Seaweed alginate was acetylated by activated carbon immobilized Pseudomonas syringae in a fluidized bed, up-flow reactor. The acetylation degree of seaweed alginate was about 30%. Calcium-acetylated seaweed alginate gel bead was made and compared to calcium-seaweed alginate gel bead by the scanning electron microscopy (SEM). Structural difference of two gel beads may results from increased viscosity and decreased affinity of acetylated seaweed alginate for calcium ion. On the basis of interior and exterior structure of calcium-acetylated seaweed alginate gels and property of acetylated seaweed alginate, it seems that acetylated seaweed alginate is used for the supporter for electrophoresis and packing materials for liquid chromatography and gel filtration.
This work describes neo-fructooligosaccharides (neo-FOSs) production using the immobilized mycelia of Penicillium citrinum. Some critical factors were evaluated to optimize maximal production of neo-FOS. Optimal alginate and cell concentrations were determined to be $1.96\%$ alginate and $7.17\%$ cell, respectively, by statistical analysis. The optimal concentration of $CaCl_{2}$, which is related to bead stability, was determined to be 2 M. It was possible to increase the neo-FOS production by adding 15 units of glucose oxidase to the batch reaction. By co-immobilizing cells and glucose oxidase, neoFOS productivity increased $123\%$ compared with the whole-cell immobilization process. Based on the results above, a co-immobilization technique was developed and it can be utilized for large-scale production.
Tannase (Tan410) from a soil metagenomic library was immobilized on different supports, including mesoporous silica SBA-15, chitosan, calcium alginate, and amberlite IRC 50. Entrapment in calcium alginate beads was comparatively found to be the best method and was further characterized. The optimum pH of the immobilized Tan410 was shifted toward neutrality compared with the free enzyme (from pH 6.4 to pH 7.0). The optimum temperature was determined to be $45^{\circ}C$ for the immobilized enzyme and $30^{\circ}C$ for the free enzyme, respectively. The immobilized enzyme had no loss of activity after 10 cycles, and retained more than 90% of its original activity after storage for 30 days. After immobilization, the enzyme activity was only slightly affected by $Hg^{2+}$, which completely inhibited the activity of the free enzyme. The immobilized tannase was used to remove 80% of tannins from a green tea infusion on the first treatment. The beads were used for six successive runs resulting in overall hydrolysis of 56% of the tannins.
In this study, Bacillus licheniformis cells were immobilized by entrapment in calcium alginate beads and were used for production of alkaline protease by repeated batch process. In order to increase the stability of the beads, the immobilization procedure was optimized by statistical full factorial method, by which three factors including alginate type, calcium chloride concentration, and agitation speed were studied. Optimization of the enzyme production medium, by the Taguchi method, was also studied. The obtained results showed that optimization of the cell immobilization procedure and medium constituents significantly enhanced the production of alkaline protease. In comparison with the free-cell culture in pre-optimized medium, about 7.3-fold higher productivity was resulted after optimization of the overall procedure. Repeated batch mode of operation, using optimized conditions, resulted in continuous production of the alkaline protease for 13 batches in 19 days.
Extracellular keratinase isolated from Aspergillus flavus K-03 was immobilized on calcium alginate. The properties and reaction activities of free and immobilized keratinase with calcium alginate were characterized. The immobilized keratinase showed proteolytic activity against soluble azo-casein and azo-keratin, and insoluble feather keratin. Heat stability and pH tolerance of keratinase were greatly enhanced by immobilization. It also displayed a higher level of heat stability and an increased tolerance toward alkaline pHs compared with free keratinase. During the durability test at $40^{\circ}C$, 48% of the original enzyme activity of the immobilized keratinase was remained after 7 days of incubation. The immobilized keratinase exhibited better stability, thus increasing its potential for use in industrial application.
The immobilization of enzyme is one of the key issues both in the field of enzymatic research and industrialization. In this work, we reported a facile method to immobilize Candida Antarctica lipase B (CALB) in alginate carrier. In the presence of calcium cation, the enzyme-alginate suspension could be cross-linked to form beads with porous structure at room temperature, and the enzyme CALB was dispersed in the beads. Activity of the enzyme-alginate composite was verified by enzymatic hydrolysis reaction of p-nitrophenol butyrate in aqueous phase. The effects of reaction parameters such as temperature, pH, embedding and lyophilized time on the reactive behavior were discussed. Reuse cycle experiments for the hydrolysis of p-nitrophenol butyrate demonstrated that activity of the enzyme-alginate composite was maintained without marked deactivation up to 6 repeated cycles.
The condition for immobilization of the partially purified agarase from Bacillus cereus ASK202 and the properties of the immobilized enzyme have been investigated. Agarase was immobilized on various supports by entrapment method. The enzyme immobilized on Na-alginate bead showed the highest activity among those studied. The optimal reaction conditions of the immobilized agarase were obtained in 3%(w/v) Na-alginate for the matrix, bead diameter of 2.5mm, 1 unit of agarase solution and 1.0%(w/v) calcium chloride solution. The optimum pH and temperature of the immobilized agarase were pH and temperature of the immobilized agarase were pH 7.0 and 4$0^{\circ}C$, respectively. Km and Vmax values were 0.5mg/ml.min, respectively. The immobilized agarase conerted agar to agarobiose, and their total conversion ratio under the optimal condition was 89%.
The immobilization characteristics of Zymomonas mobilis for ethanol production were examined. Four different strains of Zymomonas mobilis have been used for ethanol production. Among those, Zymomonas mobilis KCTC 1534 has been selected as the best strain for the highest ethanol productivity from glucose and sucrose. The optimum temperature and pH of the selected strain for ethanol production were $37^{\circ}C$ and 5.0 respectively for both free and immobilized cells. When the cells were immobilized by the gel entrapment method, the immobilized cells could produce ethanol at a little higher temperature than free cells. Calcium alginate was selected as the best gel for immobilizing cells. The immobilized cells could maintain the viability of 80% in 10 weeks storage at $4^{\circ}C$ in the medium with 2% calcium chloride. 20-25 hours of preincubation in 10% glucose solution was required for the activation of immobilized cells entrapped within calcium alginate gel.
Park, Sang-Woo;Park, Su-Jeong;Han, Se-Jong;Lee, Jin-Won;Kim, Dong-Shik;Kim, Ji-Heung;Kim, Byung-Woo;Lee, Jee-Won;Sim, Sang-Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.17
no.7
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pp.1208-1212
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2007
Production of extracellular epothilone B, one of the potent anticancer agents, by free and immobilized Sorangium cellulosum was studied using the repeated batch culture process. The concentration of alginate used in immobilization was directly related to the mass transfer rate of nutrients, mechanical stability, and the epothilone B production yield. With the optimized 3% (w/v) calcium alginate carrier, a prolonged repeated batch culture was investigated for the 5 repeated batches for 24 days. The maximum productivity of epothilone B obtained from the alginate-immobilized cells was 5.03 mg/l/day, which is 3 times higher than that of free cells (1.68 mg/l/day).
Sodium alginate was used to immobilize Bifidobacterium breve ATCC 15700 cells. The ability of the Ca-alginate beads to protect the B. breve ATCC 15700 was evaluated under different conditions including alginate concentration, bead size, pH, hydrogen peroxide, and storage period. The survival of the B. Breve ATCC 15700 was estimated in pasteurized yogurt, containing either the immobilized or free cells, throughout the storage period. The survival cells in bead after exposure to acidic solution (pH 3.0) increased with increase of both the alginate gel concentration and bead size. Also, immobilized cells in alginate bead were more resistant than the free cells to hydrogen peroxide, storage period, and the environment inside yogur. When retreated beads with skim milk and nonretreated beads were tested in acidified pH 3.0 TPY media including acetic and lactic acid, the number of viable cells in the retreated bead was approximately 10-fold higher than that of nonretreated beads. This suggests that the skim milk operated as a material decreasing the diffusion of acid and hydrogen perosicde into alginate gels. From this research, it was found that yogurt itself supported immobilized cells with an improved protection from the extreme acidity in yogurt.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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