This study was performed to investigate the immunogenicity of autogenous E coli vaccines and their preventive effects on diarrhea in suckling piglets. Autogenous E coli live and killed vaccines were made from the E coli strains isolated from piglets showing diarrhea in field. In group I, pregnant sows were administered with live and killed vaccines at 4 and 2 weeks before parturition, respectively, Killed vaccines were administered twice to pregnant sows at 4 and 2 weeks before parturition in group II, and saline instead of autogenous E coli vaccines was administered to pregnant sows in group III for the control. After parturition, antibody titers in colostrum and milk from sows, incidence of diarrhea in suckling piglets, and immunoreactivity in the ileum of piglets from each treatment group were examined. The results were as follows ; 1. Sixty-two strains of E coli were isolated from suckling piglets with diarrhea. Of the strains, K88 pilus and K99 pilus antigens were identified in 6(9.8%) and 4(6.5%), respectively. Molecular weights of K88 and K99 pilus were 27,500 and 18,500 daltons, respectively. 2. Antibody titers in colostrum from sows after parturition were 1 : 512 to 1 : 1,024 in group I, 1.256 to 1.512 in group II, and 1 : 4 to 1 : 16 in group III. 3. The incidences of diarrhea In suckling piglets of group I, II and III were 3.3%, 9.4% and 21.4%, respectively. 4. When the immunoreactivity in the ileum of piglets from each group was examined, the proportion of IgG-immunoreactivity cells in group I or II was higher than that in group III. In conclusion, administration of autogenous E coli vaccines to pregnant sows before parturition can be an effective way to prevent diarrhea in suckling piglets.
장독성대장균은 영유아설사 및 여행자설사의 주요한 원인균의 하나로서 이들이 생산하는 내열성장독소는 설사 유발 원인물질로 이들 생산균주는 비병원성 대장균과 비교하여 검정할 수 있다. 본 실험에서는 이러한 내열성장독소를 순수정제하였다. 저자들이 보고한 바 있는 형질전환균주 eKT-53을 사용하여 10L의 succinate salts 배지에 배양한 배양액을 30,000g로 원심분리하여 조 ST 용액을 사용하여 몇 단계의 정제과정을 통하여 정제하였다. 즉 Amberlite XAD-2 chromatography, DEAE-Sephacel anion exchange chromatography, Bio-Gel P-6 get filtration, Polyacrylamide slab gel 전기영동을 통하여 정제하고 장독소의 정제도 및 장독소의 생물학적 최소단위량을 조사하였다. 최종적으로 정제되어진 ST는 조 ST 용액에 비해 113배 더 정제되었고 회수율은 11%였다. 또한 생물학적 최소단위량이 2.8ng이였고 SDS-polyacrylamide disc gel상에서 단일 band를 나타내어 거의 순수정제된 것으로 보이며 면역을 위한 항원으로 이용할 수 있을 것으로 생각된다.
병원성 대장균군은 전세계적으로 식중독을 발생하는 중요한 병원균으로 알려져 있다. 국내 유통중인 생닭과 조리된 닭가공품 356시료에서 대장균 80균주(22.5%)를 분리하여 병원성 유전자 multiplex PCR를 이용하여 분석한 결과 astA 유전자가 26균주(32.5%)에서 검출되었으며, escV 유전자는 17균주(21.3%) eaeA 유전자는 16균주(20.0%) 검출되었다. 특히 식품에서 문제가 되는 장출혈성 대장균 유전자 stx 1는 3균주(3.8%)와 stx 2, EHEC-hly는 각 1균주(1.3%)에서 검출되었다. 병원성 유전자를 토대로 STEC, EPEC, EHEC, EIEC or EAEC의 병원성 대장균으로 분류한 결과 45균주(56.3%)가 검출되었으며 typical EPEC, EIEC and ETEC의 병원성 대장균은 검출되지 않았다. STEC 병원성 대장균은 O152, O1, O116, O26, O25, O119, O153 혈청형이 분리되었다. 특히 생닭에서 병원성 대장균에 대한 검출률이 높으므로 생닭을 가공 조리 시 교차 오염이 발생하기 않도록 조리 도구, 조리 환경에 대한 철저한 관리가 필요하다고 생각된다.
본 연구에서는 선택배지와 건조필름을 이용하여 신선편이 엽채류 3종(양상추, 양배추, 어린잎채소)에서 병원성 E. coli를 분리하였고, 의심집락 동정을 위해 생화학적 분석법을 사용하여 동정한 후 결과를 비교 분석하였다. 양상추 20 g, 양배추 20 g, 어린잎채소 10 g에 병원성 E. coli 혼합 균액(Enterohemorrhagic E. coli NCCP11142, Enterotoxigenic E. coli NCCP14037, Enteropathogenic E. coli NCCP14038, Enteroaggregative E. coli NCCP14039, Enteropathogenic E. coli NCCP15661)을 최종농도가 1, 2, 3 log CFU/g이 되도록 접종하였고, BPW (80~90 ml)을 넣은 후 60초 동안 균질화하여 분석하였다. 연구결과, 모든 시료에서 건조필름 시험 양성, 양상추 시료 일부(최종농도 3 log CFU/g 접종시료)를 제외한 모든 시료에서 증균배양법을 이용한 정성시험결과가 음성으로 나타났다. 증균배양과 건조필름 시험을 통해 분리한 병원성 E. coli를 이용하여 생화학적 분석을 실시한 결과, 양상추에서 분리한 병원성 E. coli의 경우, API 20E 100% (44/44), Microgen GNA 100% (44/44), Food System 66.7% (10/15)의 동정률이 나타났다. 양배추의 경우, API 20E 64.7% (22/34), Microgen GNA 50% (16/32), Food System 60% (9/15), 어린잎채소의 경우, API 20E 65.1% (28/43), Microgen GNA 62.3% (27/43), Food System 53.3% (8/15)가 병원성 E. coli로 동정되었다. 본 연구의 결과는 신선편이 엽채류에 대한 병원성 E. coli 검출법 선택에 유용하게 이용될 것으로 판단된다.
Diarrheal diseases are a major cause of both illness and death in developing countries and are caused by rotavirus, Shigella spp., Salmonella spp., enterotoxigenic Escherichia coli (ETEC), and Vibrio spp. In this study, for the development of vaccine against diarrheal diseases caused by Shigella sonei, Salmonella typhimurium, E. coli O157, and Vibrio cholerae, cloning and nucleotide sequence analysis of genes and characteristics of their gene products in E. coli were performed. For construction of attenuated strain of S. sonnei KNIH104 and Salmonella typhimurium KNIH100, the aroA genes were cloned, respectively. The recombinant plasmid $_pJP{\Delta}A45$ containing aroA deleted region and suicide vector $(_pJP5603)$ was constructed. The aroA gene deleted mutants were constructed using this recombinant plasmid. For cloning gene encoding antigenic region of E. coli O157 KNIH317, the O-antigen synthesis gene cluster and sit gene was cloned. The E. coli XL1-Blue cells harboring this recombinant plasmid showed cytotoxicity in Vero cells. The ctx gene was cloned for tile purpose of antigenic region against V. cholerae KNIH002. Sequence analysis confirmed that the virulence gene cassette was consisted of ace, zot, ctxA and ctxB genes.
Escherichiae-like organisms were isolated from rectal specimens of 56 children who were either in preschool age or in elementary school. The isolated strains were subjected to tests to screen enteropathogens producing heat-labile enterotoxin and susceptibility test to various antibiotics by disc diffusion method on agar plates. Production of heat-labile enterotoxin by the strains was assyed in the sensitive and reproducible cultured adrenal tumor cell system. The assay was sterodogenesis of the cell in the presence of heat-labile enterotoxin. Among 56 strains, gave positive reaction in the test of toxin production. This meant that about 10% of the children population objected to the study harbored the toxigenic strain of enteropathogenes. Some of these toxigenic strains were resistant to the antibiotics employed in the test. This study suggested that considerable population in Korea may harbor entertoxigenic E. coli as a part of intestinal normal flora. The toxigenic strains which are resistant to antibiotics may bring issue of public health in the future.
Kim, Jin Seok;Kim, Junyoung;Kim, Soo-Jin;Jeon, Se-Eun;Oh, Kyung Hwan;Cho, Seung-Hak;Kang, Yeon-Ho;Han, Soon Young;Chung, Gyung Tae
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제24권3호
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pp.421-426
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2014
To characterize the extended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) in diarrheagenic Escherichia coli from Korea in 2008-2011, we screened seven enterotoxigenic E. coli (ETEC) and one enteroaggregative E. coli (EAEC) that produce ESBLs from a nationwide survey. All eight isolates produced CTX-M-type ESBLs, including CTX-M-12 (n = 4), CTX-M-14 (n = 2), and CTX-M-15 (n = 2). PCR-based replicon typing indicated that the $bla_{CTX-M-12}$ genes of four ETEC isolates were carried on a conjugative IncF plasmid, whereas the $bla_{CTX-M-14}$ of one EAEC was located on an IncK plasmid. This is the first report of the occurrence of $bla_{CTX-M}$ genes in clinical isolates of EAEC in Korea. The ESBL-producing isolates were shown to be different based on pulsed-field gel electrophoresis and multilocus sequence typing, whereas the four isolates with CTX-M-12 were clonally related. These observations raise an alarm for the spread of plasmid-mediated resistance to ESBL among diarrheagenic E. coli.
This study was performed to investigate infectious gastrointestinal diseases in 115 Korean cats (83 indoors and 32 outdoors) with digestive signs such as diarrhea, anorexia or abdominal distention. Detection of infectious pathogens was analyzed using real-time PCR. As a result, 85 of 115 Korean cats were detected with feline corona virus (FCoV), feline parvo virus, Group A rotavirus, Clostridium perfringens (C. perfringens), Campylobacter coli (C. coli), Campylobacter jejuni, enterotoxigenic Escherichia coli, enteropathogenic Escherichia coli, Salmonella spp., Tritrichomonas foetus, Cyclospora cayetanensis, and Giardia lamblia. The most frequently detected pathogen was C. perfringens (52 cats, 61.2%), followed by FCoV (43 cats, 50.6%) and C. coli (16 cats, 18.8%). Also, single infection was the most common (43 cats), followed by double infection in 31 cats, triple infection in 7 cats, and quadruple infection in 4 cats. There was no significant relationship between pathogen detection and age, gender, living environment, weather, and diarrhea. However, there was a significant difference between the age group under 1 year and the age group 1~7 (P value<0.05). In this study, cats with suspected gastrointestinal infection were randomly evaluated, and other factors that could affect pathogen detection were insufficiently considered. For this reason, additional epidemiological investigations with a larger number of cats and sufficient consideration of the causes that may affect the results are needed. Nevertheless, it is thought that this study can also provide valuable information on gastrointestinal pathogens in Korean cats.
본 연구에서는 한국의 전통적인 식품인 비빔밥에서 2005년에서 2011년에 분리한 대장균에 대한 특성을 연구하였다. 전체 1,142건의 비빔밥에서 84 균주(7.4%)의 대장균이 분리되었다. 분리한 균주의 항생제 내성 분석 및 다제 내성 패턴은 ampicillin의 내성이 가장 높았으며 6 균주(7.2%)에서는 다제 내성을 보였다. 분리한 균주의 병원성 유전자 13종의 유무를 확인한 결과 5 균주(5.9%)에서 ent 유전자를 보유하여 STEC/EPEC 형의 대장균으로 분류되었다. 그러나 EIEC, EAEC, ETEC 형은 검출되지 않았다. 병원성 유전자가 검출되지 않은 대장균에 대한 혈청형은 O103 (1.2%), O91 (1.2%), O128 (6.0%)으로 확인되었고 O26, O157, O145, O111, O121 혈청형은 없었다. 동일한 O 혈청형 균주는 독소 유전자를 가지고 있는 것과 없는 것이 동시에 있다고 보고 되어 있고 혈청형으로 병원성 유전자를 구분하는 것은 균주의 특성에 따라 차이가 많이 나므로 향후 연구가 필요하다. 위해 요소가 있는 균주에 대해서 유전적 상동성을 시험한 결과 균주의 상동성이 낮아서 서로 다른 오염원에서 분리 되었음을 유추 할 수 있었다. 비빔밥은 다양한 재료를 사용하며 제조 과정이 복잡하기 때문에 대장균에 의한 오염의 가능성이 매우 높은 식품이다. 그러므로 원재료부터 완성까지 위생적으로 철저하게 조리해야 하며 교차 오염 방지 및 관리를 통해 안심하고 섭취할 수 있도록 해야 한다.
Pathogenic Escherichia coli (E. coli) is one among the most important agents of diarrhea in calves. From January to December 2021, 108 isolates from feces of calves with diarrhea were investigated for enterotoxigenic E. coli (ETEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), shiga toxin-producing E. coli (STEC), enteroaggregative E. coli (EAEC), and enteroinvasive E. coli (EIEC) using real-time PCR. In addition, the genes for F5, F17 and F41 fimbriae were detected by PCR. The most frequently isolated pathotypes were EPEC/STEC (29 isolates), and ETEC/EPEC/STEC (29 isolates). ETEC/EPEC, and ETEC/STEC were also found in 10 isolates. EPEC, STEC, and ETEC were detected in 13, 11, and 6 respectively. EAEC, and EIEC was not detected. Antimicrobial resistance test was carried out by agar disc diffusion method with 14 antimicrobials. Among 108 pathogenic E. coli isolates, 107 isolates were resistant to at least one of 14 antibiotics used in this study, 99 (91.7%) were resistant to two or more antimicrobials, and a single remarkable isolate was resistant to 14 antimicrobials. The isolates were primarily resistant to penicillins, streptomycin, tetracycline, ceftiofur, Trimethoprim/sulfamethoxazole, Kanamycin, and Ciprofloxacin. The high rate of resistance in pathogenic E. coli, sometimes to multiple drugs, may complicate future options for treating human infections. These results may bu used for diagnosis and therpeitic purposes in calves with diarrhea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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