The 14 lactic acid bacteria (LAB) have been evaluated to determine the binding capacity to HT29 cell and Aflatoxin $B_1$ ($AFB_1$). The interaction of LAB to HT29 cells has been further investigated to identify the possibility of competing the binding sites with $AFB_1$. Of 14 LAB strains, Lactobacillus casei KCTC 3260 demonstrated the higher adhesiveness to HT29 and $AFB_1$ with the rate of 19.6% and 46.3%, respectively. In competitive analysis for binding sites, the adhesion of L. casei KCTC 3260 to HT29 cells was reduced with 100 nmol $AFB_1$ by 31.2%. The protoplast of L. casei KCTC 3260 showed no binding capacity to HT29 cells with increment of $AFB_1$ concentration, indicating that cell wall components might serve as a critical factor for the binding. To discriminate the major component influencing on L. casei KCTC 3260 binding to HT29 cells and $AFB_1$, four different pre-treatments (lipase, pronase E, sodium m-periodate, and urea) were employed. Of those, sodium m-periodate treatment caused the lower adhesion of L. casei KCTC 3260 to HT29 cells with the increment of $AFB_1$ concentration. These results indicated that carbohydrate moiety on the cell wall of L. casei KCTC 3260 might be the most critical component in binding to both HT29 cells and $AFB_1$.
본 연구에서는 건강기능성 버섯으로 알려진 A. blazei 에 대하여 재배시 농가에서 사용하는 배지의 종류에 따라 생산된 자실체의 면역 기능성 차이를 규명 할 목적으로 in viro 상태에서 추출다당체의 세포에 대한 영향을 살펴보았다. 기능성 약용 버섯인 A. balzei 에 대하여 재배시 농가에서 사용하는 배지에 따른 in viro 상태에서 세포에 대한 다당체의 영향을 검토하였다. 추출용매에 따른 항종양 물질의 저해효과는 약 25∼30% 수율범위의 methanol 추출물이 비교적 높은 효과를 나타내었다. 이 추출물을 이용하여 human colon carcinoma cell line인 HT29와 human heptoma cell line HepG2에 대한 항종양실험 결과 결장암 세포에 대한 효과는 고농도로 처리시 사용된 생산배지에 따라 1.5∼3.5배 까지의 차이를 나타내었다. 간암세포에 대해서도 고농도로 처리시 사용된 생산배지에 따라 1.3∼2.4배 까지의 저해효과를 볼 수 있었으며 이는 배지상의 조성과 발효에 따른 차이로 추측된다. 국내산 신령버섯간 지역별로 다르게 사용되는 생산배지 사이에 나타나는 항종양효과에서 일반적으로 많이 사용되는 볏짚과 사탕수수 혼합배지보다는 볏짚대신에 칡을 사탕수수에 일부 혼합하여 발효시킨 배지에서 생산된 버섯에서 상당히 높은 종양 저해효과를 나타내었다. 즉 결장암에 대한 처리시 저 농도에서는 약 1.5배, 고농도에서 약 1.6배의 저해효과를 나타내었으며, 간암세포에서는 저 농도에서 약 2.1배, 고농도에서 약 2.8배의 더욱 높은 저해효과를 나타내었다. 건조 분말시료에서 지용성 성분을 제거한 후 열수 및 냉·온 알칼리성 조건으로 다당체를 분리하여 Ab-l, Ab-2, Ab-3 분획을 얻었으며, 이들 시료로 Salmonella typhymurium TA100을 이용한 항돌연변이 실험을 수행한 결과 재배지역과 사용배지에 따른 큰 차이는 나타나지 않았지만 대체로 높은 항돌연변이 효과를 나타내었다. 면역세포의 활성정도를 측정하기 위하여 macrophage Raw cell에 상기의 fraction을 적용해본 결과 칡 사용 생산버섯의 알칼리성 추출 Ab-3 fraction이 사용한 다른 배지에 비하여 약 45∼58% NO 생성증가를 나타내었으며, 기타 열수추출 fraction에서는 유의적인 큰 증가는 없었으나 알칼리 추출조건에서는 대체로 증가하는 경향이 뚜렷하게 나타났다.
저분자량 키토산 올리고당의 세포 독성을 실험하였다. 저분자량 키토산 올리고당은 정상세포주인 Vero E6(Africa green monkey kidney cell)에 대한 세포 독성을 거의 나타내지 않았다. 정상세포주에 대한 저분자량 키토산 올리고당의 $IC_{50}$값은 $1,060.28{\mu}g/m{\ell}$이었다. 저분자량 키토산 올리고당은 폐암 세포주인 A549, 방광암 세포주인 J82, 대장암 세포주인 SNU-C4, 위암 세포주인 SNU-1, 유방암 세포주인 ZR75-1 등과 같은 사람의 종양세포주에 대한 in vitro 항종양성을 나타내었다. 종양세포주에 대한 저분자량 키토산 올리고당의 $IC_{50}$값은 A549, J82, SNU-C4, SNU-1, ZR75-1 세포주의 경우에 각각 $477.42{\mu}/m{\ell}$, $480.40{\mu}g/m{\ell}$, $436.84{\mu}g/m{\ell}$, $373.55{\mu}g/m{\ell}$, and $539.95{\mu}/m{\ell}$이었다.
Alabsi, Aied M.;Ali, Rola;Ali, Abdul Manaf;Al-Dubai, Sami Abdo Radman;Harun, Hazlan;Kasim, Noor H. Abu;Alsalahi, Abdulsamad
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제13권10호
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pp.5131-5136
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2012
Cancer is one of the major health problems worldwide and its current treatments have a number of undesired adverse side effects. Natural compounds may reduce these. Currently, a few plant products are being used to treat cancer. In this study, goniothalamin, a natural occurring styryl-lactone extracted from Goniothalamus macrophyllus, was investigated for cytotoxic properties against cervical cancer (HeLa), breast carcinoma (MCF-7) and colon cancer (HT29) cells as well as normal mouse fibroblast (3T3) using MTT assay. Fluorescence microscopy showed that GTN is able to induce apoptosis in HeLa cells in a time dependent manner. Flow cytometry further revealed HeLa cells treated with GTN to be arrested in the S phase. Phosphatidyl serine properties present during apoptosis enable early detection of the apoptosis in the cells. Using annexin V/PI double staining it could be shown that GTN induces early apoptosis on HeLa cells after 24, 48 and 72 h. It could be concluded that goniothalamin showing a promising cytotoxicity effect against several cancer cell lines including cervical cancer cells (HeLa) with apoptosis as the mode of cell death induced on HeLa cells by Goniothalamin was.
선행연구에서 라이코펜이 HT-29세포의 증식을 억제하는 것을 관찰하였기 때문에 본 연구는 그 기전을 연구하기 위하여 수행되 었다. 라이코펜이 HT-29 세포의 사멸을 유도하는지 조사하기 위해서 여러 농도의 라이코펜이 포함된 배지에서 세포를 4일 동안 배양하였다. 라이코펜 농도의 증가에 따라 사멸되는 세포에서 나타나는 특징의 하나인 DNA fragmentation이 증가하는 것을 관찰하였다. Western blot을 수행하여 얻은 결과에 의하면 라이코펜이 IGF-IR, IRS-1, PI3K, Akt와 같은 IGF-IR pathway에 속하는 단백질의 수준을 감소시켰다. IGF-IR의 인산화를 유도하기 위해서 라이코펜이 포함된 배지에서 세포를 배양하고 IGF-I을 첨가하여 0, 5, 10, 60분간 배양한 다음 IGF-IR antibody를 이용하여 immunoprecipitation을 수행하였다. 라이코펜은 IGF-I에 의한 IGF-IR, IRS-1의 인산화와 IGF-IR와 PI3K의 결합을 감소하고 인산화된 Akt를 감소시켰다. 이와 같은 IGF-IR signaling의 억제는 이 대장암세포에 존재하는 IGF-II의 autocrine loop을 억제하는 원인이 될 수 있어, 라이코펜의 암세포증식을 억제하는 기전 중의 하나가 될 수 있다. 라이코펜은 토마토와 그 가공품에 많이 존재하는 물질로 자연적인 식사를 통해 많이 섭취할 수 있는 물질이다. 라이코펜의 항암 기전을 밝혀냄으로써 미래 암예방과 치료를 위한 중요한 기능성 영양소를 생산할 수 있는 기초를 마련해줄 수 있을 것으로 기대된다.
Hassanien, Mohammad M.;Mortada, Wael I.;Hassan, Ali M.;El-Asmy, Ahmed A.
대한화학회지
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제56권6호
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pp.679-691
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2012
New series of metal complexes of Co(II), Ni(II), Cu(II), Zn(II), Pd(II) and Pt(II) with 4-(p-chlorophenyl)-1-(pyridin-2-yl)thiosemicarbazide (HCPTS) have been synthesized and characterized by elemental analyses, magnetic moment, spectra (IR, UV-Vis, $^1H$ NMR, mass and ESR) and thermal studies. The IR data suggest different coordination modes for HCPTS which behaves as a monobasic bidentate with all metal ions except Cu(II) and Zn(II) which acts as a monobasic tridentate. Based on the electronic and magnetic studies, Co(II), Cu(II), Pd(II) and Pt(II) complexes have square - planner, Ni(II) has mixed stereochemistry (tetrahedral + square planar), while Zn(II) is tetrahedral. Molar conductance in DMF solution indicates the non-ionic nature of the complexes. The ESR spectra of solid copper(II) complex show $g_{\parallel}$ (2.2221) > $g_{\perp}$ (2.0899) > 2.0023 indicating square-planar structure and the presence of the unpaired electron in the $d_x2_{-y}2$ orbital with significant covalent bond character. The thermal stability and degradation kinetics of the ligand and its metal complexes were studied by TGA and DTA and the kinetic parameters were calculated using Coats-Redfern and Horowitz-Metzger methods. The complexes have more antibacterial activity against some bacteria than the free ligand. However, the ligand has high anticancer activities against HCT116 (human colon carcinoma cell line) and HEPG2 (human liver hepatocellular carcinoma cell line) compared with its complexes.
국내에서 종실용 amaranth의 이용 가능성을 조사하기 위한 목적으로 종실에서 squalene을 분리, 동정하였고, squalene 추출후 부산물의 활용방안으로 그 부산물의 항암활성검색을 한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. Amaranth 종실에서 추출, 분리한 squalene 함량은 0.43%이고, GC /Mass spectrum으로 확인한 결과 99%의 순도를 나타내었으며, 분자구조식은 잠정적으로 동물성 squalene과 동일한 것으로 나타났다. 2. MTT 방법을 이용한 인간의 위암, 대장암 세포주에 대한 항암활성효과를 검색한 결과 부산물의 조추출물은 230$\mu\textrm{g}$/m1보다 낮은 농도에서 유의한 항암효과를 보였다.
This study was designed to evaluate the effects of various factors on the therapeutic effect of the I-131 labeled anti-carcinoembryonic antigen monoclonal antibody(anti-CEA antibody). Tetrazolium-based colorimetric assay (MTT) was used to compare in vitro cytotoxicity of 3 Korean colon cancer cell lines (SNU-C2A, SNU-C4, SNU-C5) for selection of proper 2 cell lines in this study. The changes of the size of tumor which was xenografted to nude mice (balb/c nu/nu) were compared in 4 groups (group treated I-131 labeled anti-CEA antibody, group treated with non-radiolabeled anti-CEA antibody, group treated with I-131 labeled anti-human chorionic gonadotropin monoclonal antibody (anti-hCG antibody) as nonspecific antibody, and group injected with normal saline as a control). Immunohistochemical staining and in vivo autoradiography were performed after excision of the xenografted tumor. The results were as below mentioned. The in vitro cytotoxic effect of I-131 labeled anti-CEA antibody is most prominent in SNU-C5 cell line between 3 cancer cell lines. The changes of xenografted tumor size in both SNU-C4 and SNU-5S cell tumors at the thirteenth day after injection of the antibodies were smallest in the group treated with I-131 labeled anti-CEA antibody (SNU-C4/SNU-C5; 324/342%) comparing with other groups, group treated with anti-CEA antibody (622/660%), group treated with I-131 anti-hCG antibody (538/546%), and control group(1030/724%)(P<0.02 in SNU-C4 and P<0.1 in SNU-C5 at the 13th day after injection of antibodies). On the thirteenth day after injection of the antibodies nude mice were sacreficed to count the radiouptake of tumor and to check the changes of tumor size. Correlations between radiouptake and change of tumor size were calculated in each groups and significant negative correlation was only obtained in the group treated with I-131 anti-CEA antibody (p<0.05). There were no correlations between antigenic expression of carcinoembryonic antigen and distribution of anti-CEA antibody in both SNU-C4 and SNU-C5 cell tumors on immunoperoxidase staining. On in vivo autoradiography the distributions of anti-CEA antibody were heterogeneous and the intensities of binding were various in SNU-C4 and SNU-C5 cell tumors. It is concluded that I-131 labeled tumor-specific monoclonal antibody, anti-CEA antibody is effective in suppressing the xenografted tumor growth and the effect is influenced by sensitivity of tumor cell itself to the radiolabeled antibody and other local factors instead of specificity of antibody.
Transforming growth factor-β (TGF-β)는 암세포의 생존과 성장뿐만 아니라 면역세포의 활성에도 영향을 미치는 다기능 사이토카인이다. 일반적으로 암세포에서 유래된 TGF-β는 초기 암세포의 생존과 성장을 촉진하고 면역억제 효과가 있다고 받아들여지고 있지만 TGF-β는 세포의 종류나 단계에 따라 다른 효과를 가진 것으로 알려져 있다. 따라서 암 성장에 미치는 TGF-β의 작용기전은 아직 명확하게 정의하기 어렵다. 이 연구에서는 원발성 대장암 세포주인 KM12C와 이들의 두 전이성 세포주인 KM12SM과 KM12L4A에서 TGF-β 신호전달이 5개의 NKG2D 리간드 발현과 NK 세포 매개 항암 면역 반응에 미치는 영향을 조사했다. 외인성 TGF-β에 의해 KM12C의 MICA, MICB, ULBP1 및 ULBP2의 표면 단백질 발현 수준이 감소하였고 TGF-β 억제제인 galunisertib에 의해 MICA, MIAB, ULBP1, ULBP2 및 ULBP3의 발현이 증가하였다. 그러나 KM12SM과 KM12L4A에서는 TGF-β 또는 galunisertib에 의한 유의성 있는 NKG2DLs의 변화를 보지못하였다. Galunisertib를 통한 TGF-β 신호전달 억제는 KM12C에 대한 NK 세포 매개 항암 면역 반응을 개선했지만 KM12SM과 KM12L4A에 대한 유의성 있는 반응을 나타내지 않았다. 따라서 TGF-β 신호 전달을 억제하면 KM12C에 대한 NK 세포 매개 항암 면역 반응은 개선할 수 있지만 KM12SM 및 KM12L4A에서는 TGF-β 신호 전달 억제를 통한 NKG2DLs 발현의 증가 및 향상된 NK 세포 매개 암 면역 반응을 기대하기는 어려울 것으로 생각된다.
Ulcerative colitis (UC) is a serious gastrointestinal tract disease characterized by recurrent chronic inflammation and mucosal damage of the gastrointestinal tract. The conventional therapies of choice are anti-inflammatory agents, steroids and anti-TNF-${\alpha}$ therapy. However, inherent limitations in these therapies have steered many UC patients to supplement existing therapies with alternative medicinal products. In the current study, we tested the efficacy of Gingko bilola extract (EGb 761) in abating colonic inflammation in a DSS-induced murine model of colitis. C57BL/6 mice were administered 2% DSS in the drinking water for 7 days, then regular water for 7 days, and then 2% DSS for an additional 7 days. EGb 761 (1 mg/dose) was oral gavaged daily for the duration of the experiment. At the termination of the experiment, mice treated with EGb+DSS showed higher body weight, lower spleen weight and longer colon length compared to mice treated with DSS alone. HE-stained colon tissues also exhibited less histologic inflammation in mice treated with EGb+DSS mice compared to mice treated with DSS alone. The serum levels inflammatory cytokines, KC and TNF-${\alpha}$, were also decreased in mice treated with EGb+DSS compared to mice treated with DSS alone. Finally, addition of EGb 761 to TNF-${\alpha}$ treated colonic cell line (HT29/c1) decreased secretion of IL-8 in vitro. These results collectively suggest that EGb 761 abates induction of colitis in DSS-induced model of colitis in mice.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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