This investigation was performed to isolate and identify Staphylococcus sp. from air at the 25 sites in one hospital in Daegu. Drug sensitivity tests bacteriologically were also studied. The results are summarized as follows: 1. In gram staining of isolated colonies, the number of staphylococci strains was 959(70.2%) among 1367 collected in the morning, and 653(66.2%) among 987 collected in the afternoon. 2. The number of isolates was slightly higher in samples collected from the outpatient treatment rooms and wards in the main building than in samples from the other sites. 3. In biochemical tests of 1612 strains of isolates gram positive cocci, the number of coagulase positive strains was 584(36.2%) and coagulase negative 1028(63.8%). In experiments on growth on mannitol agar containing 7.5% NaCl and mannitol fermentation tests, the number of mannitol fermentation strains was 423(30.8%) and nonfermenter was 951(59.2%). 4. In antibiotic sensitivity tests of 746 identified strains of staphylococci, coagulase positive strains showed resistance in. higher portions to penicillin(89.7%), chloramphenicol(64.6%), gentamycin (52.1%) and tetracycline(45.2%), whereas in lower portions to kanamycin(39.2%) and apmicillin(33.1%). 5. Among coagulase negative and mannitol fermenting strains, higher portions showed resistance to chloramphenicol(76.5%), penicillin(69.8%) and ampicillin(63.6%), whereas lower portions showed resistance to kanamycin(48.8%), tetracycline(39.5%) and gentamycin(34.0%). 6. The number of strains showing multiple resistance to above 6 antibiotics were 15(52(19.8%) among coagulase positive and mannitol non-fermenter and 36(22.2%) among coagulase negative and mannitol fermenter.
In this study, the distribution of the mec regulator genes and the presence of the mutation in mecI gene and mec promoter region among 50 MRSA clinical isolates derived from a single university hospital in Korea were analyzed. Among 50 MRSA strains, 13 strains had a deletion of mecI gene, and 37 strains were found to have mutations in mecI gene or mecA promoter region corresponding to a presumptive operator of mecA, i.e., the binding site of the repressor protein. Furthermore, in order to track the evolution of methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) distributed in Korea, we determined the MRSA clonotype by combined use of genetic organization patterns of mec regulator genes, ribotype, and coagulase type. As the result, 48 of 50 MRSA strains could be classified into four distinct clones. Clonotype I is characterized by the coagulase type 3, deletion of mecI gene, and ribotype 1 shared by NCTC10442, the first reported MRSA isolate in England (9 strains). Clonotype II is characterized by the coagulase type 4, C to T substitution at position 202 of mecI gene, and ribotypes 2, 3 and 4 shared by 85/3619 strain isolated in Austria (10 strains). Clonotype III is characterized by the coagulase type 2, mutations of mecA promoter region and/or mecI, and ribotypes 4, 5, and 6 shared by N315 strain isolated in Japan (25 strains). Clonotype IV is characterized by the coagulase type 4, deletion of mecI gene, and ribotype 7 (4 strains). The clonality of two strains could not be determined due to their undefined ribotype.
부산시 동아대학병원으로 내원한 83명의 환자 가건물로부터 methcillin 내성 Stphylococcus aureus(MRSA) 88 균주를 분리하고 응고 효소의 유형별 분석과 다약제 내성의 상호 관계를 연구하였다. 농(64.7%), 객담(26.2%), 기타 혈액, 장액 및 뇨로부터 균주가 분리되었고 mec A 유전자에 특이적인 primer 5'-AAAATCGATGGTAAAGGTT-GGC-3'와 5'-AGTTCTGCAGTACCGGATTTGC3'를 사용하여 PCR을 한결과 86균주에서 mec 유전자가 확인되었다. 응고효소형은 제 III형이 50%m IV형이 12.5%, III형이 6.8%, I, VII, VIII형이 4.5%로 제 II형이 가장 많았으며 제 V형은 전혀 분리되지 않았다. 응고효소형의 병동별 분포는 일반외과에서 제 II형이, 이비인후과 외래에서는 제 IV형이 우점종으로 분리되었다. 항균제 감수성 시험결과, vancomycin과 teicoplanin에서 전균주가 감수성을 나타내었었고 penionillin, cephalothin, erythromycin, gentamycin, imipenem, clindamycin, ciprofloxacin과 oxacillin등 8가지의 항균제에 대하여 동시내성을 나타낸 균주가 71주 (81%)였다. 항균제 내성과 응고효소형과의 상관관계는 없었다.
사람에서 분리되는 Staphylococcus aureus 의 병원성과의 관계를 검토할 목적으로 건강인과 환자의 손에서 Staphylococcus aureus를 분리하여 병원성과 관련된 몇가지 특성과 enterotexin 산생성을 조사한 바 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Staphylococcus aureus의 분리빈도는 건강인에서 17.7% 환자에서 14.0%로 나타났다. 2. 공시한 61주는 면양혈액비지상에서 β용혈성이 67.2% α용혈성이 32.8%로서 분리균 모두가 용혈성을 나타내었고 mannitol 분해 , lecithinase, TNase 및 DNase 시험에서 공시한 전 균주가 양성반응을 보였다. 3. Ushioda 등의 방법에 의하여 coagulase type을 분류한 바 공시한 46주 가운데 91.3%가 형별되었고, 이들 중 type VII(38.4%)과 III(26.0%)가 비교적 높은 분포를 나타내었다. 유래별로 보면 건강인 유래주는 22주 중 type VII(12주)이 가장 많았고, 화자 유래주는 24주 중 type III(9주) 및 II(6주)가 높은 분포를 보였다. 4. Enterotoxin 산생율은 46균주 중 52.2%였고 분리된 enterotoxin type은 C(50.0%), B(37.5%) 및 A (12.5%) 였다. 유래별로 보면 건강인 유래주는 type C와 B로 환자 유래주는 type B,A 및 C로 분류되었다. 5. Coagulase type에 따른 enterotoxin 산생율은 type II, III 및 VII 의 순으로 각각 100%, 75%, 및 39.1% 였다. 이들 가운데 coagulase type II는 enterotoxin type B 및 C를 type VII은 type C를 산생하는 균이었고, 대체적으로 건강인 유래주는 enterotoxin type C를 환자유래균은 type B를 생성하는 균이 많은 것으로 인정되었다.
Staphylococcus aureus is a causative pathogen of bovine mastitis. It is recognized as a common pathogen in human and animal and specially enterotoxin-producing strain of S aureus is a common cause of staphylococcal food poisoning in human. Various food originated raw milk, cheese, butter produced from mastitic cow causes staphylococcal food poisoning. It is difficult to treat the staphylococcal mastitis because of increasing resistance by using overdose of antibiotics. This study was conducted to investigate the enterotoxin-production and coagulase serotypes of S aureus in Chonnam province for 6 month, 1999. Also we studied the antibiotic resistant pattern with 14 types against isolates. 18(10.1%) S aureus were isolated from 178 raw milk samples in seven farms. and 8 strains(38%) were isolated in 21 raw milk samples which was below 500,000 somatic cells. We identify that 7(87.5%) of 8 isolates and 15(83.3%) 18 isolates produce enterotoxin. Their enterotoxin serotype was type B(66.7%), type A(33.3%) and type C(13.3%). Also 2 strains of isolates was positive to the type A and B. Coagulase serotype of isolates was 2, 3, 4, 7, and 8. Most stains(70.6%) were serotype 2. And most strains(17 isolates, 94.4%) except one isolate was multiple resistant to the tested antibiotics.
Mastitis is a common and serious infection of the mammary gland in dairy cattle and has a major economic impact on the production of milk and dairy products. Bacterial mastitis is caused by several pathogens and is most frequently associated with coagulase-negative staphylococci (CNS). Although CNS are typically associated with subclinical or mild mastitis, the importance of CNS has increased as these pathogens have emerged as predominant mastitis-related pathogens in many countries. CNS can cause persistent infections, resulting in increased milk somatic cell counts and thereby affecting milk quality and decreasing milk production. Globally, Staphylococcus chromogenes, S. epidermidis, and S. simulans are the predominant CNS species in dairy cattle mastitis. Antibacterial resistance of CNS varies with species, and most CNS are susceptible to vancomycin and resistant to penicillin and tetracycline. As the most frequently isolated CNS species, some strains of S. chromogenes exhibit phenotypic resistance to ampicillin, erythromycin, oxacillin, penicillin, and tetracycline. Some strains of S. epidermidis and S. haemolyticus are only susceptible to vancomycin and rifampicin. Therefore, more studies are needed to achieve the control and prevention of CNS as environmental pathogens.
We evaluated the performance of a novel screening test, PBP2a MRSA rapid kit (Dinona Inc., Iksan, Korea), for methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) based on a immunochromatographic assay. The test is able to detect penicillin-binding protein 2a (PBP2a) using the nasal specimens from health care workers. The nasal specimens were obtained from 69 healthcare workers and were incubated in enrichment broth followed eight hours incubatin in BHI with cefoxitin $4{\mu}g/mL$. These broth were tested by PBP2a Rapid Kit. The enrichment broths were also directly tested for tube coagulase using the conventional identification method. 19 of 22 MRSA showed positive results by PBP2a rapid test and direct coagulase test (the sensitivity for detection of MRSA, 86.36%). While, 8 of 47 non-MRSA showed false positive results for the two tests. All of the 8 non-MRSA which showed false positive were co-colonizing isolates with MRCNS and MSSA. In addition, 46 of 49 methicillin-resistant staphylococci (MRS) showed positive results for PBP2a MRSA rapid kit (the sensitivity for detection of MRS, 93.8%), and all of 20 non-MRS showed negative results (specificity, 100%). The combination of PBP2a MRSA rapid kit and direct coagulase test showed the good sensitivity for detection of MRSA from anterior nares but frequently showed false positive results from the co-colonizing carrier with MRCNS and MSSA.
Methicillin-resistant coagulase-negative staphylococci (MRCNS) were isolated from the respiratory sites of chickens in 4 farms and slaughter house located in Chungnam provinces. Isolation of coagulase-negative staphylococci (CNS) was positive for 61 (26.6%) of the 229 chickens tested, and isolation of MRCNS was positive for 17 (27.9%) of the isolated CNS. A total of 17 MRCNS isolates were selected and subjected to identification. Of the 17 MRCNS isolates selected, 6 were identified as Staphylococcus cohnii, 2 as S. saprophyticus, 3 as S. simulans, 3 as S. lentus, 2 as S. carnosus, and 1 as S. xylosus. The MRCNS isolates were resistant to many beta-lactam antibiotics, and some isolates were also resistant to macrolide and aminoglycoside antibiotics. The mecA gene was detected in some isolates of each MRCNS strains. The mecA-positive isolates were classified into five staphylococcal cassette chromosome mec (SCCmec). SCCmec types I to IV were detected in isolates from chickens.
To shed light on the genetic differences among food-originated coagulase-negative Staphylococcus (CNS), we performed pan-genome analysis of five species: Staphylococcus carnosus (two strains), Staphylococcus equorum (two strains), Staphylococcus succinus (three strains), Staphylococcus xylosus (two strains), and Staphylococcus saprophyticus (one strain). The pan-genome size increases with each new strain and currently holds about 4,500 genes from 10 genomes. Specific genes were shown to be strain dependent but not species dependent. Most specific genes were of unknown function or encoded restriction-modification enzymes, transposases, or prophages. Our results indicate that unique genes have been acquired or lost by convergent evolution within individual strains.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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