Recently gene delivery has been designed newly using bioactive biomaterial and applied in the various field by many researchers. In this study, we proposed a new gene delivery system which has the capability of targeting effect in the specific tissue and remarkably enhanced transfection efficiency. We investigated $^1H-NMR$ spectroscopy, particle size analyzer and gel retardation to confirm the correct preparation of gene delivery. Also, we identified the hemo-compatibility of gene delivery by hemolysis assay, non-cytotoxicity by MTT test and transfection efficiency. The uptake mechanism of the gene carrier was confirmed using inhibitor agent such as sodium azide, indomethacin, quercetin, colchicine, and chloropromazine. As a results, it was identified that gene carrier prepared by in this study entered in the cell by the microtubule-dependent, energy-dependent and clathrin-mediated endocytosis pathway.
Kim, Sang-Wan;Bae, Hong-Ki;Nam, Hye-Sung;Chung, Dong-June;Choung, Pill-Hoon
Macromolecular Research
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제14권1호
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pp.94-100
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2006
Although the peripheral nerve system has a relatively good regenerating capacity compared to the central nerve system, peripheral nerve repair remains a clinical challenge as restoration of normal nerve function is highly variable. Synthetic tubular nerve conduits were designed as an alternative repair method in order to replace the need for an isograft. These nerve conduits guide regenerating axons from the proximal toward the distal end, maintain within growth-promoting molecules released by the nerve stumps, and protect regenerating axons from infiltrating scar tissue. In this work, we prepared cinnamoylated alginate (CA)-collagen-chitosan nerve conduit using the lyophilization method to generate a controllable parallel channel in the center and then investigated its influence on peripheral nerve regeneration in an animal study. At 12 weeks after implantation, histological study showed that tissue cable was continuously bridging the gap of the sciatic nerve in all rats. Our newly developed nerve conduit is a promising tool for use in peripheral nerve regeneration and provides a suitable experimental model for future clinical application.
본 논문에서는 생체적합성 고분자들의 자기 조립 특성을 이용하여 마이크론 단위의 캡슐을 제조하여, 캡슐 내부에 단백질을 넣고 시간과 pH에 따른 방출 거동을 고찰하였다. 본 연구에서는 키토산과 헤파린 그리고 알지네이트를 사용하여 동공(hollow) 캡슐을 제조하였다. 멜라민과 포름알데히드를 일정 비율로 혼합하여, 표면에 전하를 가지는 마이크론 단위의 core를 제조한 후, 음전하를 가지는 헤파린 혹은 알지네이트를 core 위에 흡착시키고, 양전하를 띠는 키토산을 흡착시킨 후, core 위에 교대로 흡착시켜 Multilayer를 형성시켰다. 4 층을 쌓은 후에 HCl을 이용하여 pH 2로 조절하면, core는 제거되고 속이 비어 있는 캡슐을 제조할 수 있었다. 동공 캡슐은 투과전자현미경, 표면주사현미경 및 광학현미경으로 관찰하였다. 이러한 캡슐은 pH에 따라서 각기 다른 거동을 보이는데, 본 연구에서는 내부에 FITC-albumin을 넣어 UV분광기로 방출되는 상대적인 양을 관찰한 결과, 키토산-헤파린 캡슐과 키토산-알지네이트 캡슐은 각기 다른 pH에서 개폐됨을 알 수 있었다.
Kim, Chun-Ho;Park, Hyun-Sook;Gin, Yong-Jae;Son, Young-Sook;Lim, Sae-Hwan;Park, Young-Ju;Park, Ki-Sook;Park, Chan-Woong
Macromolecular Research
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제12권4호
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pp.367-373
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2004
We have developed a rigorous heat treatment method to improve the biocompatibility of chitosan as a tissue-engineered scaffold. The chitosan scaffold was prepared by the controlled freezing and lyophilizing method using dilute acetic acid and then it was heat-treated at 110$^{\circ}C$ in vacuo for 1-3 days. To explore changes in the physicochemical properties of the heat-treated scaffold, we analyzed the degree of deacetylation by colloid titration with poly(vinyl potassium sulfate) and the structural changes were analyzed by scanning electron microscopy, Fourier transform infrared (FT-IR) spectroscopy, wide-angle X-ray diffractometry (WAXD), and lysozyme susceptibility. The degree of deacetylation of chitosan scaffolds decreased significantly from 85 to 30% as the heat treatment time increased. FT-IR spectroscopic and WAXD data indicated the formation of amide bonds between the amino groups of chitosan and acetic acids carbonyl group, and of interchain hydrogen bonding between the carbonyl groups in the C-6 residues of chitosan and the N-acetyl groups. Our rigorous heat treatment method causes the scaffold to become more susceptible to lysozyme treatment. We performed further examinations of the changes in the biocompatibility of the chitosan scaffold after rigorous heat treatment by measuring the initial cell binding capacity and cell growth rate. Human dermal fibroblasts (HDFs) adhere and spread more effectively to the heat-treated chitosan than to the untreated sample. When the cell growth of the HDFs on the film or the scaffold was analyzed by an MTT assay, we found that rigorous heat treatment stimulated cell growth by 1.5∼1.95-fold relative to that of the untreated chitosan. We conclude that the rigorous dry heat treatment process increases the biocompatibility of the chitosan scaffold by decreasing the degree of deacetylation and by increasing cell attachment and growth.
키토산과 폴리카프로락탐 (PA6) 복합체의 박막을 개미산을 사용하여 만들었다. FT-IR 분광학적 자료는 키토산의 히드록시기와 PA6의 아마이드기 사이의 수소 결합이 형성되었음을 보여주었다. 열무게분석법은 혼합체 시료는 수분을 포함하고 있음을 나타내었다. 시료 속의 물의 분산은 저장 탄성률 (E')을 크게 감소한다고 DMA 결과는 보여주었다. 혼합체 시료의 기게적 손실 탄젠트 (tan $\delta$) 자료는 $\beta$d 손실 피크가 $0^{\circ}C$ 부근에서 나타남을 보여주었다. 혼합체 시료들은 진공에서 완전히 건조하였고 그 다음 소위 w-다리를 만드는 물을 흡수할 수 있도록 높은 습도 속에 두었다. 이 시료들의 E' 자료는 비정상적으로 증가하였고 $50^{\circ}C$ 부근에서 손실 피크의 어깨에 추가적인 손실 피크가 나타났다. 건조한 조건하에서는, 40/60 혼합 비율의 키토산/PA6가 두 성분의 섞임성이 더 좋았다.
To develop the removal technique of algal bloom the efficiencies of algal flocculation/ autoflotation by the kinds of coagulant and oversaturated oxygen concentration were investigated. The summarized results are as follow. 1. In the algae flocculation test with alum[$Al_2(SO_4)_3{\cdot}18H_2O$], optimum pH was 5.5 and, with chitosan optimum pH was 7.0. 2. Chitosan which was natural polymer showed the 5~10 times higher algal biomass flocculation efficiency than alum in the condition of same algal concentration. 3. For the each coagulant, the higher ${\Delta}DO$(oversaturated dissolved oxygen concentration - saturated dissolved oxygen) was, the faster the rising velocity of the algal floc was. 4. In the condition of about 4mg/L ${\Delta}DO$, the rising velocity of chitosan is about 2 times higher than that of alum, and chitosan formed the stronger algal floc.
Biodegradable films were prepared by solution blend method in the weight ratio of chitosan for the purpose of useful biomaterials. The possibility of biomaterials prepared from natural polymer as a skin substitute was evaluated by measuring biocompatibility. These films were inserts in the back of rat and their biodegradability was investigated by the film weight and hematology as a function of time for the biotransformation. The result of rat test showed that medium, high viscosity chitosan induced some suspects of inbiocompatibility in the tissue by goreign body reaction 48 and 72 hours after implantation. Also, we prepared the official burn ointment which is made by low viscosity chitosan. This burn ointment was covered on the skin wound of artificial burn and their effect of healing was investigated by the evaluation of the naked eye and hematological change as a function of time. The result of rats test showed that burn ointments made from chitosan was effective reductio of inflammation than negative group.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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