인간의 상피세포로부터 유래된 암세포의 일종인 HeLa 세포는 거의 모든 기질분자에 부착하지만 spreading은 오직 collagen 혹은 gelatin에서만 일어난다. HeLa 세포의 spreading은 오직 collagen 결과 활성화된 phosphoipase $A_2$(PLA$_2$)에 의한 arachidonic acid(AA)의 형성으로 유도된다. PLA$_2$에 의해 분해되는 인지질을 확인하기 위해 각종 인지질의 농도변화를 spreading 과정에서 측정한 결과 단지 phosphatidylcoline 만이 감소하였으며, 또한 다양한 lysophospholipids 중 lysophosphatidylcholine 만이 spreading 과정에 생성되는 것으로 보아 phosphatidylcoline이 PLA$_2$에 의해 분해되어 AA가 형성되는 것으로 보인다. PLA$_2$의 활성화는 세포질 CA$_2$+의 농도변화 및 세포질 pH의 알칼리화에 기인하지 않으며, 또한 pertussis 혹은 cholera toxin-sensitive G protein 역시 PLA$_2$활성화와는 무관한 것으로 나타났다.
The stringent response (SR) is characterized as a bacterial defense mechanism in response to various growth-inhibiting stresses. It is activated by accumulation of a small nucleotide regulator, (p)ppGpp, and induces global changes in bacterial transcription and translation. Recent work from our group has shown that (p)ppGpp plays a critical role in virulence and survival in Vibrio cholerae. The genes, relA and relV, are involved in the production of (p)ppGpp, while the spoT gene encodes an enzyme that hydrolyzes it in V. cholerae. A mutant strain defective in (p)ppGpp production (i.e. ${\Delta}relA{\Delta}relV{\Delta}spoT$ mutant) lost the ability to produce cholera toxin (CT) and lost their viability due to uncontrolled production of organic acids, when grown with extra glucose. In contrast, the ${\Delta}relA{\Delta}spoT$ mutant, a (p)ppGpp overproducer strain, produced enhanced level of CT and exhibited better growth in glucose supplemented media via glucose metabolic switch from organic fermentation to acetoin, a neutral fermentation end product, fermentation. These findings indicates that (p)ppGpp, in addition to its well-known role as a SR mediator, positively regulates CT production and maintenance of growth fitness in V. cholerae. This implicates SR as a promising drug target, inhibition of which may possibly downregulate V. cholerae virulence and survival fitness. Therefore, we screened a chemical library and identified a compound that induces medium acidification (termed iMAC) and thereby loss of wild type V. cholerae viability under glucose-rich conditions. Further, we present a potential mechanism by which the compound inhibits (p)ppGpp accumulation. Together, these results indicate that iMAC treatment causes V. cholerae cells to produce significantly less (p)ppGpp, an important regulator of the bacterial virulence and survival response, and further suggesting that it has a therapeutic potential to be developed as a novel antibacterial agent against cholera.
연구 배경 : 세계적으로 Asian dust로 알려져 있는 황사는 주로 봄철 중국과 몽고의 사막지역에서 발생하는 모래먼지로 수천 킬로미터를 이동하여 낙하하는 자연적으로 발생되는 대표적인 오염 물질이다. 한반도에 영향을 미치는 황사는 주로 $10{\mu}m$이하의 미세먼지($PM_{10}$)로서 $PM_{10}$의 증가는 황사현상의 증가와 매우 밀접한 관련이 있다. $PM_{10}$은 호흡기에 침착이 가능하고 따라서 호흡기 증상 및 폐기능에 영향을 미치는 것으로 알려져있으나 아직 이에 대한 병리기전의 연구는 미미하여 기존에 추정되는 $PM_{10}$의 병리기전 이외에 황사 먼지의 이동에 따르는 미생물의 전파, 특히 바이러스의 전파에 대한 연구는 임상적으로 의미가 있을 것으로 생각되며 황사시 바이러스 감염 질환 자체의 발생을 알아 보기위해 황사시 대기에서 시료를 채취하여 바이러스의 존재 유무에 대해 연구하였다. 방 법 : $PM_{10}$은 인천지역 10군데에서 측정하였으며 고용량 대기 포집기(HA 500F, Sibata, 일본)를 이용하여 하루에 한번씩 포집하였다. 공기포집기의 흡입용량인 500 L/min으로 6시간 시행하였다. 시료를 흡착하기 위하여 $0.25{\mu}m$ pore size의 지름이 110mm 인 Glass microfiber filter( Prefilter AP 15, 124mm)를 이용하였다. nfluenza virus, 구제역에 관계된 Piconaviridae의 Aphthovirus속인 RNA바이러스, Hog cholera virus 돼지콜레라 바이러스) 의 검출을 위해 수집한 membrane filter를 전처리하여 Polymerase chain reaction으로 바이러스를 확인하였다. 결 과 : 연구 기간 중 24시간 평균 $PM_{10}$수치는 황사 발생일에 $148.0{\mu}g/m^3$, 비황사발생일에 $57.0{\mu}g/m^3$ 로 차이를 보였다. 2003년과 2004년 4월부터 8월 사이에 채취한 시료에서 검출 대상 바이러스인 Influenza virus A, B, Hog cholera virus, 구제역에 관련된 Aphthovirus등은 검출되지 않았다. 결 론 : 연구는 연구기간 동안에 황사의 발생이 적어 충분한 연구가 되지 못하였으며, 또한 검출하고자 했던 바이러스질환의 발생도 적어 실제 황사와의 관련성을 규명하기에 적절한 연구가 이루어지질 못했다. 향후 황사 발생과 바이러스질환의 유행이 일치하는 시점에 좀더 광범위한 시료의 채취 방법으로 연구가 필요할 것으로 생각된다.
Coelomoic fluid protein (CP), a vitellogenin contained in the coelomic fluid of polychaetes, is transported by receptor-mediated endocvtosis that is controlled by GTP-binding proteins. Transport of 125l-CP was markedly inhibited by AlF4 and toxins such as cholera toxin and pertussis toxin. These effects appear to be mediated by cAMP, since 125l-CP transport was also greatly inhibited by dibutyryl cAMP. The results strongly suggest that hetero trimeric G-protein is involved in the regulation of 125l=CP transport through the activation of adenylyl cyclase. Immunoblotting tests with antibodies against Gsa and Gia subunits showed a Gsa subunit of 45 kDa in the membrane of oocytes of intermediate and large size classes and a Gia subunit of 41 kDa only in the oocytes of the intermediate size class.
Pasteurella multocida, a Gram-negative facultative anaerobic bacterium, is a causative animal pathogen in porcine atrophic rhinitis and avian fowl cholera. For the development of recombinant subunit vaccine against P. multocida, we cloned and analyzed the gene for outer membrane protein H (ompH) from a native strain of Pasteurella multocida in Korea. The OmpH had significant similarity in both primary and secondary structure with those of other serotypes. The full-length, and three short fragments of ompH were expressed in E. coli and the recombinant OmpH proteins were purified, respectively. The recombinant OmpH proteins were antigenic and detectable with antisera produced by either immunization of commercial vaccine for respiratory disease or formalin-killed cell. Antibodies raised against the full-length OmpH provided strong protection against P. multocida, however, three short fragments of recombinant OmpHs, respectively, showed slightly lower protection in mice challenge. The recombinant OmpH might be a useful vaccine candidate antigen for P. multocida.
영-과잉(zero-inflation) 현상은 최근 계수(count) 시계열 분석의 주요토픽으로 다루어지고 있다. 본 논문에서는 영-과잉 계수 시계열의 변동성을 연구하고 있다. 기존의 정수형 모형인 INGARCH(integer valued GRACH) 모형에 조건부 포아송 및 조건부 음이항 분포를 사용하여 변동성에 영-과잉 현상을 추가하였다. 모수 추정 방법으로 EM알고리즘을 사용하였으며 국내 콜레라 발생건수에 적용시켜 보았다.
1988년부터 1990년 6월까지 전국의 양돈장에서 수집된 돼지 유사산 태아 74복에서 바이러스성 원인체 분리 및 혈청학적 진단을 수행하였던 바 다음과 같은 결과를 얻었다. 공시한 74복의 유사산 태아중 44복의 태아 흉강액에서 면역 globulin이 검출되어 전염성 질병감염에 의한 유사산으로 추정되었다. 이중 37%가 바이러스성 유사산으로 나타났으며 유사산의 원인체별 분포를 살펴보면 돼지 파보바이러스가 21%로 가장 높았으며, 뇌심근염 바이러스가 11%, 일본뇌염 바이러스가 9% 등의 순으로 나타났다. 한편 돼지 콜레라바이러스 및 오제스키병 바이러스에 의한 유사산이 각각 1건씩 검출되었으며 동일 유사산 태아에서 2가지 병원체가 중복감염된 예도 관찰되었다.
Kim, Seong-Han;Kim, Jun-Young;Kang, Yeon-Ho;Park, Yong-Keun;Lee, Bok-Kwon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제16권11호
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pp.1814-1818
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2006
Vibrio cholerae O1 El Tor isolates (n=242), collected in Korea between 1991 and 2002, were classified by NotI-digested pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The major types were Al before 1998 and B after 1999, among both domestic and imported cases. The prevalent PFGE types among domestic cases were consistent with the prevalent types among imported cases in the same year. These results suggest a close relationship between the domestic and imported cases of cholera in Korea.
Helicobacter pylori is a major cause of gastric-associated diseases. In our previous study, the Adhesin/CTXA2B was expressed as insoluble recombinant chimeric protein derived from the H. pylori adhesin genetically coupled to CTXA2B subunit in Escherichia coli. Since it is very important to optimize IPTG concentration, culture temperature and composition of medium to maximize cell growth and productivity, these conditional growth factors were determined for increasing the productivity of the expressed Adhesin/CTXA2B chimeric protein in Escherichia coli JM101 carrying pTEDhpa/ctxa2b. Our data demonstrate that optimal medium for increased production of chimeric protein was a YCP/Glu medium composed of 2% yeast extract, 1% casamino acid, phosphate solution [0.3% $KH_2P0_4$, 0.4% $Na_2HP0_4$, 0.25% ($NH_4)_2HPO_4$], and 0.5% glucose. In addition, optimal concentration of IPTG was 1 mM and culture temperature, $37^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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