• 제목/요약/키워드: disc-diffusion assay

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감초 성분의 항균활성, 정량 및 방부력에 관한 연구 (Antimicrobial Activity, Quantification and Bactericidal Activities of Licorice Active Ingredients)

  • 김혜진;장하나;배정윤;하지훈;박수남
    • 한국미생물·생명공학회지
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    • 제42권4호
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    • pp.386-392
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    • 2014
  • 본 연구에서는 감초성분인 glycyrrhizin, liquiritin, liquiritigenin, isoliquiritigenin의 항균활성을 측정하고, 원산지별 감초 추출물에서 항균활성 성분인 isoliquiritigenin과 liquiritigenin을 정량하여 비교평가하였다. 또한 challenge test를 통하여 가장 뛰어난 항균활성을 나타낸 isoliquiritigenin과 합성 방부제인 메틸 파라벤과의 방부력을 비교하였다. 감초 성분의 항균활성을 disc diffusion assay를 통해 측정한 결과, Liquiritigenin과 isoliquiritigenin이 B. subtilis, P. acnes, E. coli, P. aeruginosa에 대해 저해활성을 보였다. 특히 감초성분 중 큰 항균활성을 나타낸 isoliquiritigenin과 합성 방부제로 사용되는 메틸 파라벤과 프로필 파라벤의 최소저해농도를 비교한 결과 isoliquiritigenin이 강력한 항균활성을 나타내는 것을 확인하였다. HPLC를 통해 원산지별 감초 추출물 isoliquiritigenin과 liquiritigenin을 정량한 결과, 이들의 함량은 한국산 감초가 중국산 감초와 우즈베키스탄산 감초보다 높은 것을 확인하였다. 이를 통해 한국산 감초가 우수한 항균력을 나타내는데 isoliquiritigenin, liquiritigenin 함량이 영향을 미치는 것으로 판단된다. Isoliquiritigenin의 B. subtilis, P. acnes, E. coli, P. aeruginosa에 대한 challenge test를 통해 메틸 파라벤 보다 isoliquiritigenin이 뛰어난 방부력을 나타냄을 확인하였다. 이상의 본 연구 결과로부터 감초 성분의 항균활성을 확인하였고, 원산지별 감초(한국, 중국, 우즈베키스탄) 중 한국 감초가 우수한 항균력을 나타내는데 isoliquiritigenin과 liquiritigenin 함량이 영향을 미치는 것으로 사료된다. 또한 감초 성분 중 가장 우수한 항균활성을 나타낸 isoliquiritigenin은 파라벤류를 대체 할 수 있는 천연 보존제로써 이용 가능성이 있다고 판단된다.

오미자 에탄올 추출물에 의한 식품위해성 세균의 증식 억제 및 세포구조 변화 (Inhibition of Foodborne Pathogens and Spoilage Bacteria and Their Structural Changes by Ethanol Extract of Schizandra chinensis Baillon)

  • 김세령;김미라
    • 동아시아식생활학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.109-119
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    • 2012
  • 본 연구에서는 오미자 에탄올 추출물의 천연 항균제로서의 이용 가능성을 살펴보기 위하여 식품 위해성 세균에 대한 항균활성을 측정하였다. Paper disc diffusion test와 최소저해 농도(MIC) 측정에서는 오미자 에탄올 추출물이 Listeria monocytogenes, Bacillus cereus, Escherichia coli O157:H7에 대해 큰 생육저해환과 낮은 MIC를 나타내었다. Time-kill assay에서는 L. monocytogenes의 생육이 오미자 에탄올 추출물에 의해 가장 저해되는 것으로 나타났다. 또한 오미자 에탄올 추출물을 처리한 E. coli, E. coli O157:H7, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa에서는 ${\beta}$-galactosidase와 o-nitrophenyl-${\beta}$-D-galactoside가 높은 반응을 나타냄으로써 오미자 에탄올 추출물로 인해 세포막 손상이 유발됨을 유추할 수 있었다. 또한 E. coli, E. coli O157:H7, P. aeruginosa, Salmonella Typhimurium 등 그람음성균에서는 오미자 에탄올 추출물의 처리 농도가 높을수록 세포구성물의 유출과 세포 외막의 투과성이 증가하는 현상이 나타났다. 시차주사현미경(SEM)과 투과전자현미경(TEM)을 이용하여 관찰한 세포구조에서도 오미자 에탄올 추출물 처리 시 세포막의 부분적인 파괴와 세포 팽윤이 일어난 것을 확인할 수 있었다. 따라서 이들 결과는 오미자 에탄올 추출물이 식품위해성 세균에 대해 높은 항균 활성을 가지고 있으며, 천연 항균소재로서의 이용 가능성이 있음을 보여주었다.

향신료 정유의 휘발성 성분 및 식중독 세균에 의해 형성된 biofilm 억제 효과 (Volatile Components of Essential Oils from Spices and It's Inhibitory Effects against Biofilm Formed by Food Poisoning Bacteria)

  • 김형은;김용석
    • 한국식품위생안전성학회지
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    • 제37권4호
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    • pp.285-295
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    • 2022
  • 식중독 세균에 의한 biofilm 형성을 억제하는 효과를 시험하기 위하여 cinnamon, clove 및 lemongrass 정유의 휘발성 성분을 분석하였다. 또한 정유의 주요 항균활성 성분이 polyethylene과 stainless steel 표면에서 식중독 세균에 의한 biofilm 형성을 억제하는 효과에 대하여 조사하였다. Cinnamon 정유의 주요 휘발성 성분은 cinnamaldehyde (38.30%), linalool (9.61%), β-caryophyllene (8.90%) 및 1,3,4-eugenol (8.19%)로 동정되었다. Clove 정유의 주요 휘발성 성분은 1,3,4-eugenol (61.84%)로 분석되었다. Lemongrass의 주요 휘발성 성분은 citral의 이성질체인 geranial (19.11%)과 neral (19.23%)로 검출되었으며, citral은 isomeric acyclic monoterpene aldehydes로서 geranial (trans-citral, 19.11%)과 neral (cis-citral, 19.23%)의 혼합물로 분석되었다. Cinnamon, clove 및 lemongrass의 주요 성분 중 cinnamaldehyde, linalool, eugenol 및 citral이 disc diffusion assay에 의해 시험한 6종의 식중독 세균에 대하여 강한 항균활성을 나타냈다. Eugenol (0.1%)과 citral은 polyethylene 및 stainless steel coupon 표면에서 식중독 세균에 의해 형성된 biofilm에 대하여 강한 억제 작용을 나타났다. Cinnamaldehyde (0.1%)는 Listeria monocytogenes ATCC 19112와 Staphylococcus aureus KCCM 11812에 의해 형성된 biofilm에 대해 장한 억제 작용을 나타냈다. 연구 결과 cinnamaldehyde, eugenol 및 citral 처리에 의해 식중독 세균에 의한 biofilm 형성을 억제가 가능할 것으로 판단된다.

입효산(立效散)의 Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus에 대한 항균활성에 관한 연구 (Antibacterial Effect of Ipyo-san against Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus)

  • 윤재홍;최연주;정승현;신길조
    • 대한한방내과학회지
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    • 제34권3호
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    • pp.278-288
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    • 2013
  • Objectives : Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) has a cephalosporin and beta-lactam antibiotic-resistant strains. MRSA is one of the major pathogens causing hospital infection and the isolation ratio of MRSA has gradually increased. Consequently, increased resistance to antibiotics is causing serious problems in the world. Therefore, there is a need to develop alternative antimicrobial drugs for the treatment of infectious diseases. Methods : The antibacterial activities of Ipyo-san were evaluated against 2 strains of MRSA and 1 standard Methicillin-susceptible staphylococcus aureus (MSSA) strain by using the disc diffusion method, minimal inhibitory concentrations (MIC) assay, colorimetric assay using MTT test, checkerboard dilution test and time-kill assay performed under dark. Results : The MIC of Ipyo-san water extract against S. aureus strains ranged from 1000 to $2,000{\mu}g/ml$, so we confirmed that it had a strong antibacterial effect. Also, the combinations of Ipyo-san water extract and conventional antibiotics exhibited improved inhibition of MRSA with synergy effect. We suggest that Ipyo-san water extract against MRSA has antibacterial activity so it has potential as alternatives to antibiotic agents. For the combination test, we used Triton X-100 (TX) and DCCD for measurement of membrane permeability and inhibitor of ATPase. As a result, antimicrobial activity of Ipyo-san water extract was affected by the cell membrane. Conclusions : We suggest that the Ipyo-san water extract lead the treatment of bacterial infection to solve the resistance and remaining side-effect problems that are the major weak points of traditional antibiotics.

참소리쟁이 뿌리 추출물 및 분획의 항균 활성과 항생제 증강 활성 (Antibacterial and Antibiotic Activity Enhancing Effect of Extract and Fractions from the Root of Rumex japonicus Houtt)

  • 양선아;김아영;표병식;김선민
    • 한국약용작물학회지
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    • 제25권6호
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    • pp.375-380
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    • 2017
  • Background: The objective of this study were to determine the antibacterial activity and antibiotic activity-enhancing effect of 70% ethanol extract of the root of Rumex japonicus Houtt. and its fractions when used in combination with gentamicin against aerobic skin flora. Methods and Results: The antibacterial activity and antibiotic (gentamicin) activity enhancing effect against aerobic skin flora were determined using the disc diffusion assay. Chloroform fraction (CF) and ethyl acetate fraction (EF) showed higher activities against Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis than those shown by other fractions. Regarding the antibiotic (gentamicin) activity-enhancing effect against aerobic skin flora, the n-hexane fraction (HF) and CF showed strong activity. The combination of HF and CF with gentamicin was evaluated using the broth dilution assay to determine the inhibitory effect on the growth of aerobic skin flora. The combination of CF with gentamicin exhibited the highest inhibitory effect on the growth of S. aureus and S. epdermidis. MTT assay performed to determine the viability of L929 cells revealed that EF treatment resulted in viability of 33.96 - 116.76% at the tested concentration. The combination of 70% ethanol extract and its other fractions with gentamicin showed low cell toxicity. Conclusions: Appropriate use of antimicrobial agents is important prior to the development of new antibiotics. The 70% ethanol extract of the root of R. japonicus Houtt. and its fractions showed significant synergism with gentamicin when used in combination against S. aureus and S. epdermidis. Thus, R. japonicus Houtt. could be used as a functional materials in antimicrobial-related fields.

하수오 추출물, 분획물 및 주성분의 항산화, 세포 보호 및 항균 활성에 관한 평가 (Evaluation of Antioxidant, Cytoprotective and Antimicrobial Properties of Polygoni multiflori Radix Extract, Fractions and Its Major Constituent)

  • 신혁수;김민우;송제리;이준석;하윤정;전영희;김지웅;이윤주;박수남
    • 대한화장품학회지
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    • 제44권4호
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    • pp.407-417
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    • 2018
  • 본 연구에서는 하수오를 이용하여 50% 에탄올 추출물과 에틸아세테이트 분획물을 제조하고, 추출물 및 분획물의 항산화, 세포 보호 및 항균 효능을 평가하여 기능성 소재로서의 가능성을 확인하였다. 또한, 하수오에 주요하게 존재하는 성분의 활성도 검증하였다. HPLC-DAD, LC-EIS-MS를 통해 분석한 결과, 하수오의 주성분은 2, 3, 5, 4'-tetrahydroxystilbene 2-O-${\beta}$-D-glucoside (THSG)이었다. 페놀류 및 THSG 함량은 에틸아세테이트 분획물이 에탄올 추출물 보다 각각 11.1 및 3.0배 높게 나타났다. DPPH 자유 라디칼 및 $Fe^{3+}-EDTA/H_2O_2$ 시스템에서 생성된 ROS에 대한 소거 활성 평가에서, 에틸 아세테이트 분획물은 에탄올 추출물 보다 뛰어난 소거 활성을 나타냈다. 특히 ROS 소거 활성 평가에서 에틸 아세테이트 분획물과 THSG은 L-ascorbic acid와 동등한 소거 활성을 나타냈다. 이러한 결과를 바탕으로 수행된 광증감 반응으로 유도된 적혈구의 산화적 손상에 대한 세포 보호 활성은 에틸아세테이트 분획물, 에탄올 추출물, THSG 순서로 나타났으며, 모든 실험군이 양성 대조군으로 사용한 (+)-${\alpha}$-tocopherol보다 우수한 활성을 나타냄을 확인하였다. 항균 활성 평가는 S. aureus, E. coli, P. aeruginosa, C. albicans 균주를 대상으로, disc diffusion assay와 broth microdilution assay를 이용하여 수행하였다. 그 결과 추출물, 분획물 및 THSG 모두 모든 균주에 대해 항균 활성을 나타냈으며, 특히 그람 양성균인 S. aureus에 대해 methyl paraben보다 우수한 항균력을 나타냄을 확인하였다. 본 연구의 결과는 하수오가 항산화, 세포 보호 및 항균력에 관한 천연 소재로의 활용될 수 있는 가능성을 시사한다.

닭에서 분리된 조류 병원성 대장균의 항생제 내성 양상 (Antibiotic resistance pattern of avian pathogenic Escherichia coli isolated from chickens)

  • 김명숙;권혁무;성환우
    • 대한수의학회지
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    • 제49권3호
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    • pp.195-200
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    • 2009
  • Avian pathogenic Escherichia coli (APEC) is an important bacterial pathogen of chickens and causes colibacillosis such as airsacculitis, perihepatitis, omphalitis, peritonitis, salpingitis, and pericarditis. As the transfer of antibiotic resistance from animal to humans can be possible, surveillance on antibiotic resistance of APEC is very important. A total 34 APEC isolates from diseased chickens during the period from 2007 to 2009 were obtained. The susceptibility of the isolates to 13 antibiotics was determined by disc diffusion assay. Resistance to erythromycin was found in 97.1% of APEC isolated, followed by resistance to tetracycline (85.3%), doxycycline (82.3%), ampicillin (73.5%), sulfisoxazole (67.6%), enrofloxacin (67.6%), ciprofloxacin (64.7%), norfloxacin (61.7%) trimethoprim/sulfamethoxazole (52.9%), gentamycin (26.5%), amoxicillin (8.8%), colistin (5.9%), and amikacin (2.9%). The blaTEM genes were detected in 25 (100%) of the 25 ampicillin-resistant APEC isolates. Among the 29 tetracycline-resistant APEC isolates, tetA and tetB genes were detected in 18 (62.1%) and 9 (31%) isolates, respectively. Twenty six (76.5%) isolates were multiresistant to at least 6 antibiotics and seven (20.1%) isolates were multiresistant to at least 10 antibiotics. This results indicated that multiple antibiotic-resistant APEC is widespread in chicken flocks in Korea.

Antibacterial Activity of Recombinant Pig Intestinal Parasite Cecropin P4 Peptide Secreted from Pichia pastoris

  • Song, Ki-Duk;Lee, Woon-Kyu
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제27권2호
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    • pp.278-283
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    • 2014
  • Cecropins (Cec) are antibacterial peptides and their expression is induced in a pig intestinal parasite Ascaris suum by bacterial infection. To explore the usefulness of its activity as an antibiotic, CecP4 cDNA was prepared and cloned into the pPICZ B expression vector and followed by the integration into AOX1 locus in Pichia pastoris. The supernatants from cell culture were collected after methanol induction and concentrated for the test of antimicrobial activity. The recombinant P. patoris having CecP4 showed antimicrobial activity when tested against Staphyllococcus aureus in disc diffusion assay. We selected one of the CecP4 clones (CecP4-2) and performed further studies with it. The growth of recombinant P. pastoris was optimized using various concentration of methanol, and it was found that 2% methanol in the culture induced more antibacterial activity, compared to 1% methanol. We extended the test of antimicrobial activity by applying the concentrated supernatant of CecP4 culture to Pseudomonas aeruginosa and E. coli respectively. Recombinant CecP4 also showed antimicrobial activity against both Pseudomona and E. coli, suggesting the broad spectrum of its antimicrobial activity. After improvements for the scale-up, it will be feasible to use recombinant CecP4 for supplementation to the feed to control microbial infections in young animals, such as piglets.

Antioxidant and Antimicrobial Activities of Quinoa (Chenopodium quinoa Willd.) Seeds Cultivated in Korea

  • Park, Jin Hwa;Lee, Yun Jin;Kim, Yeon Ho;Yoon, Ki Sun
    • Preventive Nutrition and Food Science
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    • 제22권3호
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    • pp.195-202
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    • 2017
  • The objective of this study was to investigate the antioxidant and antimicrobial properties of quinoa cultivated in Korea and to compare it with imported quinoa from the USA and Peru. The highest amount of total flavonoid contents (TFC) with 20.91 mg quercetin equivalents/100 g was measured in quinoa seed extract cultivated in Korea, while the total phenolic contents (TPC) were significantly higher in quinoa from the USA (16.28 mg gallic acid equivalents/100 g). In addition, quinoa extracts cultivated in Korea displayed a superior antioxidant ability in both, ferric reducing antioxidant power and 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl values. There was a high correlation between TFC and antioxidant activity and a low correlation between TPC and antioxidant activity. The antimicrobial activity of the quinoa extracts was determined using a disc diffusion assay and optical density method. In both assays, the quinoa seed extracts did not have strong antimicrobial activity against foodborne bacteria, including Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Bacillus cereus, Escherichia coli, Salmonella Typhimurium, and Campylobacter jejuni.

Evaluation of antimicrobial activity and total phenolic content of three Pinus species

  • Kim, Hyeusoo;Lee, Byongsoon;Yun, Kyeong Won
    • Journal of Ecology and Environment
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    • 제36권1호
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    • pp.57-63
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    • 2013
  • This study compared the antimicrobial activity and total phenolic content of three Pinus plants (Pinus densiflora, P. thunbergii, P. rigida) for the first time. The antimicrobial activity of the water fraction of methanol extract of fresh leaves was stronger than that of fallen leaves at any concentrations. The water fraction of crude methanol extract from fresh leaves of P. thunbergii showed a higher growth inhibitory activity against gram-positive and gram-negative bacteria than that of P. densiflora and P. rigida. The results from the disc diffusion method followed by measurements of minimal inhibition concentration (MIC) indicate that Bacillus subtilis was the most sensitive microorganism with the lowest MIC value. The highest total phenolic content was found in fresh leaves of P. rigida and P. thunbergii. The assay showed that the fresh leaves of the three Pinus plants contained higher total phenolic content than fallen leaves of the three plants. The antimicrobial activity was related with the total phenolic content.