Marine microalgae are a promising source of organisms that can be cultured and targeted to isolate the broad spectrum of functional metabolites. In this study, two species of cyanobacteria, Chlorella ovalis Butcher and Nannchloropsis oculata Droop, one species of bacillariophyta, Phaeoductylum tricornutum Bohlin, and one species of Dinophyceae, Amphidinium carterae (Hulburt) were cultured and biomasses used to evaluate the proximate comical compositions. Among the determined proximate chemical compositions of the cultured marine microalgae, the highest content of crude proteins and lipids were exhibited in P. tricornutum and A. carterae, respectively. Solvent-solvent partition chromatography was subjected to fractionate each of the cultured species and separated n-hexane, chloroform, ethyl acetate, and aqueous fractions. Nitric oxide production inhibitory level (%) and cytotoxicity effect on lipo-polysaccharide-induced RAW 264.7 macrophages were performed to determine the anti-inflammatory activity. N. oculata hexane and chloroform fractions showed significantly the strongest anti-inflammatory activity at $6.25{\mu}g\;mL^{-1}$ concentration. The cancer cell growth inhibition (%) was determined on three different cell lines including HL-60 (a human promyelocytic leukemia cell line), A549 (a human lung carcinoma cell line), and B16F10 (a mouse melanoma cell line), respectively. Among the extracts, C. ovalis ethyl acetate and A. carterae chloroform fractions suppressed the growth of HL-60 cells significantly at 25 and $50{\mu}g\;mL^{-1}$ concentrations. Thus, the cultured marine microalgae solvent extracts may have potentiality to isolate pharmacologically active metabolites further using advance chromatographic steps. Hence, the cultured marine microalgae can be described as a good candidate for the future therapeutic uses.
Marine microalgae are a key diet component in finfish and shellfish aquaculture. Cryopreservation of the microalgae is suggested by many other studies as the best method for long-term storage. To test cryopreservation efficacy, 19 taxas of marine microalgal species were examined. In the first experiment we compared dimethylsulfoxide ($Me_2SO$) and glycerol, which are most widely used as cryoprotectant agents (CPAs). The cryopreservation comprised two freezing procedures. Firstly, the samples containing the CPAs were kept at $4^{\circ}C$ for 10 min before being plunged into liquid nitrogen ($-196^{\circ}C$). Secondly, samples containing CPAs were pre-cooled ($-1^{\circ}C$$min^{-1}$ to $-80^{\circ}C$ before being plunged into liquid nitrogen. Most of the species were successfully cryopreserved using $Me_2SO$, whereas the Prasinophyceae (T. striata and T. suecica) were successfully cryopreserved using glycerol. In general, the cooling method had no influence on the survival of the microalgae except in the case of the Tetraselmis species. In the second experiment, the cultured solution was divided before cryopreservation into concentrated and non-concentrated groups to identify the effect of cell density during cryopreservation. After 12 months of storage, the samples were again divided into centrifugation and non-centrifugation groups to learn the effect of $Me_2SO$ on the culture. Viability and growth of the microalgae were not influenced by cell density or the centrifugal removal of the $Me_2SO$ after thawing.
Molecular biology and microalgal biotechnology have the potential to play a major role in improving the production efficiency of a vast variety of products including functional foods, industrial chemicals, compounds with therapeutic applications and bioremediation solutions from a virtually untapped source. Microalgae are a source of natural products and have been recently studied for biotechnological applications. Efficient genetic transformation systems in microalgae are necessary to enhance their potential to be used for human health. A microalga such as Chlarella is a eukaryotic organism sharing its metabolic pathways with higher plants. This microalga is capable of expressing, glycosylating, and correctly processing proteins which normally undergo post-translational modification. Moreover, it can be cultured inexpensively because it requires only limited amount of sunlight and carbon dioxide as energy sources. Because of these advantages, Chlarella may be of great potential interest in biotechnology as a good candidate for bioreactor in the production of pharmaceutical and industrial compounds for human functional foods. Here, we briefly discuss recent progress in microalgal transgenesis that has utilized molecular biology to produce functional proteins and bioactive compounds.
KANG, Man-Gu;LIM, Su Yeon;LEE, Chang-Hyeok;BAEK, Hyang Ran;SHIN, Jong-Ahm
Journal of Fisheries and Marine Sciences Education
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v.29
no.2
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pp.552-559
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2017
To assess the effect of LED lights on marine microalgae growth in the laboatory, Tetraselmis suecica, Chaetoceros simplex and Isochrysis galbana were cultured under $20{\pm}1^{\circ}C$, Walne's medium and aeration using 3.6 L glass vessels. The LED light sources were Blue, Red, Blue+Red, CoolWhite and WarmWhite. The experiments were conducted three times. The density of microalgae was shown as the counted number of cells per day, and the specific growth rate was calculated by using the density. The statistical analysis was performed by analysis of variance using the SPSS 20.0 program. T. suecica culture was the highest density under the Blue LED light source, so the light source was the most effective for the growth of this alga. C. simplex and I. galbana culture had the highest density under the Blue+Red LED light source, therefore this light source was the most effective for the growth of these algae. The result of analysis of variance showed significant between groups.
Park, Jin-Chul;Lee, Bae-Ik;Park, Heum-Gi;Kwon, O-Nam
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.43
no.6
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pp.654-658
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2010
The purpose of this study is to establish methods for enhancing the survival and growth of cold-water fish and crustacean larvae based on the nutritional components of zoo and phyto live foods. Rotifers, Brachionus rotundiformis, were cultured with a supplement of freshwater condensed Chlorella vulgaris at $28^{\circ}C$ and enriched with Algamac $2000^{(R)}$ at 16, 20 and $26^{\circ}C$, respectively. Isochrysis galbana, Chaetoceros calcitrans and Chlorella ellipsoidea were centrifuged for component analysis after being cultured for approximately one week with conway medium at $20^{\circ}C$. The crude protein and lipid contents of the rotifers were 58.4% and 10.9%, respectively, before enrichment. After enrichment at each temperature, total protein and essential amino acid contents were increased by reducing the enrichment temperature. However, unsaturated fatty acids and multiple fatty acid index (UI) showed their highest values at $20^{\circ}C$. Mono-unsaturated fatty acid content was highest (72.6%) at $16^{\circ}C$. The total protein contents of C. calcitrans and C. ellipsoidea were higher, 33.0% and 35.2%, respectively, than that of I. galbana, 27.8%. Methionin, leusine and histidine, essential amino acids of C. ellipsoidea, had considerably higher values, 50.2, 287.2 and 68.1 mg/g dry matter, respectively, compared to other microalgae. Total lipids, UI, DHA and n-3 PUFA of I. galbana had higher values, 23.6, 272.0, 12.9% and 45.2%, respectively, than other microalgae. Therefore, for cold-water fish and crustacean larvae that require high n-3 PUFA and DHA contents, enrichment of rotifers is desirable at $20^{\circ}C$. Fish larvae would also need more I. galbana than other microalgae.
Incidents of seafood and massive fish kills have been rapidly increasing in both frequency and geographical distribution and the socioeconomic impacts brought by those incidents. However, the biological origins of those marine toxins have not been well clarified. Most of the marine organisms investigated are filter-feeder, which accumulate toxins from their food and/or their symbiotic microalgae. We have examined the action on rabbit platelets of marine toxins isolated from cultured dinoflagellates and sponge collected at Okinawa. Maitotoxin (MTX) is a water-soluble toxin isolated from the cultured dinoflagellate Gambierdiscus toxicus which causes a seafood poisoning in tropical regions. Zooxanthellatoxin A (ZT-A) was isolated from exteracts of cultured symbiotic dinoflagellate Symbiodinium sp. (socalled zooxanthella) from flatworms of the genus Amphiscolops collected at Okinawan marine sponge Theonella sp. MTX caused a disaggregation and a dissolution of large aggregates. ZT-A caused a dissolution of small aggregates followed by a increment of light tranmission. TZ-A caused an initial and transient shape change followed by a sustained aggregation and a increment of large aggregates. In conclusion, marine toxins exert unique patterns on the light trasmission and the size of aggregates in rabbit platelets by their concentrations and kinds
The aim of this study was to evaluate a temperature-induced two-stage cultivation (TTC) strategy for the regulation of lipid and carbohydrate production by two microalgae, Chlorella vulgaris and Dunaliella salina, for biofuel production. The microalgae were grown under several temperature conditions (15, 25, 35, and $45^{\circ}C$) and optimal growth was observed at $25^{\circ}C$ for both microalgae. To test the TTC, aseptically cultured microalgae were incubated under optimal conditions ($25^{\circ}C$) for 20 days, and then divided into four aliquots that were incubated at 15, 25, 35, and $45^{\circ}C$ for 5 days. Similar but somewhat decreased growth rates were observed at the non-optimal temperatures (15, 35, and $45^{\circ}C$). In addition, while total lipid accumulation increased in a temperature-dependent manner in both microalgae, total carbohydrate increased with temperature in C. vulgaris but decreased in D. salina. However, for lipid and carbohydrate production, while the highest lipid productions of C. vulgaris and D. salina were observed at $25^{\circ}C$ and $35^{\circ}C$, respectively, the highest total carbohydrate productions of C. vulgaris and D. salina were obtained at $15^{\circ}C$ and $25^{\circ}C$, respectively. These results suggest that the TTC strategy may be easily and efficiently applied to bioprocessing for biofuel production.
The quality and quantity of food organisms in fish seed production are important. The marine microalgae Nannochloropsis oculata are used as initial food organisms in the field. We investigated the effects of salinity (0, 10, 20, 30, 40 and 50 psu) on the lipid and fatty acid composition of N. oculata. Cultivation of N. oculata at varying salinities showed the highest growth rate at 20 psu. Total lipid content ranged from 17.26 to 18.63% at salinities from 0 to 50 psu). The nonpolar lipid content increased markedly at 30 psu and was highest at 15.55%. The polar lipid content was lowest at 30 psu, by 84.45%. It was also found that the omega-3 and EPA contents were inversely proportional to salt concentration. For the polar and nonpolar lipid compositions, there was no significant effect of salinity. Omega-3 polyunsaturated fatty acid content especially the content of EPA in the seawater larvae is the essential fatty acid in this food organism. It is thus advantageous to culture N. oculata at 20 psu.
Rotifers of the genus Brachionus are commonly used as a live food for larval fish, and rotifers of different sizes are preferred according the mouth size of the fish. Rotifer species vary in size, and individual size can depend on the temperature and salinity of the rearing environment. We investigated the effects of temperature and salinity for two species, B. plicatilis (250-300 ${\mu}m$) and B. rotundiformis (100-220 ${\mu}m$). Two strains of B. plicatilis (CCUMP 36 and 48) and two strains of B. rotundiformis (CCUMP 51 and 56) were received from the Culture Collection of Useful Marine Plankton (CCUMP) at Pukyong National University and cultured with the green alga, Nannochloris oculata (KMMCC 16) from the Korea Marine Microalgal Culture Center (KMMCC). The growth and size of rotifers were examined at three water temperatures ($16^{\circ}C$, $24^{\circ}C$, $32^{\circ}C$) and four salinities (20 psu, 25 psu, 30 psu, 35 psu) under continuous light (40 ${\mu}molm^{-2}s^{-1}$). The maximum density and growth rate of B. rotundiformis were greater than those of B. plicatilis. The lorica length of B. plicatilis ranged from 215.4 to 269.7 ${\mu}m$ and from 154.9 to 206.6 ${\mu}m$ for B. rotundiformis, depending on strain, temperature and salinity. Rotifers were smaller when cultured at high temperatures, regardless of salinity. B. rotundiformis preferred higher salinity than B. plicatilis. The results demonstrated that the size of rotifers could be controlled to some extent by temperature and salinity.
Journal of the Korean Society of Marine Environment & Safety
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v.21
no.1
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pp.1-8
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2015
We investigated the effect of monochromatic light emitting diode (LED) on the growth of diatoms Nitzschia sp., Phaeodactylum tricornutum, Skeletonema sp. and green algae Chlorella vulgaris. The four microalgae species were cultured under blue LED (450 nm), yellow LED (590 nm), red LED (650 nm) and fluorescent lamp (mixed wavelengths). The maximum growth rates and cell densities of Nitzschia sp., P. tricornutum and Skeletonema sp. were highest under blue LED, followed by fluorescent lamp, red LED and then yellow LED, however those of C. vulgaris were highest under red LED. This result indicates that blue LED is favorable for the growth of diatoms. Thus, the growth of microalgae under monochromatic light might be species-specific or taxon-specific. Also, these results could be used as an important information in future for remediation of heavy metal contamination in the sediments using LED and microalgae.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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