This experiment was performed to investigate whether 50% ethanol extracts of the combined-preparation of Longanae Arilus, Chrysanthemi Flos, Zizyphi Fructus and Ginseng Radix alba (CPE) has hypnotic effects and/or enhances pentobarbital-induced sleeping time. Locomotor activity was evaluated using a ambulometer of tilting-type. The sedative-hypnotic effects were evaluated by measuring the sleeping onset time and sleeping time in pentobarbital-treated mice 30 min. after oral administration of CPE and muscimol. The intracellular $Cl^-$ concentration of cerebellar granule cells was estimated using $Cl^-$ sensitive fluorescence probe N-(ethoxycarbonylmethyl)-6-methoxyquinolinium (MQAE). CPE (150 mg/kg) decreased the locomotor activity, but CPE itself did not induce sleep. However, CPE reduced sleeping onset and prolonged sleeping time induced by pentobarbital (42 mg/kg). In addition, CPE (2 ${\mu}g/ml$) and pentobarbital (2.5 ${\mu}M$) itself did not affect on the chloride influx in primary cultured cerebellar granule cells, but the combination of CPE and pentobarbital (2.5 ${\mu}M$) increased the chloride influx onto the cells. In conclusion, it is suggested that CPE might augment pentobarbital-induced sleep through the increase of chloride influx.
An assay for cytochrome P450 monooxygenase activity by determination of the products of organophosphate oxidation via inhibition of acetylcholinesterase was described. Extracts from strains of Oryzaephilus surinamensis selected for resistance to chlorpyrifos-methyl (QVOS 102), fenitrothion (VOS F) and malathion (VOS 3), and a standard susceptible strain VOS 48, were incubated with an organophosphate in the presence of a NADPH-generating system and acetylcholinesterase. The degree of inhibition of the acetylchoinesterase activity was converted to manooxygenase activity using standard curves for the inhibition of acetylcholiesterase by chlorpyrifos-methyl-oxon, fenitrooxon and malaoxan. Activity was detectable in VOS 48 and was present at different increased levels with the different organophosphates in the three resistant strains, suggesting that different forms of P450 might be involved in organophosphate oxidation in these insects. The assays were carried out using crude insect homogenates and much smaller samples of insect material than the standard aldrin to dieldrin assay. It should be possible to use the method for determination of monooxygenase activity in single insert.
The aim of this investigation was to evaluate antioxidant activity of crude extracts from the halophyte Vitex rotundifolia, their solvent fractions, and isolated compounds (1-3). Antioxidant capacity was determined by measuring DPPH radical, and authentic $ONOO^-$ and $ONOO^-$ generated from 3- morpholinsydnonimine (SIN-1) in vitro as well as degree of occurrence of intracellular ROS, NO and GSH in mouse macrophage Raw 264.7 cells. From comparative analysis, MeOH extract, n-BuOH, and 85% aq. MeOH solvent fractions showed significant antioxidant effect in DPPH radical and $ONOO^-$ assay systems. Activity-guided purification of n-BuOH and 85% aq. MeOH fractions led to the isolation of flavonoids 1-3. Among them, compound 1 exhibited excellent antioxidant effect in all bioassay systems tested. On the other hand, compounds 2 and 3 revealed potent inhibitory effect against $ONOO^-$ generated from SIN-1, comparable with the positive control penicillamine.
Each parching Anemarrhenae Rhizoma with 25% ethanol and normal saline has been used for anti-inflammatory, expectorant, antipyretic, sedative and diuretic, and so on. In order to investigate the differences of referential efficacy about each fractionated part of the aqueous extracts, pharmacological studies were carried out. The results of studies were summerized as follows : 1. By the administration of 25% ethanol treated preparation (F-I-1), the increase in urinary volume and $Na^+$ extraction was significantly recognized. 2. The excretion of electrolyte $Na^+$ by saline solution treated preparation (F-II-1) was significantly recognised in normal rats. 3. The increase of urinary volume and urinary $Na^+$ and $Cl^-$ excretion by F-I-1 and n-butanol insoluble parts of F-I-1 (F-I-3) was significantly recognized in $HgCl_2-induced$ acute renal failure of rats. 4. The increase of plasma $Na^+$ by F-I-1 and urea nitrogen by F-I-1 and F-I-3 in acute renal failure of rats was significantly recognized. 5. The increase of urinary volume by F-I-1 and F-I-3 was recognised in mice.
Methanol and aqueous extract of leaves of Trema orientalis Linn. were subjected to the potential antioxidant and antibacterial activities. The pharmacological interest of this plant coupled with traditional use (antidiarrhoeal, antiseptic, analgesic etc) prompted to test for antioxidant and antibacterial activities. The antioxidant potential of the methanolic extract was determined on the basis of their scavenging activity of the stable 1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl free radical. $IC_{50}$ of the methanol extract of T. orientalis was $110.25\;{\mu}g/ml$ which indicated the strong antioxidant activity of the plant. However the aqueous extract showed mild antioxidant activity. In case of antibacterial activities test, the extract was subjected for its effectiveness against both Gram-positive and Gram-negative bacteria in agar diffusion method. The zones of inhibition produced by the crude methanol and aqueous extract against few sensitive strains were measured and compared with those of standard antibiotic Gentamycin. It is evident that both extracts are active against the bacteria at low concentrations. The obtained results provide a support for the use of this plant in traditional medicine and suggest its further advance investigation.
This study was carried out to analyze chemical components in burley tobacco using near infrared spectroscopy(NIRS). Samples were collected in '96 and '97 crop year. Calibration equations were developed by modified partial least square. The standard error performance(SEP) of '96 crop year samples between NIRS and standard laboratory analysis were 0.25% for nicotine, 0.18% for total nitrogen, 0.59% for crude ash, 0.32% for ether extracts, and 0.14% for chlorine, respectively. The analytical results of '97 crop year samples were similar to those of '96 crop year samples. The analytical result of '97 crop year samples analyzed by '96 calibration equation was more inaccurate than that of '96 crop year samples. The SEP of '96 or '97 crop year samples applying calibration equation derived from '96 plus '97 crop year samples was similar to that of '96 or '97 crop year samples analyzed by '96 or '97 calibration equation, respectively. The SEP of '97 crop year samples analyzed by calibration equation derived from '96 plus '97 crop year samples was more accurate than that of '97 crop year samples analyzed by '96 calibration equation. To improve the analytical inaccuracy caused by the difference of crop year between calibration and prediction samples, we need to include the prediction sample spectra which were different from calibration sample spectra in recalibration sample spectra, and then develop recalibration equation. The NIRS can apply to analyze burley leaf tobacco, leaf process or tobacco manufacturing process which were required the rapid analytical result.
Such extraction conditions as the kinds of solvent, extracting temperature, extracting time, ratio of material to solvent and particle size of material, were studied to maximize the extraction of oleoresin from chipi. Larger amount of soluble solids were extracted from seeds with nonpolar solvents (hexane, pentane, ether) for extraction, because the seeds contained large amount of crude fats and monoterpene(limonene) volatile compounds. Larger amount of soluble solids were extracted from peel with polar solvents(methanol, ethanol) of extraction because of large amount of water soluble colors, sugars and oxygenated terpene bolatile compounds in the peel. The application of the solvents in intermediate polarity (dichloromethane, acetone) resulted in more effective extraction of soluble solid and volatile compounds. Expecially, dichloromethane was an excellent solvent in extraction of volatile compounds. In the concern of volatile compound recovery yield, the optimum extraction conditions, such as temperature, time, mixing ratio of material to dichloromethane and mean particle size, were $25^{\circ}C$, 10min, 1:10(w/v), 355~250${\mu}{\textrm}{m}$ for chopi peels and 3$0^{\circ}C$, 10min, 1:8(w/v), 355~250${\mu}{\textrm}{m}$ for chopi seeds, respectively.
Endogenous cannabinoids (endocannabinoids) display various pharmacological effects including pain control, anti-inflammation, and neuroprotection. The synthesis and release of endocannabinoids are regulated under both physiological and pathological conditions. The main degrading enzyme of endocannabinoid is fatty acid amide hydrolase (FAAH). Therefore we have developed the fluorescence-based assay system for FAAH. We established stable CosM6 cell lines expressing human FAAH. We also synthesized 2-oxo-2H-chromen-7-yl decanoate (DAEC) as a fluorogenic substrate for FAAH. When crude membrane extracts stably expressing FAAH was incubated with DAEC at $25^{\circ}C$, FAAH reacted specifically to DAEC and catalyzes the hydrolysis of DAEC into decanoic acid and highly fluorescent coumarin. Furthermore, the serin hydrolase inhibitor, phenylmethanesulfonylfluoride, inhibited the coumarin release to the reaction buffer in concentration dependent manner. This assay system is suitable for high-throughput screening since this system has simple experimental procedure and measurement method.
Lim, Hee-Kyoung;Yoo, Eun-Sook;Moon, Jeong-Yong;Jeon, You-Jin;Cho, So-Mi K.
Food Science and Biotechnology
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제15권2호
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pp.312-316
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2006
Crude extract of young dangyuja (Citrus grandis Osbeck) fruit was investigated for its antioxidant activity as measured by 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) free radical scavenging activity. Among the samples, including 4 Citrus species and various solvent-extracted-fractions of young dangyuja fruit, the water-extracted fraction (WF) and butanol-extracted fraction (BF) showed the greatest DPPH free radical scavenging activity. WF and BF were further examined for their antioxidant activities by three different in vitro assays. The cell viability tests using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reduction assay showed that both fractions significantly reduced $H_2O_2$-induced cytotoxicity in HepG2 cells dose-dependently. Generation of the reactive oxygen species (ROS) was also reduced in cells pretreated with both fractions. In addition, BF showed a higher level of lipid peroxidation inhibitory capacity than WF in $H_2O_2$-treated HepG2 cells. Taken together, these results indicate that young dangyuja fruit can be used as an easily accessible source of natural antioxidants.
The effects of total ginseng saponin. extracts of Panax ginseng C.A. Meyer, on the differentiation of F9 teratocarcinoma stem cells were studied. F9 stem cells cultured in the presence of ginseng saponin together with dibutyric cAMP became parietal endoderm - like cells. Moreover, the expressions of differentiation marker genes. laminin. type IV collagen. and retinoic acid $receptor-{\beta}(RAR{\beta})$ were increased after treatment of ginseng saponin. Among various ginsenosides purified from crude ginseng saponin, $Rh_1\;and\;Rh_2$ caused the differentiation of F9 cells most effectively. Since ginsenosides and steroid hormone show resemblance in chemical structure. we studied the possibility of the involvement of a steroid receptor in the differentiation process induced by ginsenosides. According to Southwestern blot analysis, a 94 kDa protein regarding as a steroid receptor was detected in F9 cells cultured in the medium containing ginseng saponin. Based on these data, we suggest that ginseng saponin, especially ginsenosides $Rh_1\;and\;Rh_2$ cause the differentiation of F9 cells and the effects of ginsenosides might be exerted via binding with a steroid receptor or its analogous nuclear receptor.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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