Park, Ji-Young;Kim, Hyun-Soon;Youm, Jung-Won;Kim, Mi-Sun;Kim, Ki-Sun;Joung, Hyouk;Jeon, Jae-Heung
Journal of Applied Biological Chemistry
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v.49
no.1
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pp.1-7
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2006
Differential display reverse transcription PCR (DDRT-PCR) analysis was performed on lily 'Marcopolo' bulb scale for isolation of expressed genes during bulblet formation. Cu/Zn lily-superoxide dismutase (LSOD) of 872 bp gene, with ability to scavenge reactive oxygen in stress environment, was isolated. Northern blot analysis showed expression levels of LSOD maximized 12 days after bulblet formation. Ti plasmid vectors were constructed with sense and antisense expressions of LSOD gene and transformed into potato. Southern blot analysis of transgenic potatoes revealed different copies of T-DNA were incorporated into potato genome. In transgenic potatoes, lily SOD gene was overexpressed in sense lines and not in antisense lines. In native polyacrylamide gel electrophoresis analysis, additional engineered LSOD was detected in sense overexpressed transgenic line only. Transgenic potatoes were subjected to oxidative stress, such as herbicide methyl viologen (MV). Transgenic potato lines with sense orientation exhibited increased tolerance to MV, whereas in antisense lines exhibited decreased tolerance. In vitro tuberization of transgenic potato with sense orientation was promoted, but was inhibited in transgenic potato with antisense orientation.
The influences of MS medium strength, sucrose concentration, and light condition on bulblet formation and growth were studied in leaf tissue culture of Muscari armenicum 'Early Giant'. Bulblet formation from leaf segments were the most effective on MS medium supplemented with $0.01mg{\cdot}L^{-1}$ NAA, $0.2m{\cdot}L^{-1}$ kinetin, $30g{\cdot}L^{-1}$ sucrose, and $8g{\cdot}L^{-1}$ gelrite under darkness for 2 weeks followed by 16 hr photoperiod with a photosynthetic photon flux density of $50mol{\cdot}m^{-2}{\cdot}s^{-1}$. However the compactness of bulblets formed in vitro was promoted in the MS medium with $60gL^{-1}$ sucrose. Acclimatized plants flowered during the second year of the growing period without any phenotypic variations and formed average 1.5 bulblets per mother bulb.
This experiment was conducted to obtain basic information for the establishment of in vitro initial culture system in Fritillaria thuubergii Miq. Methods of surface sterilization of scale segments as explant and effect of antibiotics added into the culture medium on contamination of explant and chilling treatment of mother bulb on bulblet formation were investigated. Portent of contamination of cultured scale segments was significantly higher in the outer scale segments which were unsuitable as initial culture explant than inner scale segments. Contamination of explants taken from inner scale of bulb was reduced by surface sterilizing explants in the solution of $4{\sim}5%$ sodium hypoclorite for $10{\sim}15$ mimutes. Addition of antibiotics such as kanamycin, vancomycia cefotaxim, agrirnycin and agreptomycin and dithane as fungicide and$lncyte^{tm}$ into MS medium was effective to reduce bateriological contamination, but did not work to control fungi. It had effective to delay the degree of contamination caused by fungi and bacteria haboring in cultured explants. Bulblet formation from cultured scale segments was promoted by dry storage for $2{\sim}4$ weeks or moisture storage of mother bulbs for $4{\sim}6$ weeks at $10^{\circ}C$ before excision of explants. Addition of kinetin into medium could not exerted for the bulblet formation from the scale segment of dry storaged bulb compared to control. But explant taken from 6 week moisture storaged bulb formed more than 10 bulblets per explant on the medium containing $3{\sim}5mg/L$ kinetin.
In order to establish a micropropagation system of Naricissus, the ability of bulblet regeneration among propagation materials was compared, and the adequate growth regulators and concentrations for each cultivar were investigated. The inorganic components were also assayed in the parts of propagation materials. In propagation materials, scape with based plates showed hightest rate of bulblet formation and rapid growth of formed bulblets in vitro, comparing to other parts of it. In comparing of varieties, 'Dutch Master' and 'Golden Harvest' showed a high ability for bulblet regeneration. The ability of bulblet regeneration was most favorable in the medium, supplemented with 5.0 mg/L BA and 2.5 mg/L NAA in 'Dutch Master', and 5.0 mg/L BA and 1.0mg/L NAA in 'Golden Harvest', respectively. In inorganic component analysis of propagation materials, the White part of scape contained 1.18 mg/L$P_2O_5$, 2.57 me Ca, 0.94 me Mg and 3.20 mg/L total N. It showed higher levels in concentration of inorganic components as compared to those of the other part of scape. In addition, leaves and yellow part of scape contained significantly high levels of Ca and Mg while scales bulb showed considerably low levels in all inorganic compounds.
This study was carried out to produce multiple shoots and bulblets from flower stalk tissue cultures of Muscari armeniacum LEICHTLIN ex BAKER 'Early Giant', which were cultured in the half strength Murashige & Skoog's (MS) medium supplemented with auxin, NAA in combination with kinetin, BA, and TDZ, alone and/or. In flower stalk tissue culture, upper part explant was the most suitable as a source of culture material. Direct shoot formation was much more favorable in half strength MS medium supplemented with $0.1mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ TDZ. On the other hand, bulblet formation was increased when cultured in half strength MS medium added with $0.01mg{\cdot}L^{-1}$ NAA and $0.1mg{\cdot}L^{-1}$, $0.2mg{\cdot}L^{-1}$ kinetin. Acclimatized plant flowered during the second year of the growing period without any phenotypic variations and formed average 1.5 bulblets per mother bulb.
This experiment was conducted to micropropagate bulblets via shoot cluster formation and massproduce normal bulblets from the sections of proliferated shoot clusters in Lilium asiatic hybrid 'Hae Hwa'. The induction of shoot clusters from the culture of bulblet sections was more effective than that of bulb scales on MS medium with 1.0 mg/L BA and 0.5 mg/L IAA. Proliferation of shoot clusters from the formed shoot cluster sections was the most favorable on medium containing 5.0 mg/L BA and 0.5 mg/L IAA. The formation and the growth of bulblets from shoot cluster sections were achieved effectively on medium with 60∼90 g/L sucrose. The leaves derived from shoot clusters grew vigorously but the bulblets from shoot clusters grew very poor in 5L air-lift bioreactor culture. By the addition of 30 mL fresh liquid medium containing doulble strength MS salts, 250 g/L sucrose and 5 g/L activated charcoal after 8 weeks in the shoot cluster culture on MS medium with 5.0 mg/L BA and 0.5 mg/L IAA, the number of bulblets was increased in light condition, but the growth of bulblets was not affected by light. Bulblet production was possible with the bulblet product at 53 to 68 mg in fresh weight by liquid medium addition after the proliferation of shoot cluster.
The effect of flooding and soil salinity on the growth of yam (Dioscorea batatas) were studied on the experimantal site temporally established in the south-eastern part of Saemangeum Reclaimed Tidal Land (near Gwanghwal myun, Gimjae-gun, Jellabukdo, Korea). Yam seedlings planted by using aerial bulblet as alternative of sliced tubers, were grown for 20-days and transplanted in black-vinyl mulched ridges (about 20 cm in height) at 70cm interval by $20{\times}60cm$ spacing in the $4^{th}$ of May, 2010. Soil salinity was maintained at lower than 1.2 ds $m^{-1}$ during the growing period and did not result to salt injury in all plants. However, flooding injury very seriously led to plant death and plant mortality rates at $67{\pm}21$ and $82{\pm}9%$ of yam plants in the compost and no compost treatment, respectively, died by heavy flooding during the rainy summer season. The main reasons of the flooding injury included the decreased rainfall acceptable capacity (RAC) after the rising of water table and a slowdown of water infiltration rate after the formation of an impermeable soil crust in the furrow bottom with continuous and heavy downpour during the rainy summer season. The effect of compost treatment was not statistically observed because of the severe spatial difference caused by wet injury, although yam tuber yield was higher at 30 kg $10^{-1}$ in the compost treatment than in the no-compost treatment at 20 kg $10^{-1}$. However, the size of tuber ranged at 1.23 to 1.60 cm in diameter and 3.7 to 5.0 cm in length in all both treatment, which means they are still reproducible for the next cropping season. Conclusively, proper counter-flooding measure and soil salinity control critically important for successful yam production in Saemangeum Reclaimed Tidal Land.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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