뽕나무 고조삽목에 있어서 신광뽕을 삽수로 하고 15일간 온도를 15, 20, 25 및 3$0^{\circ}C$로 달리하여 유합촉진시킨 후 3$0^{\circ}C$ 온실베드에 삽목하였을 경우 온도별 발근생장에 미치는 영향을 검토하였다. 1. 유합촉진온도가 높으면 발아가 촉진되어 25 및 3$0^{\circ}C$의 겨우 각각 삽목 6일과 4일후부터 발아하기 시작하여 15일과 10일 후에 100% 발아하였다. 그러나 15 및 2$0^{\circ}C$에서는 8일후부터 발아하기 시작하여 15일 후에 각각 85%, 92% 발아하였다. 2. 높은 온도에서는 조기에 높은 발근율을 나타내어 삽목 15일 g수에 25-3$0^{\circ}C$에서 97-100%이었고 그 이하의 낮은 온도에서는 93%로서 비교적 낮았으며 35일 후에도 같은 경향이었다. 3. 삽목 15일 후에 뿌리수 및 길이는 온도가 높은 만큼 증대하였으나 35일 후의 뿌리수 및 무게는 2$0^{\circ}C$ 이상에서 차가 없었다.
뽕나무(품종:신광뽕) 고조삽목에 있어서 삽수를 NAA 농도를 달리하여 2주간 유합촉진한 후 온실에 삽목한 경우 농도에 따른 발아 및 발근생장에 미치는 영향을 알기 위하여 시험한 결과는 다음과 같다. 1. 삽수동아의 발아생장은 NAA 농도가 높아짐에 EK라 삽목후 10일까지는 억제되어 지연되었다. 그러나 유합촉진 2주후에는 150ppmrn를 제외하고는 93% 이상 대부분 발아되었다. 2. NAA 농도별 발근은 삽목 15일 후 높은 농도에서 비교적 높은 발근율을 나타내었으며 이후 어느 농도에서나 증가하여 35일 후에는 매우 높은 농도(150ppm)에서 낙해발생으로 인한 다소 낮은 발근율을 제외하고는 그 이상 농도에서 100%의 발근율을 나타내었다. 3. 평균 뿌리길이는 농도가 높아짐에 따라 적었으나 주당 뿌리수, 뿌리길이 및 무게는 50ppmrn가 가장 많았다.
Grateloupia filicina (J.V. Lamouroux) C. Agardh (Halymeniaceae, Cryptonemiales, Rhodophyta) is an edible seaweed as well as an important source of carrageenan. In the present study, attempt has been made to develop a suitable protocol for effective regeneration of the seaweed and the rapid multiplication of the desired varieties. The young upright thallus of G. filicina was grown in axenic culture using both solid and liquid media. The various media tested were f/2, Provasoli’s Enriched Seawater (PES) and Enriched Seawater (ESW). The effect of glycerol (as a carbon source) and various plant growth regulators i.e. auxin (NAA) and cytokinins (Kinetin and BA) were tested. Although, regeneration of young thalli was observed from the cut ends in all the media, better growth was found in f/2, PES, f/2 (0.5% Glycerol), f/2 (NAA ${10^{-5}}_M)\;and\;f/2\;(BA\;{10^{-6}}_M$). On the other hand callusing was observed only in solid media supplemented with low concentration of Glycerol (0.5%) in f/2, NAA ${10^{-5}}_M\;in\;f/2,\;PES\;and\;BA\;{10^{-5}}_M$ in f/2. Young thalli were developed from the callus sub culture after 40 days of inoculation.
Agrobacterium-mediated transformation of American ginseng (Panax quinquefolius L.) with strain LBA 4404 containing a rice thaumatin-like protein gene is described. The selectable markers used were phosphinothricin acetyltransferase and hygromycin phosphotransferase genes. Epicotyl explants from seedlings were precultured for 5-7 days on Murashige and Skoog medium with ${\alpha}$-naphthaleneacetic acid and 2,4 dichlorophenoxyacetic acid at 10 ${\mu}$M and 9 ${\mu}$M, respectively (ND medium), prior to Agrobacterium infection. The explants were immersed in a bacterial suspension for 20 min. A post-infection co-culture period of 3-4 days was provided on ND medium. Selection for transformed calli was conducted on ND medium with 20 mg/L phosphinothricin followed by 100 mg/L hygromycin over an 8-month period. it transformation frequency of 24.8% was achieved at the callusing phase. The presence of the transgenes in calli was confirmed by Southern hybridization and polymerase chain reaction analysis. The expression of the thaumatin-like protein gene in ginseng calli was demonstrated by Western blot analysis. Somatic embryos were produced from both transgenic calli and suspension cultures, and plantlets were recovered that expressed the transgenic thaumatin-like protein gene.
The goal of this research was to develop an efficient cryopreservation protocol for germplasms of yam (Diosorea batatas), that were cultivated in Korea. Comparative studies with four other cryogenic techniques and subsequent experiments for shoot regrowth were conducted. in vitro-grown shoot-apices of the D. batatas were successfully cryopreserved by encapsulation-dehydration. The maximum survival of shoot-apices could be achieved when the precultured (with 0.3 M of sucrose for one day) and encapsulated (with a 3%(w/v) Na-alginate solution) apices were dehydrated for $3.5{\sim}4\;h$ prior to direct immersion in LN (liquid nitrogen). The frequency of regrowth rate of cryopreserved apices was not decreased during 3-month storage period. The thawing method markedly affected survival of the cryopreserved apices, and thawing at $40^{\circ}C$ for 3 min produced the best results. When cryopreserved apices were post-cultured on the post-culture medium (MS), supplemented with $0.2mgl^{-1}$ of BA ($N_6$-benzyladenine) and $0.2mgl^{-1}$ of kinetin, they showed direct shooting without callusing.
Park, Jae-Sung;Yi, Gi-Hwan;Nam, Min-Hee;Park, Sun-Ho
Biotechnology and Bioprocess Engineering:BBE
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제6권1호
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pp.51-55
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2001
This study was conducted to establish a plant cell culture system for the production of medically important secondary metabolites from Xanthium strumarium. The effects of plant growth regulators including NAA, 2,4-D, kinetin, and ABA were examined in terms of callus induction, maintenance of callus and suspension cultures. It was shown that callus was induced upon treatment with NAA while embryo was induced after treatment with 2,4-D. Callus formation was further improved by treatment with ABA and NAA. The level of callusing increased by 17-29% for the seed case, cotyledon, leaf, and hypocotyl and by 96% in the case of the root. Suspension cell lines were established using calli produced from cotyledon, hypocotyl and root and cultured at 25$\^{C}$ under light conditions. The cells grew up to 15g/L with NAA 2ppm, BA 2ppm, and ABA 1ppm treatment. Supernatants of suspension cultures of cell lines derived from coyledon and hypocotyl produced some distinctive secondary metabolites, one of which was identified as 8-epi-tomentosin, which belongs to the xanthanolides. The amounts of 8-epi-tomentosin produced by the cotyledon- and hypocotylderived cell lines were 13.4mg/L and 11.0mg/L, respectively.
An efficient protocol was established for high frequency somatic embryogenesis through a callus culture of Coelogyne cristata. The best frequency of callusing was obtained from a PLB segment (3-5 mm) cultured on MS medium supplemented with coconut water (CW) and a combination of both 3 $mg{\cdot}L^{-1}$ of 2,4-D and BA. When the calli were sub-cultured on the MS medium without any PGRs, the average number of somatic embryos were higher than those with PGRs treatment. NAA is the most critical factor among PGRs, which dramatically hindered for the formation of a somatic embryo. The efficacy of the addition of coconut powder (CP) for somatic embryogenesis was almost the same in all treatments. However, the number of somatic embryos formed distinctly depended on age of the callus. The somatic embryos converted into healthy plants with well-developed shoots on the same medium. Plantlets showed the best responses of root and shoot growth when transferred to $\frac{1}{2}$ MS medium containing 1.5 $g{\cdot}L^{-1}$ of activated charcoal. All plants with above 3.0-cm-high were successfully acclimatized in the greenhouse.
In an experiment to evaluate the various aspects of symptom of witches' broom of jujube tree with two different kinds of scions, taken from diseased plant and stem- grafted upon sound stocks-one cut before wintering(stored in cellar), the other after wintering, it was observed that the disease rate of those cut before wintering(Nov.) was $\98\%$ whereas those cut after wintering(March) showed much lower rate, $3\%$ initially and gradually increased up to $39\%$. In another experiment of diseased bud grafted into healthy seedling, the finding made in the following year was that 14 stocks(only one of which salt union by callusing) were infected out of the given 23- in the initial stage only 4, yet gradually increased to the number of 14. The shoots from the ground portion of the diseased stock were in general more quickly subjected to the disease than the others. Under natural condition, the diseased trees develop at first seemingly the same leaves as healthy ones; it is not until the branches and loaves grow to a considerable degree that the symptom appears. Once appearing, tile disease grows and the symptom continues to appear as late as in Sept. and early Oct., causing tile plant to develop the extraordinary branches and leaves of extremely reduced size, the typical symptom of witches' broom. Such phenomenon can be observed in the experiments of the foregoing paragraphs. And the suckers and roots of diseased plant are bound to be infected, it was found out with no exception. Viewing from the results of the above experiments and observation, it is believed that the low temperature during winter causes the virus in the above-ground portion of diseased plant to diminish or inactivated, and subsequently the virus in the roots moves up or multiply in the sprouting season.
Ramakrishna, D.;Chaitanya, G.;Suvarchala, V.;Shasthree, T.
Journal of Plant Biotechnology
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제45권1호
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pp.55-62
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2018
In the present study in vitro mutagenesis was used to study the effect of gamma irradiation and EMS on callus induction, morphogenesis and production of multiple shoots from different explants of Citrullus colocynthis (L.) Schrad. Gamma radiations (5 kR to 20 kR) and certain chemicals have been effected on plant growth developments and changes of biochemical metabolisms in plants. Murashige and Skoog (MS) medium containing with auxins such as NAA, IAA, 2,4-D (0.5 ~ 2.0 mg/l), cytokinines BAP, kn TDZ, (0.5 ~ 2.5 mg/l), L-Glutamic acid (1 ~ 2 mg/l) and Coconut milk (10 ~ 20%). After 5 weeks on induction media, explants and callus (EC) were exposed to 5 kR, 10 kR, 15 kR and 20kR, of gamma radiation and treated with 1, 2, 3, 4 and 5 mM ethyl methane sulphonate (EMS) for 30 min. The highest percentage of callusing was observed (70%) stem irradiated with 5 kR and significantly decrease in fresh and dry weight of callus in the below 4 kR doses and above 20 kR doses, there was a progressive decrease in the fresh weight and dry weights when compared to control callus. Maximum percentage of plantlet regeneration (59%) was induced from callus exposed to 15 kR gamma irradiation on MS media fortified with 2.0 mg/l 2,4-D + 2.0 mg/l BAP + 2.0 mg/l L-glutamic acid. Increase in gamma irradiation dose above 15 kR and 5 mM EMS reduced regeneration capacity of callus. Doses higher than 20 kR and 7 mM EMS was lethal to micropropagated plants of Citurullus colocynthis.
고구마의 정단분열조직을 배양하여 생장조절제의 종류와 농도 및 정단분열조직의 크기에 따른 다아체 증식효과를 조사하였다. NAA와 BA 혼용처리의 경우 0.1 ㎎/L NAA에 2.0 ㎎/L BA혼용처리에서 '목포 29호'와 '산천자'의 경우 배양 30일 후에 100% shoot분화율을 보였고, 뿌리발생률은 '목포 29호'는 66.7%, '산천자'는 69.2%였으며 줄기의 기부 부분에서 형성되었다. Cytokinin류인 kinetin과 BA 0.5∼4.0 ㎎/L 단독처리에서 다아체 분화율이 좋았으며 발달된 shoot의 대부분은 배양 60일 이내에 뿌리발생과 더불어 정상적인 식물체로 재분화되었다. 반면에 '금시'에서는 cytokinin류 단용처리에서 분화된 shoot가 캘러스화되어 정상적인 shoot를 생산하지 못하였다. 캘러스로 덮인 다아체의 shoot가 1∼2마디로 신장된 shoot를 분리하여 4.0 ㎎/L BA 또는 kinetin 처리구에 계대배양하였을 때, 분할된 shoot의 대부분이 줄기의 기부에 캘러스가 형성되면서 계대배양 30일 후에는 정상적인 shoot와 뿌리를 가진 재분화된 식물체의 생산이 가능하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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