Kim, Mi Jeong;Huh, Yang Hoon;Choi, Ki Ju;Jun, Sangmi;Je, A Reum;Chae, Heesu;Lee, Chulhyun;Kweon, Hee-Seok
Applied Microscopy
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v.42
no.4
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pp.179-185
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2012
Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder. Neuropathological hallmarks of AD are amyloid plaques, dystrophic neurite, and alteration of subcellular organelles. However, the morpho-functional study of this degenerative process and ultimate neuronal death remains poorly elucidated. In this study, immunohistochemical and ultrastructural analyses were performed to clarify the abnormal morphological alterations caused by the progression of AD in APP/PSEN1 transgenic mice, express human amyloid precursor protein, as a model for AD. In transgenic AD mice brain, the accumulation of Amyloid ${\beta}$ plaques and well-developed dystrophic neurites containing anti-LC3 antibody-positive autophagosomes were detected in the hippocampus and cortex regions. We also found severe disruption of mitochondrial cristae using high-voltage electron microscopy and three-dimensional electron tomography (3D tomography). These results provide morpho-functional evidence on the alteration of subcellular organelles in AD and may help in the investigation of the pathogenesis of AD.
Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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2009.11a
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pp.395-396
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2009
Electron tomography를 이용한 3차원적 영상 시각화는 electron microscopy를 통해 하나의 실험 대상으로부터 연속된 이미지를 생산함으로써 이루어진다. 이미지 데이터 내부에는 대용량의 정보값을 포함하고 있어 3차원 구조물로의 변환이 가능하다. electron tomography 작업 과정 중 고해상도 원본 이미지에 pattern recognition 알고리즘이 적용된 필터링을 적용하면 실험에 필요한 데이터의 정보 손실을 최소화한 상태에서 electron tomography 시스템의 효율성을 높일 수 있다. 또한 tomographic econstruction이 진행되는 각 단계에 hanning windowing을 적용하면 불필요한 정보 값이나 노이즈 등을 효과적으로 제거할 수 있다. 윤곽선 데이터의 효과적 활용을 위하여 sobel 필터 처리를 할 경우 관찰하고자 하는 대상의 윤곽선 특징을 뚜렷하게 시각화 할 수 있었다. 본 연구를 통하여 데이터의 시각화 과정에서 실험의 신뢰성 확보를 위해 원본 이미지를 기반으로 하는 tomogram과 필터링을 적용한 tomogram을 비교하여 최종 결과물의 정확도를 높이고, electron tomography를 통한 결과물의 질적 향상을 유도할 수 있음을 확인하였다.
Electron tomography (ET) of biological specimens is performed from a series of images obtained over a range of tilt angles in a transmission electron microscope. When using the high voltage electron microscope (HVEM), various noises appear in EM images acquired from thick sections by high voltage electron beam. In order to obtain an adequate result in electron tomograms that allow visualization of rather complex and mega-cellular structure such as brain tissue, it is necessary to remove the noise in each original tilt images of thick section. Using band-pass filtering of original tilt images, the filtered images are obtained and used to assemble a reconstructed tomogram. The qualified 3D tomogram from filtered images results in a considerable reduction of the noises compared to conventional tomogram. In conclusion, this study suggests that band-pass filtering is effective to improve the brightness and intensity of HVEM produced tomograms acquired from micron-thick sections of biological specimens.
Kim, Jin-Gyu;Choi, Joo-Hyoung;Jeong, Jong-Man;Kim, Young-Min;Suh, Il-Hwan;Kim, Jong-Pil;Kim, Youn-Joong
Bulletin of the Korean Chemical Society
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v.28
no.3
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pp.391-396
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2007
The three-dimensional structure of an inorganic crystal, CaMoO4 (space group I 41/a, a = 5.198(69) A and c = 11.458(41) A), was determined by electron crystallography utilizing a high voltage electron microscope. An initial structure of CaMoO4 was determined with 3-D electron diffraction patterns. This structure was refined by crystallographic image processing of high resolution TEM images. X-ray crystallography of the same material was performed to evaluate the accuracy of the TEM structure determination. The cell parameters of CaMoO4 determined by electron crystallography coincide with the X-ray crystallography result to within 0.033-0.040 A, while the atomic coordinates were determined to within 0.072 A.
Scanning electron microscopic appearance of infant milk formula indicated that mostly agglomerate with few or more diverse number of particles and also apple like as well as typical feature of drying in raw milk. Small particle of infant milk formula become agglomerate progressively. Some sample represent crystalline rectangular among the globular agglomerates which seem to be a different composites or those of solubility. Some sample showed the irregular porosity at central sec-scanning electron microscopic study between Korea and European products.
In preparation of the biological samples for electron microscopy, the chemical fixation by glutaraldehyde, paraformaldehyde, and OsO4 has been generally used for a long time. However, the chemical fixation method has some problems: the infiltration time is a little bit long and the ultrastructure of cell or tissue transforms before complete fixation of sample. So, recently, cryo-fixation is considered more often in biomedical field. In this study, we compared High Pressure Freezing (HPF) method with chemical fixation method using a algal sample (Ptilota filicina J. Agardh), which was difficult to fix using chemical fixation method. In chloroplast, the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome can not show clearly by chemical fixation. In this study we could observe the ultrastructure of thylakoid lamella and phycobilisome of chloroplast very clearly using HPF fixation. An improved images of ultrastructures of nucleus, mitochondrion and floridean starch could obtain. These results suggest that HPF method is very useful method in algal specimen for electron microscopy.
Proceedings of the Korea Information Processing Society Conference
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2010.11a
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pp.603-604
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2010
본 연구는 이미지 필터링 효과를 적용한 이미지들을 3D tomogram으로 만들었을 때 어느 정도의 효과적인 복원이 가능하고 또 어떤 해상도의 필터를 사용했을 때 더 나은 결과를 얻어 낼 수 있는 지 확인하기 위해 진행하였다. 전자현미경으로 2D tilted image들을 찍는 과정에는 고전압의 사용으로 인한 다소의 오류들이 발생한다. 따라서 이러한 오류를 상쇄시키고 3D tomogram의 질적 향상을 위하여 Gaussian low-pass filtering을 사용하였다. 또한 Gaussian low-pass filtering 내에서도 어떤 해상도 값의 필터링을 사용해야 더 나은 결과를 얻을 수 있는 지 확인하였다.
Kim, Chang-Yeon;Lee, Ji-Hyun;Yoo, Seung Jo;Lee, Seok-Hoon;Kim, Jin-Gyu
Applied Microscopy
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v.45
no.3
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pp.183-188
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2015
Due to the miniaturization of semiconductor devices, their crystal structure on the nanoscale must be analyzed. However, scanning electron microscope-electron backscatter diffraction (EBSD) has a limitation of resolution in nanoscale and high-resolution electron microscopy (HREM) can be used to analyze restrictive local structural information. In this study, three-dimensional (3D) automated crystal orientation and phase mapping using transmission electron microscopy (TEM) (3D TEM-EBSD) was used to identify the crystal structure relationship between an epitaxially grown CdS interfacial layer and a $Cu(In_xGa_{x-1})Se_2$ (CIGS) solar cell layer. The 3D TEM-EBSD technique clearly defined the crystal orientation and phase of the epitaxially grown layers, making it useful for establishing the growth mechanism of functional nano-materials.
Kim, Jin-Gyu;Jeong, Jong-Man;Kim, Mun-Chang;Choi, Joo-Hyoung;Kim, Youn-Joong
Applied Microscopy
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v.37
no.3
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pp.199-208
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2007
We have made an optical device to study the wave optics phenomena, such as image and diffraction pattern, constructive and destructive interference, by direct operation of laser beam and optical lenses. It consists of laser beam, goniometer, objective lens, intermediate lens, projection lens, CCD system, and computing system. As a result of the performance test, we were able to magnify samples up to 44 times with the resolution of about $5{\mu}m$. It is expected to help EM users understanding more easily principles of transmission electron microscopy (TEM).
Kim, Jin-Gyu;Lee, Sang-Hee;Kweon, Hee-Seok;Jeong, Jong-Man;Jeong, Won-Gu;Lee, Su-Jeong;Jou, Hyeong-Tae;Kim, Youn-Joong
Applied Microscopy
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v.38
no.4
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pp.285-291
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2008
We have evaluated the effects of experimental factors on transmitted electron beam intensities for quantitative analysis in electron tomography. For the correct application of Beer's law in electron tomography, the transmitted beam intensity should reflect the net effect of mass properties on beam path. So, the any other effects of the objective aperture and the specimen holder on beam path should be removed. The cut-off effects of objective aperture were examined using Quanti-foil holey carbon film and a transmission electron microscope operated at 120 kV. The transmitted beam intensities with $30{\mu}m$ objective aperture dropped about 16.7% compared to electron beam intensities without the objective aperture. Also, the additional losses of about 14.2% at high tilt angles were occurred by cut-off effects of the objective apertures. For the precise quantitative analysis in electron tomography, the effect of the objective aperture on transmitted electron beam intensities should be considered. It is desirable that 2-D tilt series images are obtained without the objective aperture for correct application of Bee's law.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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