed antagonistic activity of the identified LAB strains. Thus, application of the antagonistic compounds produced by Pediococcus pentosaceus and Lactobacillus graminis could be a novel and ecological strategy in developing antimicrobial biopreservatives for the food industry and mitigating FBD by reducing the biological contamination in fruit and vegetable orchards, mainly via their potential in controlling both gram-negative and gram-positive pathogenic bacteria.
This study evaluated the species composition, diversity and phorophyte preference of epiphytes at the University of Port Harcourt located in southern part of Nigeria. Purposive sampling technique was used to select sites representing major avenues in the three campuses (Abuja, Choba and Delta) of the University. Data were collected on species name of phorophytes, number of individuals, diameter at breast height (dbh) and height, and species/number of epiphytes present on them. The points/sections of attachment of epiphytes on phorophytes were also recorded. A total of eight species of epiphyte belonging to six families were recorded in the study. Species diversity was higher in Abuja campus (Simpson 1-D=0.81; Shannon H=1.79), followed by Choba campus (Simpson 1-D=0.73; Shannon H=1.09) and Delta campus (Simpson 1-D=0.56; Shannon H=0.93). Species richness was highest in Abuja campus (n=8) followed by Delta campus (n=4) and Choba campus (n=3). Similarity in epiphyte species composition was highest between Choba and Delta campuses (85.71%), followed by Delta and Abuja campuses (66.67%) and lowest between Choba and Abuja campuses (54.55%). The family-Polypodiaceae, had the highest number of species (n=3). Microgramma owariensis had the highest relative abundance (27%) followed by Platycerium bifurcatum (26%) while Tillandsia utriculata and Peperomia pellucida had the least relative abundance (3%). Epiphyte abundance was weakly correlated with both the dbh and height of phorophytes. However, epiphytes were more abundant on phorophytes with rough/scaly/corky/flaky barks than on those with smooth barks. The planting of avenue tree species with rough barks is recommended to enhance the diversity of epiphytes in the study area.
Luo, Zhaohe;Wang, Na;Mohamed, Hala F.;Liang, Ye;Pei, Lulu;Huang, Shuhong;Gu, Haifeng
ALGAE
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제36권4호
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pp.241-261
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2021
Amphidinium species are amongst the most abundant benthic dinoflagellates in marine intertidal sandy ecosystems. Some of them produce a variety of bioactive compounds that have both harmful effects and pharmaceutical potential. In this study, Amphidinium cells were isolated from intertidal sand collected from the East China Sea. The two strains established were subjected to detailed examination by light, and scanning and transmission electron microscopy. The vegetative cells had a minute, irregular, and triangular-shaped epicone deflected to the left, thus fitting the description of Amphidinium sensu stricto. These strains are distinguished from other Amphidinium species by combination characteristics: (1) longitudinal flagellum inserted in the lower third of the cell; (2) icicle-shaped scales, 276 ± 17 nm in length, on the cell body surface; (3) asymmetrical hypocone with the left side longer than the right; and (4) presence of immotile cells. Therefore, they are described here as Amphidinium stirisquamtum sp. nov. The molecular tree inferred from small subunit rRNA, large subunit rRNA, and internal transcribed spacer-5.8S sequences revealed that A. stirisquamtum is grouped together with the type species of Amphidinium, A. operculatum, in a fully supported clade, but is distantly related to other Amphidinium species bearing body scale. Live A.stirisquamtum cells greatly affected the survival of rotifers and brine shrimp, their primary grazers, making them more susceptible to predation by the higher tropic level consumers in the food web. This will increase the risk of introducing toxicity, and consequently, the bioaccumulation of toxins through marine food webs.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제4권2호
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pp.127-131
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2002
The qualitative and quantitative changes of bacterial flora associated with the Pure Mysore (Multivoltine) and NB$_4$D$_2$ (Bivoltine) silkworm (Bombyx modi L.) midgut during third, fourth and fifth instars were studied. Larvae reared on mulberry leaves were dissected and their midgut bacterial populations were enumerated through serial dilution technique and after 72 hrs of incubation period at 28 $\pm$ 1$^{\circ}C$, the bacterial population was estimated. The results showed a highest mean value of 15$\times$10/ sup 6/ sup 6/ CFU/g and 28$\times$10/ sup 6/ CFU/g in Pure Mysore and NB$_4$D$_2$races, respectively, in midgut tissue of fifth instar larvae. The natural epiphytic microflora of mulberry leaves fed during the respective instars was also studied and found maximum 14$\times$10$^3$ CFU/g in leaves fed in third instars, followed by 5.3$\times$10$^3$ CFU/g and 2.1$\times$10$^3$ CFU/g in leaves fed during fourth and fifth instars, respectively. The bacterial flora colonized in midgut was found to be elaborating amylase, caseinase, gelatinase, lipase and urease enzymes. The highest percentages of isolates were amylase producers followed by protein and lipid splitters in Pure Mysore, whereas in NB$_4$D$_2$ protein splitter were dominated followed by lipase and amylase producers in NB$_4$D$_2$. The results indicate that the natural microflora may play a vital role in the digestion of ingested food materials in silkworms.
This study aimed to evaluate the effects of silage additives on the fermentation qualities and residual mono- and disaccharides composition of silages. Forage Oats (Avena sativa L.) and Italian Ryegrass (Lolium multiflorum Lam.) were ensiled with glucose, sorbic acid and pre-fermented juice of epiphytic lactic acid bacteria (FJLB) treatments for 30 days. In both species grass silages, although the respective controls had higher contents of butyric acid (20.86, 33.45g $kg^{-1}$ DM) and ammonia-N/total nitrogen (100.07, 114.91 g $kg^{-1}$) as compared with other treated silages in forage oats and Italian ryegrass, the fermentation was clearly dominated by lactic acid bacteria. This was well indicated by the low pH value (4.27, 4.38), and high lactic acid/acetic acid (6.53, 5.58) and lactic acid content (61.67, 46.85 g $kg^{-1}$ DM). Glucose addition increased significantly (p<0.05) lactic acid/acetic acid, and significantly (p<0.05) decreased the values of pH and ammonia-N/total nitrogen, and the contents of butyric acid and volatile fatty acids as compared with control, however, there was a slightly but significantly (p<0.05) higher butyric acid and lower residual mono- and di-saccharides as compared with sorbic acid and FJLB additions. Sorbic acid addition showed the lowest ethanol, acetic acid and ammonia-N/total nitrogen, and highest contents of residual fructose, total mono- and di-saccharides and dry matter as well as high lactic acid/acetic acid and lactic acid content. FJLB addition had the lowest pH value and the highest lactic acid content, the most intensive lactic acid fermentation occurring in FJLB treated silages. This resulted in the faster accumulation of lactic acid and faster pH reduction. Sorbic acid and FJLB additions depressed clostridia or other undesirable bacterial fermentation, thus this decreased the water-soluble carbohydrates loss and saved the fermentable substrate for lactic acid fermentation.
1990년 2월부터 12월에 걸쳐 목포 인근수역에서 김 양식장 주변해수에 분포하는 종속영양 세균의 계절적 속조성의 변화를 미생물 생태학적 측면에서 조사하였다. 조사기간 중 해수에 나타난 종속영양 세균의 년중 분포는 $1.05\times10^2-1.46\times10^5$\;cfu/ml$ 에서 변화하였으며, 생리적 특성세균의 년중 분포는 단백질 분해세균의 경우, $5.0\times10-4.34\times10^4\;cfu/ml,$ 지방 분해세균은 $0-1.35\times10^4\;cfu/ml,$ 전분 분해세균은 $0-1.2\times10^4\;cfu/ml,$ 의 범주에서 분포하였다. 주변해수에서 분포하는 종속영양 세균의 특성을 조사한 결과, 간균이 $65\%$를 차지하였고, $76.7\%$가 그람 음성으로 나타났다. 분리된 균주의 대부분은 중온성이었으며, 다양한 탄소원을 이용할 수 있었고, 염분내성범위가 넓었다. 또한 우점속은 2월에는 Flavobacterium spp., 3월에는 Acinetobacter spp., Moraxella spp., 7월에는 Vibrio spp., Chromobacterium spp., Micrococcus spp., Bacillus spp., 11월에는 Chromobacterium spp., Micrococcus spp., Bacillus spp. 등이 출현하여 조사시기와 조사정점에 따라 우점속의 차이를 보였다.
1990년 2월부터 12월에 걸쳐 곡포 인근수역에서 김 엽체를 채취하여 김 엽체에 부착된 종속영양 세균의 분포와 계절적 속조성의 변화를 미생물 생태학적 측면에서 조사 비교하였다. 김 엽체에 부착한 종속영양 세균의 년중 분포는 정점 1에서 $6.9\times10^2-1.04\times10^5\;cfu/cm^2$, 정점 2에서 $9.4\times10^3-2.93\times10^5\;cfu/cm^2$ 범주에서 변화하였으며, 조사기간 중 김 엽체에서 분리된 세균의 특성을 살펴보면 간균이 평균 $65\%$를, 그람음성이 $52.1-82.7\%$를 차지하였다. 분리된 균중 $68\%$는 3월에 전분분해능을 나타냈으나 전반적으로 탄소원의 이용은 빈약했으며 $H_2S$ 생성을 하지 않았다. 김 엽체에서 분리된 세균 중 우점속은. 3월의 경우 Alcaligenes spp., Moruella spp.가 우점속으로 나타났으며, 11월의 경우 Microcaccus spp., Moraxella spp., Corynebacterium spp.이 우점속으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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