계지에서 분리한 보체계 활성화 다당의 보체 활성화양식과 다당의 당쇄결합에 관하여 검토하였다. 계지 보체계 활성화 다당획분들(CC-IIIa, CC-IIIb, CC-IIIc)들은 정상인의 혈청중에 존재하는 주요 보체성분인 C3를 활성화하여 C3a와 C3b 보체 산물을 생성 시켰는데 이 과정은 anti-human C3를 이용한 면역전기영동을 실시하여 확인하였다. $Ca^{++}$ 유무시의 보체계 활성을 측정한 결과 계지에서 분리된 CC-IIIa-3는 고전적 경로(classical pathway)와 부경로(alternative pathway)를 동시에 활성화시킴을 확인하였다. CC-IIIa-3을 메틸화하여 GC/MS로 분석한 결과 비환원 말단의 galactopyranose와 glucopyranose가 확인되었고 1,2-linked rhamnopyranose, 1,6-linked mannopyranose, 1,3-linked glucopyranose, 1,6-linked galactopyranose 등이 확인되었다.
The crude biopolymer (AS-S1) and endobiopolymer (AS-S2) were isolated from the dry stem bark of Acanthopanax sessiliflorus and tested for anti complement activity. The two potent anticomplement biopolymers, AS-1 and AS-2-Fr.I, were isolated by the combination of ion-exchange chromatography and gel filtration methods from the endo-biopolymers (AS-S2). The anticomplement activity of AS-1 (MW 12 kDa) and AS-2-Fr.I (MW 180 kDa) were found to be 84.4% and 100.0%, respectively, at the concentration of $25{\mu}g/ml$. Activated pathway of the complement system occurred in both classical and alternative pathways, as evidenced by crossed immunoelectrophoresis(CIEP), where a major pathway was detected to be the classical one. It was found that the anticomplement activities of the periodate oxidized were decreased significantly, but those of pronase digested biopolymers of AS-1 and AS-2-Fr.I were decreased very little. The AS-1 contained 2,4,6-tri-O-methyl-D-glucitol, 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, and 2,3,6-tri-O-methyl-D-galacitol, which indicated that AS-1 contained a $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}4)-linked$ glucopyranosyl residue and a $(1{\rightarrow}4)-linked$ galactosyl residue. AS-2-Fr.I contained mainly 2,4-di-O-methyl-D-mannitol and 2,3,4-tri-O-methyl-D-galacitol, which contained $(1{\rightarrow}3),\;(1{\rightarrow}6)$ linked mannosyl and $(1{\rightarrow}6)$ linked galactosyl residues.
The antitumor components of the protoplast fusants of Lentinula edodes and Ganoderma lucidum were examined for immunological activity to elucidate the mechanism of their antitumor activity. They did not show any direct cytotoxicity against tumor cells. But being examined for immunopotentiation activity, they increased the number of colonies in the bone marrow stem cells to 3.0 times. They also increased the activities of the acid phosphatase in activated macrophages to 2.1 times and the secretion of nitric oxide in RAW 264.7 to 2.2 times, respectively. They activated the components of the alternative complement pathway. In humoral immunity. they increased the activities of the alkaline phosphatase in differentiated B cells to 1.6 times and the number of plaque forming cells to 1.8 times, respectively. In cellular immunity, they restored the depressed response of delayed type hypersensitivity in tumor bearing mice to normal level.
Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is a leading cause of cancer death worldwide. Our study aimed to reveal molecular mechanisms. Microarray data of GSE15471 (including 39 matching pairs of pancreatic tumor tissues and patient-matched normal tissues) was downloaded from Gene Expression Omnibus (GEO) database. We identified differentially expressed genes (DEGs) in PDAC tissues compared with normal tissues by limma package in R language. Then GO and KEGG pathway enrichment analyses were conducted with online DAVID. In addition, principal component analysis was performed and a protein-protein interaction network was constructed to study relationships between the DEGs through database STRING. A total of 532 DEGs were identified in the 38 PDAC tissues compared with 33 normal tissues. The results of principal component analysis of the top 20 DEGs could differentiate the PDAC tissues from normal tissues directly. In the PPI network, 8 of the 20 DEGs were all key genes of the collagen family. Additionally, FN1 (fibronectin 1) was also a hub node in the network. The genes of the collagen family as well as FN1 were significantly enriched in complement and coagulation cascades, ECM-receptor interaction and focal adhesion pathways. Our results suggest that genes of collagen family and FN1 may play an important role in PDAC progression. Meanwhile, these DEGs and enriched pathways, such as complement and coagulation cascades, ECM-receptor interaction and focal adhesion may be important molecular mechanisms involved in the development and progression of PDAC.
From the hot water extract of bracken(Pteridium aquilinum var. latiusculum), a Korean win edible plant, anti-complementary acidic polysaccharides were Isolated. Crude polysaccharide fraction(HPA-1) was obtain ed by methanol reflux, ethanol precipitation, dialysis, and lyophilization. HPA-1 contained 81.80% of total sugar, 30.40% of uronic acid, and 15.60cA of protein. HPA 1 was purified consecutively by cetavlon fractionation and chromatography including ion exchange nth DEAE-Sepharose CL 6B and gel permeation with Sephadex G-100 and Sepharose CL-6B. HPA-2- IVa and HPA-Va-2 were nearly homogeneous on HPLC and had 500,000 and 560,000 daltons of molecular weights, respectively. HPA-2-Wa consisted of fucose, galacturonic acid, and glucuronic acid at the molar ratio of 1.40 : 0.97 : 1.88. HPA-2-Va 2 was composed of rhamnose, galactose, and galacturonic acid at the molar ratio of 1.00 : 1.38 : 1.39. The polysaccharides were found to activate the C3 component both In the presence and In the absence of Ca2+ through the crossed-immunoelectrophoresis suggesting that those Involved in both classical and alternative complement pathway.
Henoch-$Sch{\ddot{o}}nlein$ purpura (HSP)는 피부, 관절, 위장관 그리고 신장을 침범하는 혈관염으로 혈소판 감소증이 없는 자반증을 전형적인 증상으로 하는 질환으로 그 원인에 대하여 여러 가지 가설들이 있지만 아직 확실치 않다. HSP에서 신장 침범은 이차적으로 오는 혈관염으로 임상적으로 혈뇨와 단백뇨의 증상을 보이고 병리학적 소견은 IgA 신염과 매우 유사하다. 그 외에도 HSP 신염은 다양한 형태의 사구체 신염을 보이는데 막성 사구체 신염은 드물다. 이에 저자들은 HSP의 임상 양상을 가지면서 혈청 내 보체의 감소, 단백뇨 및 고혈압을 보이고 조직학적으로 막성 사구체 신염 소견을 보인 6세 환아를 경험하였기에 이를 문헌 고찰과 함께 보고하는 바이다.
The complement (C) regulatory proteins decay accelerating factor (DAF, CD55) and CD59 could protect host cells using different mechanisms from C-mediated damage at two distinct levels within the C pathway. Co-expression of DAF and CD59 would be an effective strategy to help overcome host C-induced xenograft hyperacute rejection. In this study, we made a construct of recombinant expression vector containing DAF and CD59 cDNA and the stable cell lines were obtained by G418 selection. Extraneous genes integration and co-expression were identified by PCR, RT-PCR and Western blot analysis. Human c-mediated cytolysis assays showed that NIH/3T3 cells transfected stably with pcDNA3-CD59, pcDNA3-DAF, and pcDNA3-CD59DAF-DP were protected from C-mediated damage and that synchronously expressed human CD59 and DAF provided the most excellent protection for host cells as compared with either human CD59 or DAF expressed alone. Therefore, the construct represents an effective and efficacy strategy to overcome C-mediated damage in cells and, ultimately, in animals.
Anticomplementary activity of hederagenin and related saponins isolated from Dipsacus asper was investigated in vitro. HN saponin F (3) was most potent with $IC_{50}$ value of$ 3.7{\times}10^{-5} M$ followed by 3-O-${\beta}-D-glucopyranosyl-(1{\rightarrow} 3)-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-(1{\rightarrow}2)-{\beta}-L-arabinopyranosyl$ hederagenin $28-O-{\beta}-D-glucopyranosyl-(1{\rightarrow}6)-beta$-D-glucopyrano side (8), $3-O-{\beta}-L-arabinopyranosyl$ hederagenin $28-O-{\beta}-D-glucopyranosyl-(1{\rightarrow}6)-{\beta}-D-glucopyranoside$ (5), dipsacus saponin A (4), and hederagenin (1) on the classical pathway (CP) of complement system, while the saponins 3-5 did not show the inhibition of hemolysis and rather increase the hemolysis on the alternative pathway (AP). However, all of C-3 monodesmosides [prosapogenin CP (2), dipsacus saponin B (6), and dipsacus saponin C (7)] evoked hemolysis directly on the erythrocytes.
Rho, Min-Suk;Su, Xuefeng;Lee, Yoon-Shik;Kim, Woo-Ho;Dowhan, William
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권1호
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pp.84-91
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2006
A Saccharomyces cerevisiae pgs1 nulI mutant, which is deficient with phosphatidyl glycerol (PG) and cardiolipin (CL) biosynthesis, grows well on most fermentable carbon sources, but fails to grow on non-fermentable carbon sources such as glycerol, ethanol, and lactate. This mutant also cannot grow on galactose medium as the sole carbon source. We found that the incorporation of $[^{14}C]-galactose$, which is the first step of the galactose metabolic pathway (Leloir pathway), into the pgs 1 null mutant cell was extremely repressed. Exogenously expressed PGS1 (YCpPGS1) under indigenous promoter could completely restore the pgs1 growth defect on non-fermentable carbon sources, and dramatically recovered $[^{14}C]-galactose$ incorporation into the pgs1 mutant cell. However, PGS1 expression under the GALl promoter $(YEpP_{GAL1}-PGS1myc)$ could not complement pgs1 mutation, and the GAL2-lacZ fusion gene $(YEpP_{GAL2}-lacZ)$ also did not exhibit its $\beta-galactosidase$ activity in the pgs1 mutant. In wild-type yeast, antimycin $A(1\;{\mu}g/ml)$, which inhibits mitochondrial complex III, severely repressed not only the expression of the GAL2-lacZ fusion gene, but also uptake of $[^{14}C]-galactose$. However, exogenously expressed PGS1 partially relieved these inhibitory effects of antimycin A in both the pgs1 mutant and wild-type yeast, although it could not basically restore the growth defect on galactose by antimycin A. These results suggest that the PGSI gene product has an important role in utilization of galactose by Gal genes, and that intact mitochondrial function with PGS1 should be required for galactose incorporation into the Leloir pathway. The PGS1 gene might provide a clue to resolve the historic issue about the incapability of galactose with deteriorated mitochondrial function.
Mondal, Shakhinur Islam;Akter, Elma;Akter, Arzuba;Khan, Md Tahsin;Jewel, Nurnabi Azad
한국미생물·생명공학회지
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제48권3호
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pp.373-382
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2020
Candidatus Carsonella ruddii is an endosymbiont that resides in specialized cells within the body cavity of plant sap-feeding insects called psyllids. The establishment of symbiotic associations is considered one of the key factors for the evolutionary success of psyllids, as it may have helped them adapt to imbalanced food resources like plant sap. Although C. ruddii is defined as a psyllid primary symbiont, the genes for some essential amino acid pathways are absent. Complete genome sequences of several C. ruddii strains have been published. However, in-depth intra-species comparison of C. ruddii strains has not yet been done. This study therefore aimed to perform a comparative genome analysis of six C. ruddii strains, allowing the interrogation of phylogenetic group, functional category of genes, and biosynthetic pathway analysis. Accordingly, overall genome size, number of genes, and GC content of C. ruddii strains were reduced. Phylogenetic analysis based on the whole genome proteomes of 30 related bacterial strains revealed that the six C. ruddii strains form a cluster in same clade. Biosynthetic pathway analysis showed that complete sets of genes for biosynthesis of essential amino acids, except tryptophan, are absent in six C. ruddii strains. All genes for tryptophan biosynthesis are present in three C. ruddii strains (BC, BT, and YCCR). It is likely that the host may depend on a secondary symbiont to complement its deficient diet. Overall, it is therefore possible that C. ruddii is being driven to extinction and replacement by new symbionts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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