• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제15권4호
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• pp.282-286
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• 2010

To isolate a calcium-binding peptide from chlorella protein hydrolysates, chlorella protein was extracted and hydrolyzed using Flavourzyme, a commercial protease. The degree of hydrolysis and calcium-binding capacity were determined using trinitrobenzenesulfonic acid and orthophenanthroline methods, respectively. The enzymatic hydrolysis of chlorella protein for 6 hr was sufficient for the preparation of chlorella protein hydrolysates. The hydrolysates of chlorella protein were then ultra-filtered under 5 kDa as molecular weight. The membrane-filtered solution was fractionated using ion exchange, reverse phase, normal phase chromatography, and fast protein liquid chromatography to identify a calcium-binding peptide. The purified calcium-binding peptide had a calcium binding activity of 0.166 mM and was determined to be 700.48 Da as molecular weight, and partially identified as a peptide containing Asn-Ser-Gly-Cys based on liquid chromatography/electrospray ionization tandem mass spectrum.

• 한국염색가공학회지
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• 제13권4호
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• pp.227-233
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• 2001

Wool fabrics were pre-treated with corona prior to treating with enzyme for shrinkage resistance. Commercial protease and cellulase were used for degradation of wool and the treatment conditions such as enzyme amount, treating time, and assistant chemicals. Friction coefficient and zeta-potential were measured to certificate an effect of treatment condition on the handle of wool fabric. Corona pretreatment make the wool fabric soft, which result in the decrease of friction coefficient and zeta-potential. Scale removal of wool surface was observed by scanning electron microscope. Amino acid analysis shows the effectiveness of enzyme, and corona pretreatment does not cause severe internal damage.

• KSBB Journal
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• 제27권6호
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• pp.361-366
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• 2012

We investigated the anti-diabetic activity and enzymatic activity of 24 commercial doenjang samples certified for traditional foods. Twenty four doenjang samples showed the wide ranges in enzymatic activities (protease activities 0-50.45 unit/g, ${\alpha}$-amylase activities 0-675.9 unit/g, ${\beta}$-amylase 13.6-308.6 unit/g), and there were no difference in enzymatic activity by the producing region. To evaluate the potential anti-diabetic activity of 24 doenjang samples, we examined the effect of doenjang methanol extract (DME) on 2-[n-(7-nitrobenz-2-oxa-1, 3-diazol-4-yl) amyno]-2-deoxy-d-glucose (2-NBDG) uptake. Ten samples among 24 samples significantly stimulated the uptake of 2-NBDG. When the cells were treated with DME at 400 ug/mL, No. 17 and 23 specially stimulated 2-NBDG uptake by 1.23-fold and 1.25-fold, respectively, compared with untreated control cell. And there were no cytotoxicity in the C2C12 cells treated with DME at concentration of 500 ug/mL. Among 24 samples, No. 6, 7, 12, 21 and 24 showed the ${\alpha}$-glucosidase inhibitor activity at concentration of 10 mg/mL; however, they were less effective than acarbose which is a commercial ${\alpha}$-glucosidase inhibitor.

• 생명과학회지
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• 제16권2호
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• pp.360-364
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• 2006

Fibrin clots of blood vessels are one of the serious factor caused cardiovascular disease. The development of a antithrombotic and thrombolysis solvent is necessary to prevent and treat these diseases. It has been reported that a strong fibrin-specific fibrinolytic enzyme was produced from a Korean fermented soybean paste similar to Japanese miso. We have been screened the known or novel fibrinolytic enzymes by activity-based and sequence-based screening from soil DNA metagenome library containing all kinds of environmental genomic DNA. The activity-based screening was determined the protease activity on 0.5% skim milk. For sequence-based screening, we designed a set of primer expanding gene sequence of fibrinolytic enzyme, performed PCR and selected clones showing the expected size of amplicons from metagenome library. Transformation of the gene encoding fibrinolytic enzyme was carried out with commercial vectors and their transformants were selected. Finally, we found 15 positive clones from metagenome library. Then each of sequences were analyzed and identified as similar or known the clones of nattokinase. We are going to perform full sequence of each clones, ligate with expression vector, transform into competent cells and then determine activity of expressed enzymes.

• Preventive Nutrition and Food Science
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• 제17권1호
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• pp.36-45
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• 2012

To produce novel cheese-like fermented soybean, the solid-state fermentation of roasted soybean flour (RSF) was performed using 1.0% inoculum Bacillus subtilis HA and Lactobacillus plantarum, with the initial 60% substrate moisture for 10 hr at $42^{\circ}$, resulting in pH 6.5, 0.82% acidity, 3.5% mucilage, 14.3 unit/g protease activity, 7.6 unit/g fibrinolytic activity, 216 mg% tyrosine content and $1.7{\times}10^{10}$ CFU/g of viable cell counts. After the second lactic acid fermentation with 10~30% skim milk powder, the fermented RSF resulted in an increase in acidity with 1.64~1.99%, tyrosine content with 246~308 mg% and protease activity in the range of 5.2~17.5 unit/g and 0.966 water activity. Viable cell counts as probiotics indicated $1.6{\times}10^8$ CFU/g of B. subtilis and $7.3{\times}10^{10}$ CFU/g of L. plantarum. The firmness of the first fermented RSF with 2,491 $g{\cdot}{\o}mm^{-1}$ greatly decreased to 1,533 $g{\cdot}{\o}mm^{-1}$ in the second fermented RSF, although firmness was slightly increased by adding a higher content of skim milk. The consistency of the second fermented RSF also decreased greatly from 55,640 to 3,264~ 3,998 in the presence of 10~30% skim milk. The effective hydrolysis of soy protein and skim milk protein in the fermented RSF was confirmed. Thus, the second fermented RSF with a sour taste and flavor showed similar textural properties to commercial soft cheese.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제21권1호
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• pp.97-102
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• 2008

Four hundred and forty 1-day-old Arbor Acre broilers were fed commercial starter diets with 0, 250, 750 and 2,250 mg/kg of an alpha-amylase preparation from 1 to 21 days of age to investigate the effects of an exogenous enzyme on growth performance, activities of digestive enzymes in the pancreas and anterior intestinal contents and pancreatic amylase mRNA expression. Body weight gain (BWG) and average daily gain (ADG) increased linearly (p<0.01) with increasing levels of supplementary amylase but feed conversion ratio (FCR) was not affected. There was a negative quadratic change of protease and amylase in the small intestinal contents with the increase of supplementary amylase level. The activity of intestinal trypsin was also increased (p<0.05). Lipase was unaffected by amylase supplementation (p>0.05). The pancreatic protease, trypsin, and lipase were not affected by exogenous amylase levels. Consistent with the tendency for a linear depression of amylase activity, pancreatic ${\alpha}$-amylase mRNA was down-regulated by dietary amylase supplementation. The present study suggested that oral administration of exogenous amylase affected activities of intestinal enzymes and the production of pancreatic digestive enzymes in a dose-dependent manner.

• 미생물학회지
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• 제43권3호
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• pp.222-226
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• 2007

단백질 분해효소는 아미노산간에 존재하는 peptide결합을 절단하는 효소로 산업적으로 많이 사용된다. 이러한 단백질 분해효소의 새로운 공급원을 찾기 위하여 체외 단백질 분해효소를 생산하는 세균을 둥해 심층수로부터 집식배양으로 분리하였다. 이들 중 빠른 성장과 skim milk를 첨가한 배지에서 가장 큰 투명환을 보여준 균주를 HJ19로 명명하였다. 분리균의 형태학적, 생리생화학적 특성과 16S rRNA gene의 염기서열을 조사한 결과 Micrococcus sp.에 속하는 것으로 나타났다. 분리된 Micrococcus sp. HJ19는 $10^{\circ}C$에서는 자라지 못하였으며 $20^{\circ}C$부터 생육과 효소활성을 보여주었다. 최적 생육 온도는 $37^{\circ}C$였으며, 효소 활성은 $30^{\circ}C$에서 약 480 unit/ml의 활성을 보여 주었다.

• 산업식품공학
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• 제13권3호
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• pp.176-182
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• 2009

작두콩 된장의 품질특성을 알아보기 위해 재래식 방법으로 제조한 된장에 작두콩을 8.0% 첨가한 된장(J2)과 재래식 쌀 된장에 작두콩을 6.0% 첨가한 된장(J4)을 제조하여 시판된장(K1-K6) 및 일반 재래 된장(J1, J3)과의 시험분석을 하였다. 수분, 회분 등 일반성분결과, 시료간 차이는 없었으나, 조단백질 함량과 protease 활성은 다른 시료에 비해 콩함량이 높은 J1과 J2가 높게 나타났으며, amylase 활성과 환원당 함량은 쌀을 첨가하여 제조한 J3과 J4가 다른 시료보다 높게 나타났다. 또한 아미노태 질소 함량은 시판된장인 K5와 K6에서 각각 668.34mg%와 642.64mg% 함량을 나타내어 다른 시료보다 높게 측정되었으며, 색도는 시료간에 유의적인 차이가 있었으며 작두콩 첨가가 색도에 큰 영향을 미치지는 않았다.

• 한국축산식품학회지
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• 제32권5호
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• pp.652-658
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• 2012

본 연구는 유단백질 유래 카제인염을 상업용 단백질가수분해 효소로 처리하여 효소의 종류와 가수분해 시간에 따른 ACE 저해효과를 살펴보고 주요 성인병인 고혈압의 예방을 위한 혈압강하 효과가 높은 가수분해물을 제조하고자 수행하였다. 카제인염을 6종의 단백질 분해효소로 기질대 효소비 1000:1로 첨가하여 8시간 가수분해했을 때 가수분해도는 2.54-4.25%로 나타났고, 다시 가수분해물을 기질대 효소비 500:1로 처리하여 4시간 동안 2차 가수분해하였을 때 4.30-5.22%의 가수분해가 일어났다. 효소별 가수분해물의 ACE 저해효과는 가수분해가 진행됨에 따라 $IC_{50}$의 수치는 감소하였고 저해율을 증가하였다. 1차 가수 분해시 8시간 가수분해한 가수분해물의 $IC_{50}$ 수치는 Protamex 처리군이 $516{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Flavourzyme이 $866{\mu}g/mL$로 가장 높았다. 1차 가수분해물을 Flavourzyme로 4시간 2차 가수분해를 하였을 때 1차 가수분해물 보다 $IC_{50}$ 수치가 감소되어 ACE저해 효과가 증가하였으며 Neutrase로 처리하였을 때 $282{\mu}g/mL$로 가장 낮았고 Protease M이 $570{\mu}g/mL$로 가장 효과가 적었다. 가장 효과가 좋은 Neutrase 2차 가수분해물을 소화효소인 pepsin, trypsin, ${\alpha}$-chymotrypsin으로 가수분해 하였을 경우 $IC_{50}$ 수치는 $597{\mu}g/mL$로 1차 가수분해물보다 저해효과가 유의적으로 감소되었다(p<0.05). Neutrase 2차 가수분해물을 MW 10,000로 한외여과하였을 때 MW 10,000 미만 permeate의 $IC_{50}$ 수치는 $273{\mu}g/mL$로 저해효과는 유의차가 없었으나, 10,000 이상의 retentate는 $IC_{50}$ 수치가 $635{\mu}g/mL$로 유의적 수준에서 저해효과가 감소하였다(p<0.05). 이에 효소의 종류와 가수분해 시간의 조합에 의한 ACE 저해활성을 측정하고 분리공정을 최적화하기 위한 추가 연구를 수행한다면 주요 유단백질인 카제인 유래 기능성 식품의 산업적 대량생산이 가능할 것으로 사료된다.

• 한국식품과학회지
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• 제17권5호
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• pp.389-398
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• 1985

치즈곤죽의 제조공정과 기간을 단축시키기 위해서 생치즈 커드를 제조하지 않고 Na-caseinates, cream, 여러가지 미량성분, 유산종균, 효소를 혼합하여 치즈곤죽을 제조하고 $30^{\circ}C$에서 매일 30초간 교반하면서 7일 동안 발효시킨 다음 치즈곤죽의 물리 화학적 특성을 조사하기 위해 수소이온 농도, 적정산도, 수용성 질소, 생균수, 활성 SH기, 총 휘발성산, 유리 지방산. 전기영동에 의한 단백질분해를 분석하였다. 유산균에 의한 산생성은 단백질분해효소를 첨가하지 않은 치즈곤죽보다 첨가한 치즈곤죽에서 더 잘발히 일어나 3일 후에는 PH를 4.90이하로 떨어뜨려 5N NaOH로 PH를 5.40으로 조정해 주었으며 이후에 pH는 약간 증가하였고, 적정산도의 변화는 pH변화와 비슷한 경향을 보여주었다. 단백짙분해효소를 첨가하지 많은 치즈곤죽은 발효가 끝났을 때 총 질소의 약 40%가 수용성 질소로 되었으나 효소를 첨가한 치즈곤죽은 70%정도의 단백질이 수용성 질소로 분해되었다. 사용한 유산종균. 즉 Streptococcus lactis와 treptococcus cremoris에 의한 단백질 분해는 Cheddar치즈에서와 같이 as-casein이 $\beta$-casein보다 먼저 분해되며, 첨가한 단백질분해호소는 $\alpha$-casein과$\beta$-casein을 모두 활발히 분해 시켜 3일이 지나면 모든 단백질이 펩타이드와 아미노산으로 되었다. 단백질 분해효소를 첨가한 치즈곤죽에서는 쓴맛 펩타이드가 형성되었다가 사라짐을 관찰할수 있었다. 한편 지질분해효소를 침가할 경우 총 휘발성산이 4일 이후에 급격히 증가함을 통해 사용한 효소는 유지방을 잘 분해함을 알 수 있었으며 GLC에 의한 유리 지방산의 분석 결과는 Cheddar치즈곤죽은 시판Cheddar 치즈와 비슷하고 Italian형 치즈곤죽은 시판 Italian치즈보다 약간 떨어졌다. Cheddar치즈의 중요한 품미성분인 활성 SH기는 glutathione을 첨가한 치즈곤죽에서 발효 4일부터 증가하였으며 단백질분해효소를 함께 첨가할 경우 그 증가현상이 현저하였다. 단백질분해요소의 첨가유무에 따라 점도 변화는 다른 두 가지 양상으로 나타나 효소를 첨가할 경우 단백질이 분해됨에 따라 점도가 급격히 감소하였다.