오이녹반모자이크바이러스(Cucumber green mottle mosaic virus, CGMMV)는 오이 대목용 흑종호박(figleaf gourd)에 즙액 전염이 되지 않았으나, 2008년 충남 천안지역에서 CGMMV의 발병율이 100%를 나타내는 오이재배 하우스에서 채집한 이 대목은 RT-PCR에서 모두 바이러스가 검출되었다. 흑종호박에 오이를 접목한후 오이 잎에 CGMMV를 접종하여 RT-PCR을 실시한 결과, 흑종호박에서 목표 합성 DNA가 검출되었다. 검출된 DNA의 농도는 흑종호박 보다 오이에서 훨씬 높게 나타났다. 그러나 바이러스 입자는 대목 부위에서 검경이 되지 않았을 뿐만 아니라, Nicotiana benthamicana에도 감염이 되지 않았다. 대목에서 CGMMV 입자를 확인하기 위하여 흑종호박과 오이를 접목하여 상호 성장하게 한 후 오이 잎에 바이러스를 접종한 다음, 각각 식물체로부터 바이러스를 정제하였다. 오이 추출물에서는 전형적인 바이러스 순화 흡광도 곡선이 나타났지만, 흑종호박 추출물에서는 흡광도 곡선이 나타나지 않았고 단지 극소수의 바이러스 입자가 검경되었다. 이러한 결과에서 CGMMV의 입자는 대목으로 단순하게 이동이 확인되었지만, 흑종호박은 이 바이러스의 기주식물이 아님을 입증하였다.
Chlorophyll (Chl) fluorescence imaging was used to investigate the effectiveness of in vivo incorporation methods for two chemicals, 3-(3',4'-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea (DCMU) and methyl viologen (MV) in rice, a monocot, and cucumber, a dicot, leaves. four different methods (vacuum infiltration, floating, transpiration-aided incorporation through petiole and spraying) were compared, and $F_i$ and $F_v$/$F_m$ were chosen for the imaging of the DCMU- and MV-treated leaves, respectively. The effects of the chemicals in plants were generally heterogeneous over the whole leaf area. Moreover, the effectiveness of the treatment of a chemical in plant leaves was dependent on chemical species, plant species, concentration of the chemical, the treatment method, the duration of the treatment, the existence of light and detergent, etc. In conclusion, we suggest that to achieve the proposed effects of chemicals in plants for an actual experiment, these factors must be considered before the chemical treatment, and the best method for the treatment of the chemicals tested was floating and vacuum infiltration in the dicot and the monocot leaves, respectively, as drawn from Chl fluorescence imaging analysis.
Lee, Da Hyun;Kim, Jinki;Han, Jun Soo;Lee, Jae-Hyeon;Lee, ByulHaNa;Park, Chung Youl
Journal of Plant Biotechnology
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제47권2호
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pp.150-156
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2020
Weeds play an important role in the survival of viruses and are potential inoculum sources of viral diseases for crop plants. In this study, specimens of Pseudostellaria heterophylla exhibiting symptoms of the cucumber mosaic virus (CMV) were collected in Bonghwa, Korea. The characteristics of the disease were described and leaf RNA was extracted and sequenced to identify the virus. Three CMV contigs were obtained and PCR was performed using specific primer pairs. RNA from positive samples exhibiting CMV leaf symptoms was amplified to determine the coat protein. A sequence comparison of the coat protein gene from the CMV BH isolate shared the highest nucleotide identity (99.2%) with the CMV ZM isolate. Phylogenetic analysis showed that CMV-BH belonged to subgroup IA and that the most closely-related isolate was CMV-ZM. All test plants used for the biological assay were successfully infected with CMV and exhibited CMV disease symptoms such as blistering, mosaic, and vein yellowing. To our knowledge, this is the first report of CMV infection in P. heterophylla from Korea.
Virus-like symptoms including stunt, severe mosaic with malformation of leaves, fern-like leaves and abnormal petals were observed from an African impatiens (Impatiens walleriana) grown in a plant nursery in Icheon, Korea. Serological analysis using immuno-strip kits for viruses reported in African impatiens indicated that Cucumber mosaic virus (named CMV-Im) was a causal agent for the symptomatic African impatiens. Biological properties of CMV-Im were analyzed using responses of host plant species, suggesting that CMV-Im is a typical strain that belongs to CMV subgroup I. RT-PCR analysis verified CMV-Im infection from naturally infected African impatiens or mechanically inoculated some host species. Analysis of multiple alignments of CMV capsid protein (CP) sequences showed that CMV-Im shared high CP amino acids identities with other CMV strains. Phylogenetic tree analysis for the CP sequences of CMV-Im and representative CMV strains confirmed that CMV is a typical member of CMV subgroup I. To our knowledge, it is the first report of CMV in African impatiens in Korea.
Two strains of Cucumber mosaic virus (CMV) isolated in Kuwait were confirmed their infectivity based on symptomatology and host range on different cultivars of tomato (Lycopersicon esculentum), tobacco(Nicotiana tabacum L.) and squash (Cucurbita pepo). The pattern of symptoms differed for the two CMV strains in tomato and tobacco, showing severe stunting and mosaic symptoms with one strain designated KU2, and almost symptomless with the other strain designated KU1. A satellite RNA 5 (sat-RNA) was found to be associated with the KU1 strain and was characterized as a benign viral satellite RNA. Using reverse transcription and polymerase chain reaction (RT-PCR) with sat-RNA specific primers, an amplified PCR product of about 160bp was determined and analyzed by gel electrophoresis. This naturally occurring benign viral satellite RNA was successfully used as a biological control agent to protect tomato plants against the severe KU2 strain. Tomato plants grown in plant-growth chambers, were preinoculated with KU1 containing the benign viral satellite and then challenge inoculated with the severe KU2 strain at different time intervals. All plants challenged three weeks after preinoculation showed nearly complete protection from subsequent infection by the severe strain. This biological control technology using plant viruses was found protective and could be successfully established sooner after the preinoculation.
Cultivation of a biocontrol agent on a certain medium often results in reduced biocontrol efficacy and alters physiological state. In our previous study, Burkholderia gladioli strain B543 with long-term subculture on tryptic soy agar resulted in significantly reduced biocontrol ability against cucumber damping-off caused by P. ultimum. Therefore, we investigated the influence of laboratory culturing media on biocontrol activity and physiological state of Burkholderia gladioli strain B543 by using long-term repeated culture on a certain medium. When isolate B543 were successionally cultured on King's B agar (KBA), tryptic soy agar, nutrient agar (NA), or soil extract agar more than 20 times, the isolate cultured on KBA or NA showed a significantly enhanced biocontrol efficacy and higher population density in the rhizosphere of cucumber compared to that of the others. However, the isolates cultured on KBA more than 20 times showed the lowest production of protease, siderophore, or antifungal substance(s), measured by skim milk agar, Chrome-Azurol-S agar, and potato dextrose agar amended with 10% of the culture filtrate, respectively. Our results suggest that adaptation to proper culturing medium can alter biocontrol ability and physiological state, and we must consider laboratory media in optimizing the use of biocontrol agents.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제30권2호
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pp.159-167
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2014
Molecular and biological characteristics of an isolate of Cucumber mosaic virus (CMV) from Glycine soja (wild soybean), named as CMV-209, was examined in this study. Comparison of nucleotide sequences and phylogenetic analyses of CMV-209 with the other CMV strains revealed that CMV-209 belonged to CMV subgroup I. However, CMV-209 showed some genetic distance from the CMV strains assigned to subgroup IA or subgroup IB. Infectious full-genome cDNA clones of CMV-209 were generated under the control of the Cauliflower mosaic virus 35S promoter. Infectivity of the CMV-209 clones was evaluated in Nicotiana benthamiana and various legume species. Our assays revealed that CMV-209 could systemically infect Glycine soja (wild soybean) and Pisum sativum (pea) as well as N. benthamiana, but not the other legume species.
This experiment was carried out to examine the effect of various functional materials such as bioceramic podwers, crushed shells and elvanites supplemented to the each substrate on the seedlings growth of cucumber, watermelon and tomato. The seedlings were grown in pots filled with substrates of bioceramic podwers, crushed shell and elvanites. The growth of cucumber seedlings in terms of plant height, stem diameter, leaf width, leaf area, plant fresh and dry weight was promoted by adding the bioceramic. powder (1 to 2g/kg), crushed shells (20 to 80g/kg) or elvanites (20 to 80g/kg). Watermelon seedlings in terms of plant height, number of leaves and leaf area were greater than those of the control by adding bioceramics (1 to 2g/kg). Plant height was also promoted by the adding of bioceramic power from 16 days after treatment. But leaf area was increased from 8 days after treatment, while stem diameter was not affected. Watermelon seedlings were also influenced by adding curshed shells (20 to 80g/kg) and elvanites (20 to 40g/kg) into each substrate. The growth of characteristics of tomato seedlings were promoted by adding 1 to 3g/kg of bioceramics, 10 to 80g/kg of crushed shell or 20 to 40g/kg of elvanites, respectively. Especially, root growth was greatly influenced by bioceramic powder, whereas the shoot growth(leaves and stem) was stimulated by crushed shells and elvanites suppemented into substrate.
Phan, Mi Sa Vo;Seo, Jang-Kyun;Choi, Hong-Soo;Lee, Su-Heon;Kim, Kook-Hyung
The Plant Pathology Journal
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제30권3호
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pp.316-322
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2014
Recently, a Cucumber mosaic virus (CMV) strain, named as CMV-209, was isolated from Glycine soja. In this study, symptom expression of CMV-209 was analyzed in detail in Nicotiana benthamiana by comparing with that of CMV-Fny, which is a representative strain of CMV. Using infectious cDNA clones of CMV strains 209 and Fny, symptom expression of various pseudorecombinants between these two strains were examined in the early and late infection stages. In the early infection stage, the pseudorecombinants containing Fny-RNA2 induced stunting and leaf distortion on the newly emerged leaves whereas the pseudorecombinants containing 209-RNA2 caused no obvious symptoms. In the late infection stage, the pseudorecombinants containing 209-RNA1 and Fny-RNA2 induced severe leaf distortion and stunting, while CMV-209 induced mild symptom and CMV-Fny caused typical mosaic, general stunting, and leaf distortion symptoms, indicating that RNA 2 encodes a symptom determinant(s) of CMV, which is capable of enhancing symptoms. Furthermore, our results support the possibility that natural recombination between compatible viruses can result in emergence of novel viruses causing severe damages in crop fields.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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