Kim Jin Sik;Kim Su Won;Ryu Hye Myung;Nam Jin Sik;Min Byung Tae;Park Soo Hyun;Jeon Jung Tae;Yoo Min
Biomedical Science Letters
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v.10
no.3
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pp.305-308
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2004
We have examined alcohol-induced malformation of chick embryo. Alcohol was considered to induce the malformation of developing embryo and to have bad effects on embryonic stage. We injected alcohol into air sac on day 4 of incubation. Ten % alcohol-treated group showed a little decrease on their body length compared to the untreated group and distilled water-treated group. Thirty % alcohol-treated group showed significant decrease on their body length compared to the untreated group and 10% ethanol treated group. In addition, we have observed malformation of eyeballs and bills. These results indicate that alcohol affects chicken developments and brings on malformation of developing stage.
A teratogenicity test of 'folpet' was carried out in the developing chick embryos to investigate and validate the safety of rural environmental hazardous materials. Folpet was administered to chick embryos' yolk sac at a rate of 0.1mg and 0.01mg per SPF eggs at 96 hours of incubation. The morphological changes were examined. Fertility ratio of SPF eggs used was 94.9%. Hatching rate of untreated control group was 74.4% and the group dosed with 100ul of corn oil into the yolk sac was 70.0%. The $LD_{50}$ of folpet was 0.663mg/100ul/egg. After hatching, mean body weight, body length, claw length and beak length of high and low dose administered groups were not significantly different from untreated and vehicle control group. There was no abnormal appearence in all the groups. Therefore it seems that, within the doses applied, folpet dose not induce potential teratogenicity in the developing chick embryos.
Serial ultrasonographic examinations were daily performed from 15 days after ovulation until parturition to determine the time of first detection and ultrasonographic appearance of the fetal and extra-fetal structures in pregnant 10 Maltese, 10 Yorkshire Terrier, 15 Shih-tzu, and 10 Miniature Schnauzer bitches, respectively. Gestational age was timed from the day of ovulation (day 0), which was estimated to occur when plasma progesterone concentration was first increased above 4.0ng/ml. The gestational length was $63.4{\sim}63.6$ (range: $61{\sim}65$) days and the geatational length was no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the extra-fetal structures were; gestational sac at days $18.9{\sim}19.5\;(17{\sim}22)$, zonary placenta at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}28)$, yolk sac membrane at days $24.6{\sim}25.5\;(23{\sim}27)$, yolk sac tubular shape at days $26.1{\sim}26.3\;(24{\sim}28)$, and amniotic membrane at days $26.1{\sim}28.2\;(24{\sim}31)$, respectively. The time of the first detection of the extra-fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). The initial detection of the fetal structures were; embryo initial detection at days $22.5{\sim}22.9\;(21{\sim}24)$, heartbeat at days $23.2{\sim}23.8\;(21{\sim}25)$, embryo bipolar shape $27.6{\sim}28.9\;(26{\sim}30)$, fetal movement at days $31.9{\sim}32.8\;(27{\sim}34)$, limb buds at days $29.1{\sim}30.7\;(27{\sim}33)$, stomach at days $31.1{\sim}33.1\;(29{\sim}34)$, urinary bladder at days $32.4{\sim}33.2\;(29{\sim}35)$, skeleton at days $34.7{\sim}35.9\;(34{\sim}39)$, and kidney at days $42.1{\sim}44.7\;(41{\sim}48)$, respectively. The the time of the first detection of the fetal structures were no statistically significant difference among bitches (p>0.05). These results indicate the evaluation of the time of first detection and ultrasonographic characteristics of the gestational structures might be useful for pregnancy diagnosis, estimating fetal age, embryonic resorption, fetal monster, abnormal fetal growth and fetal viability, respectively.
The cadmium (Cd) toxicological effects on the fertilized eggs, embryos and larvae were investigated in olive flounder, Paralichthys olivaceus water-borne exposed to Cd. The survival rate and hatching success of the embryos significantly diminished in treated groups in dependence of the Cd concentration. Significant differences were found at ${\geq}30{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups compared to the control group. A significant increase of malformation of the embryo was observed at ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups. They usually include such symptoms as clouded yolk-sac abnormality, fin erosion and spinal curvature. A significant reduction in the survival rate of the larvae was observed in ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups with accompanied by the disorder. Notably, in larvae, a concentration as low as $10{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups caused significant elevated abnormalities that is incidences of spinal cord deformation, abnormal eyes, deformation of the head region and severe developmental delay.
Park, Kyunghyuk;Frost, Jennifer M.;Adair, Adam James;Kim, Dong Min;Yun, Hyein;Brooks, Janie S.;Fischer, Robert L.;Choi, Yeonhee
Molecules and Cells
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v.39
no.10
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pp.768-775
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2016
The Arabidopsis female gametophyte contains seven cells with eight haploid nuclei buried within layers of sporophytic tissue. Following double fertilization, the egg and central cells of the gametophyte develop into the embryo and endosperm of the seed, respectively. The epigenetic status of the central cell has long presented an enigma due both to its inaccessibility, and the fascinating epigenome of the endosperm, thought to have been inherited from the central cell following activity of the DEMETER demethylase enzyme, prior to fertilization. Here, we present for the first time, a method to isolate pure populations of Arabidopsis central cell nuclei. Utilizing a protocol designed to isolate leaf mesophyll protoplasts, we systematically optimized each step in order to efficiently separate central cells from the female gametophyte. We use initial manual pistil dissection followed by the derivation of central cell protoplasts, during which process the central cell emerges from the micropylar pole of the embryo sac. Then, we use a modified version of the Isolation of Nuclei TAgged in specific Cell Types (INTACT) protocol to purify central cell nuclei, resulting in a purity of 75-90% and a yield sufficient to undertake downstream molecular analyses. We find that the process is highly dependent on the health of the original plant tissue used, and the efficiency of protoplasting solution infiltration into the gametophyte. By isolating pure central cell populations, we have enabled elucidation of the physiology of this rare cell type, which in the future will provide novel insights into Arabidopsis reproduction.
Two male reticulated giraffes (Giraffa camelopardalis reticulata), 21-year-old, died of nutritional deficiency that primarily caused by serious tooth wear at Seoul Zoo in winter. A 970 kg-weighed giraffe showed tooth wear of premolars, molars and incisors at necropsy. A foreign body in the rumen, congestion and ulcer of abomasum and duodenum were also observed. Mild appearance of serous fat atrophy in pericardial sac suggests that lack of nutritional intake caused by tooth wear can become harmful enough to threat life. At the necropsy of a 1,290 kg-weighed giraffe, a large quantity of sandy soil were found in the rumen which would stuck the pathway of well-fermented ruminal contents at esophageal groove. Nutritional deficiency could be suspected to urge this giraffe to graze grass on the ground along with sandy soil. Secondarily, the soil damaged teeth and become a culprit making irregular tooth wear and mild serous fat atrophy. Nutritionally good care of geriatric animals is needed especially for browsing animals like giraffes and critically in winter season.
As a tumor suppressor homologue during mitosis, Chk2 is involved in replication checkpoints, DNA repair, and cell cycle arrest, although its functions during mouse oocyte meiosis and early embryo development remain uncertain. We investigated the functions of Chk2 during mouse oocyte maturation and early embryo development. Chk2 exhibited a dynamic localization pattern; Chk2 expression was restricted to germinal vesicles at the germinal vesicle (GV) stage, was associated with centromeres at pro-metaphase I (Pro-MI), and localized to spindle poles at metaphase I (MI). Disrupting Chk2 activity resulted in cell cycle progression defects. First, inhibitor-treated oocytes were arrested at the GV stage and failed to undergo germinal vesicle breakdown (GVBD); this could be rescued after Chk2 inhibition release. Second, Chk2 inhibition after oocyte GVBD caused MI arrest. Third, the first cleavage of early embryo development was disrupted by Chk2 inhibition. Additionally, in inhibitor-treated oocytes, checkpoint protein Bub3 expression was consistently localized at centromeres at the MI stage, which indicated that the spindle assembly checkpoint (SAC) was activated. Moreover, disrupting Chk2 activity in oocytes caused severe chromosome misalignments and spindle disruption. In inhibitor-treated oocytes, centrosome protein ${\gamma}$-tubulin and Polo-like kinase 1 (Plk1) were dissociated from spindle poles. These results indicated that Chk2 regulated cell cycle progression and spindle assembly during mouse oocyte maturation and early embryo development.
This experiment was performed to study the effects of radioactive phosphorus($^{32}p$) on the growth of chick embryo and young chick. Radioactive phosphorus($^{32}p$) was administered into the yolk sac of chick embryo in doses of 2 uci/gm and 1 uci/gm and was administered intraperitoneally to the young chick in doses of 1 uci/gm and 0.5 uci/gm. The chick embryos were sacrificed on 6th, 7th, 8th, 9th and 10th day and the chicks were sacrificed on 1st, 3rd, 6th and 10th day after the administration and the liver, kidney, spleen, brain, eye ball and femur were weighed to observe the effects of growth inhibition on them. The results obtained were as follows. 1. A marked growth inhibitory effect was found on 8th, 9th and 10th day after the administration of $^{32}p$ in chick embryos and the same effect was found on 6 th and 10 th day after the administration in chicks. 2. The growth of the liver, kidney, spleen and femur was inhibited markedly but the brain and eye ball were not affected in chick embryos and chicks.
Kim Su Won;Kim Jin Sik;Ryu Hye Myung;Nam Jin Sik;Cheigh Hong Sik;Min Byung Tae;Park Soo Hyun;Yoo Min
Biomedical Science Letters
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v.10
no.4
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pp.397-401
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2004
We have examined congenital malformation in developing chick embryo caused by endocrine disruptor, bisphenol A (BPA). We injected BPA into the air sac of developing egg on day 4 of incubation. BPA-treated group with a concentration of 10 ㎍/egg showed a little decrease on their body length compared to the untreated group. But the group treated with 50㎍/egg revealed severe malformation in eyeballs and bills. The group treated with 100㎍/egg could not continue their development after few days of incubation. These results indicate that BPA clearly inhibits the normal development in chick and it should be toxic to the developing fetus at early stage and in various tissues. The study should contribute to the understanding of toxic effect of BPA in developing human fetus when exposed to the BPA.
Diethylnitrosamine (DEN) is known as a potential hepatic carcinogen by single administration. This study was designed to measure the effects of DEN-induced cell damage on the triglyceride and cholesterol concentration in the liver, excluding dietary effects. Fertilized chicken eggs, 10 days before hatching, were randomly divided into three groups (n=20) and each egg was injected 10 ${mu}ell$ of corn oil (vehicle control), 5 $\mu\textrm{g}$ of DEN/10 ${mu}ell$ of DEN/10 ${mu}ell$ into yolk via air sac. After 48 hr and 96 hr incubation, the damage of the chick-embryo liver cell was investigated by electron microscopy and by measuring the concentration of lipid components (total cholesterol, free cholesterol, phospholipid and triglyceride). For eggs administered 10 $\mu\textrm{g}$ of DEN and incuvated 96 hr, in hepatocyte, the nucleus membrane was roughed, the size of nucleolus was apparently increased and euchromatin was accumulated. Mitochondria were condensed and cristae, located mitochondiral inner membrane, were obscured. Additionally, the leaves of triglyceride and cholesterol classes were significantly increased depend on the amount treated with 10 $\mu\textrm{g}$ DEN at 96 hr, but phospholipids component of cell membrane, were decreased with significance. As a conclusion, carcinogen induced hepatic lesion was correlated with the changes in lipid component of liver.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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