Cotyledon of Panax ginseng was cultured in the growth regulator-free Knudson C medium comprising only several kinds of mineral salts and sucrose. Shoot primordium or callus developed profusely from the cotyledonary tissue and finally plantlets were produced directly from the shoot primordium or indirectly through callus. Microscopic examination revealed that the epidermal cell as well as the mesophyll cell of the cotyledon became meristematic and divided, changing into multinucleate cell or multicellular body, eventually developing into either a shoot primordium or callus.
This study was carried out to investigate the changes and composition of the non-cellulosic neutral sugars in cell wall of soybean sprouts during growth. The composition of non-cellulosic neutral sugars in cell of soybean sprouts was rhamnose, fucose, xylose, arabinose, mannose, galactose and glucose. The galactose content of cell wall was higher than other non-cellulosic neutral sugars, and was remarkably decreased during growth. The major non-cellulosic sugars of pectic substances were rhamnose, arabinose, and galactose. The arabinose content of pectic substance was increased in cotyledon and hypocotyl during growth. The contents of non-cellulosic neutral sugars were decreased in hypocotyl during growth. The galactose content of pectic substance was higher in cotyledon than those in hypocotyl, and was increased in cotyledon. The content of rhamnose was higher in ionically associated pectic substance than that in covalently bounded pectic substance. The major non-cellulosic neutral sugars of hemicellulose were glucose, rhamnose, arabinose and galactose. The galactose of hemicellulose was decreased remarkably during growth.
Park, Jae-Sung;Yi, Gi-Hwan;Nam, Min-Hee;Park, Sun-Ho
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제6권1호
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pp.51-55
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2001
This study was conducted to establish a plant cell culture system for the production of medically important secondary metabolites from Xanthium strumarium. The effects of plant growth regulators including NAA, 2,4-D, kinetin, and ABA were examined in terms of callus induction, maintenance of callus and suspension cultures. It was shown that callus was induced upon treatment with NAA while embryo was induced after treatment with 2,4-D. Callus formation was further improved by treatment with ABA and NAA. The level of callusing increased by 17-29% for the seed case, cotyledon, leaf, and hypocotyl and by 96% in the case of the root. Suspension cell lines were established using calli produced from cotyledon, hypocotyl and root and cultured at 25$\^{C}$ under light conditions. The cells grew up to 15g/L with NAA 2ppm, BA 2ppm, and ABA 1ppm treatment. Supernatants of suspension cultures of cell lines derived from coyledon and hypocotyl produced some distinctive secondary metabolites, one of which was identified as 8-epi-tomentosin, which belongs to the xanthanolides. The amounts of 8-epi-tomentosin produced by the cotyledon- and hypocotylderived cell lines were 13.4mg/L and 11.0mg/L, respectively.
Callus-inducing ability of Alnus hirsuta was examined by culturing various tissues (leaf, hypocotyl, cotyledon and seed) on NT (Nagata & Takebe) medium, supplemented with 2.5$\mu$M 2,4-D. Leaf-originated callus was cultured on media varying in auxin (IBA and NAA) and cytokinin (BAP) concentrations to examine the effects of auxin and cytokinin on callus growth. Maximum growth was obtained at 10 $\mu$M IBA+10$\mu$M BAP and 10$\mu$M NAA without cytokinin. Cell suspensions established from cotyledon-originated callus yielded viable protoplasts after incubation for 16-18 hours in an enzyme mixture (1% (w/v) Onozuka R-10 0.5% (w/v) Macerozyme, CPW salts and 13% (w/v) mannitol, pH 5.8). Protoplasts were cultured on NT medium, supplemented with glucose, hormones and coconut milk. After 6 weeks of culture, protoplasts sustained cell divisions to form microcallus, which showed various colors from red to white.
한국식물학회 1993년도 제7회 식물생명공학 심포지움 식물 세포 분화의 분자적 접근 Seventh Symposium on Plant Biotechnology -Approach to Plant Cell Differentiation-
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pp.1-36
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1993
It is possible to regenerate plants from calli, single cells and protoplasts of numerous species via organogenasis or embryogenesis in cell and tissue culture systems. Also such regeneration of plants can directly occur from cells of explants. However certain plant species has not been yet provided cultures suitable for plant regeneration from cells or tissues. For example, we have to confirm the regenerability of plant from cells before preparing transformed cells for application. Even more, it is very important to notice that regenerated plants in cell and tissue cultures often show structural abnormality. The mojority of those plants is functionally disordered and eventually cases degenerated. One of such examples is vitreous plants which are manifested mainly in the leaves and manifesteds to a lesser extent in the stems and roots. Regenerants in suspension cultures show more frequent vitrification than on gelled media so that relative humidity and water potential are the key factors involved in abnormal morphogenesis in vitro. The other is that somatic embryos formed in media containing BAP or high concentration of sucrose show frequently cotyledon aberrancy such as polycotyledon and born type cotyledon. The embryos with aberrant cotyledon of Codonopsis lanceolata could not germinate or regenerate into plants in many cases. In contrast, the polycotyledon embryos of Aralia cordata germinated in higher percentage than two cotyledonary embryos, but horn type cotyledonary embryos rarely germinated. The major cause of poor germination is the abnormal development of plumule apex meristem.
알팔파의 자엽과 하배축을 배양하여 캘러스를 유기하고 이들을 glyphosate첨가 액체배지에서 배양하여 glyphosate에 대한 생장억제 반응을 검사하였으며 10 mM glyphosate에 저항성인 세포주를 선발하고 EPSPS 활성을 조사 하였던 바 캘러스 유기율은 2,4-D 1 mg/L, kinetin 0.5 mg/L에서 가장 높았고 자엽보다 하배축이 캘러스 유기율이 높았으며, glyphosate 농도에 대한 ID$_{50}$은 0.1 mM과 0.2 mM사이에 있었다. A49-10G와 A58-10G는 대조세포주에 비해 각각 8.0배 와 9.1배의 높은 EPSPS 활성을 보였다.
The influences of ethylene inhibitors ($AgNO_3$ and silver thiosulfate) and cytokinins (BAP and TDZ) on shoot regeneration from cotyledon and hypocotyl explants of B. napus cv. Youngsan were investigated. The presence of $50{\mu}M$ Silver thiosulfate (STS) in shoot regeneration medium formed shoots at 60-68% after 3-4 weeks of culture, which was enhanced by 2-fold compared to that of Silver nitrate ($AgNO_3$). Moreover, cotyledon explants were more regenerative than hypocotyls; shoots from cotyledon explants began to occur 4-5 days earlier than that of hypocotyl explants. TDZ at a concentration of $8-10{\mu}M$ was effective for shoot regeneration, compared with BAP. Consequently, the optimal shoot regeneration response was observed in medium supplemented with $50{\mu}M\;STS+8{\mu}M\;TDZ$. In transmission electron microscopy (TEM) analysis, higher density of silver nanoparticles was shown to be accumulated widely inside the cell wall and plasmodesmata of regenerating leaf cultured in medium supplemented with $AgNO_3$. By contrast, in the cell cultured in medium with STS, fine-grained deposits were partly observed in the surroundings of the cell wall.
더덕 자엽절편을 1 mg/L 2,4-D가 첨가된 MS기본배지에 배양하여 배발생캘러스를 얻었고, 호르몬이 첨가되지 않은 MS액체배지에서 구형기의 체세포배를 얻었다. 구형기에서 초기 심장형기로 발달할 때 자엽의 시원세포는 전형성층조직으로부터 분화되기 시작 하였으며, 하배축에서 관찰되는 원통형 전형성층대는 2개의 자엽을 형성할 경우 2개의 전형성층대가, 3개의 자엽은 3개의 전형성층대가, 4개의 자엽은 4개의 전형층대가 각각 독립적으로 분화되어 자엽절과 자엽부위까지 연결되어 있었다. 만약 구형기 체세포배에서 자엽시원세포가 원통형으로 분화될 경우 합생자엽을 갖는 체세포배가 형성되었다.
The pattern of seed storage protein, vicilin, deposition and site of intracellular localization was examined in cotyledon cells of pea (Pisum sativum) seed using the immunocytochemical methods. The vicilin was confined to the cisternae fo the rough endoplasmic reticulum and dictyosome as well as protein granules newly formed in rough endoplasmic reticulum. Vacuolar protein deposites and protein bodies were also labelled by gold particles. After small protein bodies were formed in the rough endoplasmic reticulum, they were transported to large protein bodies and then fused together. Electron dense protein granule, elaborated in the dictyosome, appears to be transported from dictyosome to protein body. A few unlabelled protein granules seem to be accumulated in other type of proteins than vicilin.
In this paper, we would like to show unexpected morphogenic potential of cell suspensions derived from seedling explants of Gentiana kurroo (Royle). Suspension cultures were established with the use of embryogenic callus derived from seedling explants (root, hypocotyl and cotyledons). Proembryogenic mass proliferated in liquid MS medium supplemented with $0.5mg\;l^{-1}$ 2,4-D and $1.0mg\;l^{-1}$ Kin. The highest growth coefficient was achieved for root derived cell suspensions. The microscopic analysis showed differences in aggregate structure depending on their size. To assess the embryogenic capability of the particular culture, 100 mg of cell aggregates was implanted on MS agar medium supplemented with Kin ($0.0-2.0mg\;l^{-1}$), $GA_3$ ($0.0-2.0mg\;l^{-1}$) and AS ($80.0mg\;l^{-1}$). The highest number of somatic embryos was obtained for cotyledon-derived cell suspension on $GA_3$-free medium, but the best morphological quality of embryos was observed in the presence of $0.5-1.0mg\;l^{-1}$ Kin, $0.5mg\;l^{-1}$$GA_3$ and $80.0mg\;l^{-1}$ AS. The morphogenic competence of cultures also depended on the size of the aggregate fraction and was lower when size of aggregates decreased. Flow cytometry analysis reveled luck of uniformity of regenerants derived from hypocotyl suspension and 100% of uniformity for cotyledon suspension.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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