Kim, Seok Ju;Lee, Kyung-Tae;Youe, Won-Jae;Lee, Sung-Suk;Kim, Yong Sik
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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v.42
no.6
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pp.740-746
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2014
The unripe fruit of cudrania tricuspidata was extracted with 50% ethanol. The crude water-soluble extracts were separated by liquid-liquid separation with n-hexane, ethyl acetate and butanol followed by precipitation with ethanol, and then the water-soluble polysaccharide (F1) was isolated by the fractionation through gel permeation chromatography using preparative PLaquagel-OH column with water. The structure was characterized by monosaccharide composition with HPAEC-PAD, methylation analysis with GC-MS, FT-IR and HPLC. According to the data, F1 was com posed of glucose (22.84 mM), galactose (13.75 mM), arabinose (45.87 mM), xylose (7.49 mM). It was revealed which uronic acid and acetyl group were not attached in F1. And it is constituted of 1-linked arabinose, 1,4-linked arabinose, 1,3-linked glucose, 1,4-linked galactose, 1,4-linked glucose, 1,3,6-linked galactose, 1,3,6-linked glucose and the ratio was showed 1.1 : 1.0 : 4.9 : 7.5 : 3.0 : 3.1 : 1.4 : 1.5.
Kim, Su-Jin;Kim, Sang-Min;Kang, Suk-Woo;Um, Byung-Hun
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.42
no.4
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pp.414-419
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2010
Hyphenated-HPLC techniques combine the separation power of HPLC with the structural and bioactivity information provided by NMR, ESI/MS, and an on-line antioxidant screening system. The major advantages over the traditional off-line techniques are rapidity and efficiency. In this study, we used hyphenated HPLC techniques including online HPLC-ABTS, LC-NMR, and LC-MS todirectly identify the major antioxidants of safflower (Carthamus tinctorius L.) seeds. The results demonstrated that the major antioxidant compounds from on-line HPLC-ABTS analysis were identified as 8'-hydroxyarcgenin-4'-O-$\beta$-D-glucoside, N-(p-coumaroyl) serotonin, and N-feruloylserotonin. Among them, N-feruloylserotonin accounted for almost 50% of the ABTS radical scavenging activity of the total extract. The results demonstrate that HPLC hyphenated techniques can be used to rapidly screen and structurally identify antioxidants from crude plant extracts.
Changes in the amount of ribulose 1, 5-bisphosphate carboxylase/oygenase(=RuBisCO) protein, namely fraction I protein, and the protease activity were determined in the 10th leaf of tobacco(Nicotiana tabacum, var. Ky-57) from 10 days after emergence through senescence at 5 days interval. The amount of RuBisCO per deveined leaf rapidly increased during the early growing season, reached a maximal quantity at the around 20 days after leaf emergence, when the leaf has gone through its most rapid expansion, and began gradually to decrease till 30 days after leaf emergence, thereafter significantly declined to 45 days that the leaf has been dried up partly. The pattern of the ratio of RuBisCO protein to soluble protein in quantity changed similar to that of RuBisCO contents in a leaf, that was 43%, 60%, and 21% at the around 10 days, 20 days, and 45 days, respectively. And RuBisCO contents was linearly correlated with the concentration of chlorophyll(r=0.98) throughout the life span of the leaf. So, it was assumed that the leaf color can be a useful indicator for judging whether RuBisCO contents higher or not in tobacco leaves without homogenization. On the other hand, the protease activities for degradation of casein were assayed at pH 5.5. 7.0. and 8.5 with crude extracts desalted on Sephadex G-25. The highest caseolytic activity was found at pH 5.5 throughout the life sawn of the leaf. Also, the activity at 5.5 became gradually to increase from 30 days after leaf emergence, when RuBisCO protein had became to disappear and remarkably increased in the last stage of senescence, although nitrogen contents of the leaf had reached low levels. The caseolytic activity at pH 5.5 was in negative correlation with RuBisCO contents throughout the life span of the leaf, but not in lineality between them. In other words, the caseolytic activity increased in a rapid exponential manner when RuBisCO contents had reached some low levels. These results showed that the leaf age, namely harvesting time, is a very important factor for the production of the tobacco leaf containing higher RuBisCO protein. It was concluded that the practical harvesting time is between 20 days and 30 days after the leaf emergence from the present results.
Kim, Suk-Weon;Kwon, Yong-Kook;Kim, Jong-Hyun;Liu, Jang-R.
Journal of Plant Biotechnology
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v.37
no.1
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pp.12-24
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2010
Plant metabolomics is a research field for identifying all of the metabolites found in a certain plant cell, tissue, organ, or whole plant in a given time and conditions and for studying changes in metabolic profiling as time goes or conditions change. Metabolomics is one of the most recently developed omics for holistic approach to biology and is a kind of systems biology. Metabolomics or metabolite fingerprinting techniques usually involves collecting spectra of crude solvent extracts without purification and separation of pure compounds or not in standardized conditions. Therefore, that requires a high degree of reproducibility, which can be achieved by using a standardized method for sample preparation and data acquisition and analysis. In plant biology, metabolomics is applied for various research fields including rapid discrimination between plant species, cultivar and GM plants, metabolic evaluation of commercial food stocks and medicinal herbs, understanding various physiological, stress responses, and determination of gene functions. Recently, plant metabolomics is applied for characterization of gene function often in combination with transcriptomics by analyzing tagged mutants of the model plants of Arabidopsis and rice. The use of plant metabolomics combined by transcriptomics in functional genomics will be the challenge for the coming year. This review paper attempted to introduce current status and prospects of plant metabolomics research.
Among 53 Acinetobacter baumannii isolates collected in 2004, nine imipenem-resistant isolates were obtained from clinical specimens taken from patients hospitalized in Busan, Korea. Nine carbapenemase-producing isolates were further investigated in order to determine the mechanisms underlying resistance. These isolates were then analyzed via antibiotic susceptibility testing, microbiological tests of carbapenemase activity, pI determination, transconjugation test, enterobacterial repetitive consensus (ERIC)-PCR, and DNA sequencing. One outbreak involved seven cases of infection by A. baumannii producing OXA-23 ${\beta}-lactamase$, and was found to have been caused by a single ERIC-PCR clone. During the study period, the other outbreak involved two cases of infection by A. baumannii producing IMP-1 ${\beta}-lactamase$. The two clones, one from each of the outbreaks, were characterized via a modified cloverleaf synergy test and an EDTA-disk synergy test. The isoelectric focusing of the crude bacterial extracts detected nitrocefin-positive bands with pI values of 6.65 (OXA-23) and 9.0 (IMP-1). The PCR amplification and characterization of the amplicons via direct sequencing showed that the clonal isolates harbored $bla_{IMP-1}$ or $bla_{oxA-23}$ determinants. The two clones were characterized by a multidrug resistance phenotype that remained unaltered throughout the outbreak. This resistance encompassed penicillins, extended-spectrum cephalosporins, carbapenems, monobactams, and aminoglycosides. These results appear to show that the imipenem resistance observed among nine Korean A. baumannii isolates could be attributed to the spread of an IMP-lor OXA-23-producing clone. Our microbiological test of carbapenemase activity is a simple method for the screening of clinical isolates producing class D carbapenemase and/or class B $metallo-{\beta}-lactamase$, in order both to determine their clinical impact and to prevent further spread.
The parathion hydrolase (OPH) produced by Pseudomonas rhodesiae H5 was purified by ammonium sulfate precipitation, DEAE-Toyopearl 650M ion exchange chromatography and Sephadex gel filtration chromatography. Parathion hydrolase from crude extracts of P. rhodesiae H5 has two components designated as OPH $I_1$ and OPH $I_2$, Optimum pH and temperature of OPH $I_1$and OPH $I_2$ were pH 7.2 and $30^{\circ}C$, and pH 7.6 and $37^{\circ}C$, respectively. The activation energy of OPH $I_1$ for the hydrolysis of parathion was 3.01 ㎉/I, II, III in the temperature range of $4^{\circ}C$ to $30^{\circ}C$, and Michaelis constant ($K_m$) for parathion was 69.2 ${\mu}M$. The activation energy of OPH $I_2$ for the hydrolysis of parathion was 4.07㎉/㏖ in the temperature range of $4^{\circ}C$ to $37^{\circ}C$, and Michaelis constant for parathion was 150.9${\mu}M$. Furthermore OPH $I_1$ was completely inhibited by 1 mM $Ca^2+$, $Cu^2+$, $Mg^2+$, $Ni^2+$, but OPH $I_2$ was less inhibited than OPH $I_1$ by the metals used in this study.
Yun, Jong Sun;Hong, Eui Yon;Kim, Ik Hwan;Yun, Tae;Kim, Tae Su;Paek, Kee Yoeup
Horticultural Science & Technology
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v.18
no.4
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pp.513-517
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2000
This experiment was carried out to detect the cymbidium mosaic virus (CymMV) and the odontoglossum ringspot virus (ORSV) in the seed-derived plantlets of Phalaenopsis imported from Taiwan by one-step reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Simple and rapid crude plant extracts for RT-PCR were prepared. The reverse transcription step was performed at $42^{\circ}C$ for 45 min and the following thermal cycling scheme was used for 36 reaction cycles: template predenaturation at $96^{\circ}C$ for 2 min, template denaturation at $96^{\circ}C$ for 30 s, primer annealing at $60^{\circ}C$ for 30 s, and DNA synthesis at $72^{\circ}C$ for 1 min. Of the 40 seed-derived plantlets of Phalaenopsis imported from Taiwan, all of them were infected with CymMV, but ORSV was not detected.
To develop an effective use for poor-quality individually quick-frozen (IQF) oysters Crassostrea gigas stored for a long period, the extract conditions, quality characteristics, and optimum reaction flavoring (RF) conditions of a complex extract from these IQF oysters were investigated. The moisture, pH, and volatile basic nitrogen contents of IQF oysters stored for 18 months (18M-IQFO) were 77.9%, 6.32, and 17.9 mg/100 g, respectively. Three different kinds of extract were prepared from 18M-IQFO: a hot-water extract (HE), scrap enzymatic hydrolysate (EH), and complex extract (CE). The respective extracts contained 5.5, 8.6, and 6.6% crude protein and 281.7, 366.0, and 343.0 mg/100 g amino nitrogen, and had 811, 359, and 1,170 mL/kg extraction yields. The CE was superior to the traditional HE in terms of the extraction yield, amino-nitrogen content, and organoleptic qualities, except for the odor. To improve flavor via the Maillard reaction, the reaction system used to produce a desirable flavor comprised CE (Brix $30^{\circ}$), 0.4 M glucose, 0.4 M glycine, and 0.4 M cysteine solution (4:2:1:1, v/v). The reaction time and pH were the independent variables, and the sensory scores for baked potato odor, masking shellfish odor, and boiled meat odor were the dependent variables. The surface response methodology (RSM) analysis of the multiple responses optimization gave a reaction time of 120.6 minutes and pH 7.33 at $120^{\circ}C$. The reaction improved the flavor of CE considerably, as compared to that of the unreacted extract.
In the development of enteral foods for the patients with diarrhea, soybean hull, by-products of soybean processing, was used to prepare crude dietary fiber extracts (soybean hull fiber, SHF). Total dietary fiber content of SHF is 85% and their composition are 86.1% cellulose, 8.1% hemi-cellulose, and 4.7% lignin. The effects of SHF on the prevention of diarrhea were studied in animal. Spraque-Dawley (SD) rats were fed AIN93G diets containing 5% dietary fiber for 3days simultaneously inducing diarrhea with the phenolphthalein Mg citrate solution. On day 4, feces were collected at different time point. Dietary fibers used for the animal study were SHF, soybean cotyledon fiber (SCF), psyllium husk fiber (PHF), and chicory fiber (CF). ${\alpha}$-cellulose was used as a control. Body weight gain, calorie consumed and food efficiency ratio among the experimental groups were not different. However, water content in the feces of SHF group was significantly lower by 10%, compared with other groups at 24hrs. time point. This effect was even greater in the feces collected later than 24 hrs. time point. SHF seems to have a greater effects on slow the symptom of diarrhea. Based on the previous results, enteral food enriched with SHF were prepared and its effect was compared with other commercially available products from domestic or imported ones. Weight changes among experimental groups were not different, but the moisture content of feces consumed SHF enriched products were lower than that of other products. Approximately 10% decrease in water content was observed from feces collected at 24 hr time point. According to the sensory evaluation, overall acceptability of the enteral food enriched with SHF was 3.24 out of 5 indicating that taste of this product is acceptable.
Among 46 Acinetobacter baumannii isolates collected in 2004, two imipenem-resistant isolates were obtained from clinical specimens taken from patients hospitalized in Busan, Republic of Korea. Two carbapenemase-producing isolates were further investigated to determine the mechanism of resistance. These isolates were analyzed by antibiotic susceptibility testing, microbiological tests of carbapenemase activity, determination of pI, transconjugation test, enterobacterial repetitive consensus (ERIC)-PCR, and DNA sequencing. Two cases of infection by A. baumannii producing the IMP-1 ${\beta}$-lactamase were detected. The isolates were characterized by a modified cloverleaf synergy test and EDTA-disk synergy test. Isoelectric focusing of crude bacterial extracts revealed nitrocefin-positive bands with a pI value of 9.0. PCR amplification and characterization of the amplicons by direct sequencing indicated that the isolates carried a $bla_{IMP-l}$ determinant. The isolates were characterized by a multidrug resistance phenotype, including penicillins, extended-spectrum cephalosporins, carbapenems, and aminoglycosides. These results indicate that the observed imipenem resistance of two Korean A. baumannii isolates was due to the spread of an IMP-1-producing clone. Our microbiological test of carbapenemase activity is simple to screen class B metallo-${\beta}$-lactamase-producing clinical isolates to determine their clinical impact and to prevent further spread. This study shows that the $bla_{IMP-l}$ resistance determinant, which is emerging in Korea, may become an emerging therapeutic problem, since clinicians are advised not to use extended-spectrum cephalosporins, imipenem, and aminoglycosides. This observation emphasizes the importance of having effective control measures in Asian hospitals, such as early detection of colonized patients, isolation procedures, and a judicious use of antibiotics.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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