• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제10권2호
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• pp.181-186
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• 2000

MAPI (microbial alkaline protease inhibitor) was isolated from cultrue broth of Streptomyces chromofuscus SMF28. The Ki values of MAPI for the representative serine proteases such as chymotrypsin and proteinase K were 0.28 and $0.63{\;}\mu\textrm{M}$, respectively, and for the cysteine proteases cathepsin B and papain were 0.66 and $0.28{\;}\mu\textrm{M}$, respectively. These data indicate that MAPI is not a potent selective inhibitor of serine or cysteine proteases. Progress curves for the inhibition of three proteases by MAPI exhibithe characteristic patterns; MAPI exhibited slow-binding inhibition of cathepsin B. It was rapidly associated with chymotrypsin before the addition of substrate and then reactivation of MAPI-inhibited enzyme was investigated in the presence of substrate. On the other hand, MAPI-proteinase K interaction was typical for those classical inhibitors. When MAPI was incubated with trypsin, there was an extensive reduction in the ingibitory activities of MAPI corresponding to 66.5% inactivation of MAPI, indicating that trypsin-like protease may play a role in the decrease of the inhibitory activity during cultivation.

• 한국식품과학회지
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• 제29권6호
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• pp.1269-1274
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• 1997

국내에서 재배된 Aloe vera에서 생리활성 물질인 acetylmannan을 분리 하고 그 제반의 특성을 규명하고 ACE저해효과 및 동력학적분석을 행한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 알로에 베라 3.5 Kg으로 부터 에탄올에 불용성 다당체를 수득, 백색의 분말형태인 0.9 g의 acetylmannan을 얻었다. 분리한 acetylmannan은 탄수화물 67%를 함유하고 있으며 만노오즈는 60% 소량의 글루코오즈와 갈락토오즈로 이루어져 있고 아세틸기는 23%를 함유하고 있으며 acetyl group은 IR 스펙트럼에서 $1746\;cm^{-1}$, $1244\;cm^{-1}$ peak으로서 확인하였다. 과요오드 산화법에서 과요오드 음이온 소비량이 포름산 생성량에 비해 많고, 1, 4 글리코사이드 결합으로 이루어져 있음을 확인하였다. 또한 ACE에 대한 $IC_{-50}$ 값은 0.58 mM 이였으며, competitive 저해형식을 나타내었고. Ki 값은 0.068 mM 이였다.

• 한국식품과학회지
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• 제25권5호
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• pp.456-460
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• 1993

전통 기호음료 성분에 의하여 나타나는 기능특성을 조사하기 위한 연구의 일환으로 결명자,들깨, 대추, 모과, 오미자, 오갈피 및 생강 추출물을 ion-exchange chromatography, 유기용매에 의한 분획, silica gel column chromatography, thin layer chromatography에 의하여 여러 가지 획분으로 분획하여 Angiotensin I 전환효소(ACE) 저해작용을 조사한 결과는 다음과 같다. 기호음료 원료에서 추출한 수용성 획분의 ACE 저해작용은 생강>오갈피>오미자>들깨>결명자>모과>대추의 순으로 나타났다. 일반 가정에서 널리 이용되고 있는 결명자에서 분리한 compound C 는 ACE 저해제로 알려져 있는 bradykinin에 비하여 ACE 저해작용이 비교적 낮았다.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제28권5호
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• pp.758-762
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• 2007

A new alkyldithiocarbonate (xanthate), as sodium salts, C2H5OCS2Na, was synthesized by the reaction between CS2 with ethyl alcohol in the presence of NaOH. The new xanthate was characterized by 1H NMR, IR and elemental analysis. Then, the new synthesized compound was examined for functional study of cresolase activity of Mushroom Tyrosinase (MT) from a commercial source of Agricus bisporus in 10 mM phosphate buffer pH 6.8, at three temperatures of 10, 20 and 33℃ using UV spectrophotemetry. 4-[(4-methylphenyl)- azo]-phenol (MePAPh) was used as a synthetic substrate for the enzyme for cresolase reaction. The results show that ethyl xanthate can activate or inhibit the cresolase activity of mushroom tyrosinase depending to the concentration of ethyl xanthate. It was concluded that the enzyme has two distinct sites for ethyl xanthate. The first one is a high-affinity activation site and the other is a low-affinity inhibition site. Activation of the enzyme in the low concentration of ethyl xanthate arises from increasing the affinity of binding for the substrate as well as increasing the enzyme catalytic constant. The affinity of ligand binding in the activation site is decreased by increasing of the temperature, which is the opposite result for the inhibition site. Hence, the nature of the interaction of ethyl xanthate is different in two distinct sites. The binding process for cresolase inhibition is only entropy driven, meanwhile the binding process for cresolase activation is not only entropy driven but also enthalpy driven means that hydrophobic interaction is more important in the inhibition site.

• 한국식품과학회지
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• 제32권2호
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• pp.448-453
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• 2000

천연물로부터 U937 세포주를 사용한 caspase-3 유도저해물질을 탐색한 결과 머위(Petasites japonicum)를 선발하였다. 머위의 메탄올 추출물로부터 Sephadex LH-20 column chromatography, HPLC 등을 사용하여 저해물질을 분리하였으며, UV, EIMS, 1H-NMR, $^{13}C-NMR$, HMBC등의 기기분석을 실시한 결과 [3-(3,4-dihydroxyphenyl)-2-oxopropyl] ester로 동정되었다. 이 물질은 $IC_{50}\;8\;{\mu}g/ml$의 농도로 U937 세포주의 etoposide에 의한 caspase 3 유도를 저해하였으며, DNA fragmentation도 저해하였다. 또한 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH) 라디칼 소거능을 나타내었다.

• 한국식품영양학회지
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• 제11권2호
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• pp.228-236
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• 1998

달걀의 Allergenicity를 감소시킬 수 있는 방안을 강구하고자 물리적 처리, 축합 인산염 처리 및 효소처리를 하여 Guinea pig를 이용한 Passive Cutaneous Anaphylaxis(PCA) inhibition 실험과 Non Proteic Nitrogen(NPN)정량을 통한 가수분해율의 측정결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 달걀의 allergenicity는 가열에 의해 감소하였으며 가열시간이 길수록 단백질 가수분해율 및 PCA inhibition을 증가 시켰다. Ultraviolet 조사와 Microwave 조사는 단백 가수분해율과 PCA inhibition을 증가 시켜서 allergenicity를 저하시켰으며 ultraviolet이 저해효과가 더 컸으며 부화 달걀은 allergenicity를 감소시키지 않은 것으로 나타났다. 효소처리는 단백질의 가수분해율 및 PCA inhibition을 증가 시키며 allergenicity를 현저히 감소시켰으며 alcalase의 재해효과가 더 컸다. Polyphosphate의 참가는 단백질의 가수분해는 유도하지 않았으나 PCA inhibition을 증가 시키며 allergenicity를 감소시켰다. Allergenicity를 감소시키기 위한 처리를 한 달걀 gel의 주사전자현미경 사진은 효소처리 시 표면이 밝게 나타나서 단백질이 분해되었음을 알 수 있었고 neutrase가 alcalase보다 밝게 나타났으나 반응시간의 증가에 따라 모든 효소 표면이 밝게 나타났다. Instron에서 달걀 gel의 경도를 측정한 결과 효소와의 반응시간이 길수록 경도가 감소하는 경향을 보였다.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제17권3호
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• pp.265-272
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• 2002

Enzyme-Inhibition방법으로 다성분 잔류 농약의 검출 기법을 개발하기 위해, 음용수 허용기준 설정 농약인 유기인계 농약으로 malathion, parathion, diazinon과 carbamate농약으로 carbary에 대한 acetylcholinesterase (AChE)과 cholinesterase (ChE) 활성저해 관계를 규명하였다. 병아리 뇌의 AChE와 ChE 활성도는 각각 166.6 및 5.8$\mu$mol/min/g protein이었고, 혈장에서는 각각 23.1$\mu$mol/min/g protein과 8.3 $\mu$mol/min/g protein 이었다. AChE와 ChE의 최적 PH는 각각 8.2및 7.8 이었다. Km은 0.034 및 0.045 mM 이었다. 유기인계농약에서 AChE와 ChE의 I$_{50}$ 값의 malathion이 55.82 및 99.42mg/L이었고, Parathion은 31.16및 29.13mg/L이었고, diazinon은 17.89 및 19.62 mg/L 이었다. Carbamate농약인 carbaryl의 AChE와 ChE의 I$_{50}$ 값의 0.10및 0.05mg/L이었다. 먹는 물 관리법에 의한 carbaryl의 먹는 물 허용 수질기준인 0.07mg /L을 AChE와 ChE의 I$_{50}$에서 검출할 수 있다. AChE및 ChE을 이용한 enzyme-inhibition(EI)법은 carbamate농약인 carbaryl을 먹는 물 허용 수질기준인 0.07mg/L가지 검출 할 수 있으므로, 다성분 잔류분석법 (MRM, Multiresidue Method)으로 이용할 수 있다. 따라서 Enzyme lnhibition방법을 이용하여 자연환경 중 carbamate계 농약을 쉽고 빠르게 검출할 수 있는 새로운 bioassay법으로 응용할 수 있다. 수 있다.

• Journal of Microbiology
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• 제34권3호
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• pp.270-273
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• 1996

Micrococcus luteus purine nucleoside phosphorylase (PNP) has been purified and characterized. The physical and kinetic properties have been described previously. Chemical modification of the enzyme was attempted to gain insight on the active site. The enzyme was inactivated in a time-dependent manner by the arginine- specific modifying reagent phenylglyoxal. There was a linear relationship between the observed rate of inactivation and the phenylglyoxal concentration. At 30 $^{\circ}C$ the bimolecular rate constant for the modification was 0.015 $min^{-1}mM^{-1}$ in 50 mM $NaHCO_3$ buffer, pH 7.5. The plot of logk versus log phenylglyoxal concentration was a strainght line with a slope value of 0.9, indicating that modification of one arginine residue was needed to inactivate the enzyme. Preincubation with saturated solutions of substrates protected the enzyme from inhibition of phenylglyoxal, indicating that reactions with phenylglyoxal were directed at arginyl residues essential for the catalytic functioning of the enzyme.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제30권1호
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• pp.1-18
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• 2022

Drug-drug interactions are a major cause of hospitalization and deaths related to drug use. A large fraction of these is due to inhibition of enzymes involved in drug metabolism and transport, particularly cytochrome P450 (P450) enzymes. Understanding basic mechanisms of enzyme inhibition is important, particularly in terms of reversibility and the use of the appropriate parameters. In addition to drug-drug interactions, issues have involved interactions of drugs with foods and natural products related to P450 enzymes. Predicting drug-drug interactions is a major effort in drug development in the pharmaceutical industry and regulatory agencies. With appropriate in vitro experiments, it is possible to stratify clinical drug-drug interaction studies. A better understanding of drug interactions and training of physicians and pharmacists has developed. Finally, some P450s have been the targets of drugs in some cancers and other disease states.

• 센서학회지
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• 제3권2호
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• pp.16-23
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• 1994

오염수에서 유기인 화합물을 측정하기 위해 개발된 광섬유 바이오센서의 신호의 분석과 최적설계를 위하여 센서에 사용되어진 AChE효소(acetylcholinesterase)의 반응, 반응기 내의 유체거동 및 물질전달현상의 해석이 필요하다. 사용되어진 센서의 반응기 부분을 해석하고 재설계하기 위하여 효소 반응을 연구하고, 이동현상학적으로 유체 및 물질확산 현상을 해석하여 반응기 모델을 성립하였다. 사용되어진 유기인 화합물에 의해 저해되는 AChE효소의 측정범위인 0-2 ppm 사이에서 저해반응을 실험하였으며, 비가역 저해 효소 반응식을 제안하였다. 반응기를 두상 즉 벌크상과 효소층으로 나누어 유체거동을 해석하였으며, 고정화겔 내의 확산의 영향을 조사하였다. 반응식, 유체거동식 및 확산식을 연계하여 세워진 반응기 전체모델을 제시하였고, 이를 이용하여 신호를 해석하였다. 제시된 모델을 이용하여 효소량, 효소층의 두께의 증가에 따른 센서 신호량의 민감도를 전산모사하였다.