Objective: Cattle were some of the first animals domesticated by humans for the production of milk, meat, etc. Long noncoding RNA (lncRNA) is defined as longer than 200 bp in nonprotein coding transcripts. lncRNA is known to function in regulating gene expression and is currently being studied in a variety of livestock including cattle. The purpose of this study is to analyze the characteristics of lncRNA according to sex in Hanwoo cattle. Methods: This study was conducted using the skeletal muscles of 9 Hanwoo cattle include bulls, steers and cows. RNA was extracted from skeletal muscle of Hanwoo. Sequencing was conducted using Illumina HiSeq2000 and mapped to the Bovine Taurus genome. The expression levels of lncRNAs were measured by DEGseq and quantitative trait loci (QTL) data base was used to identify QTLs associated with lncRNA. The python script was used to match the nearby genes Results: In this study, the expression patterns of transcripts of bulls, steers and cows were identified. And we identified significantly differentially expressed lncRNAs in bulls, steers and cows. In addition, characteristics of lncRNA which express differentially in muscles according to the sex of Hanwoo were identified. As a result, we found differentially expressed lncRNAs according to sex were related to shear force and body weight. Conclusion: This study was classified and characterized lncRNA which differentially expressed by sex in Hanwoo cattle. We believe that the characterization of lncRNA by sex of Hanwoo will be helpful for future studies of the physiological mechanisms of Hanwoo cattle.
We tried to extract bone morphogenetic protein (BMP) from the freeze-dried bovine cortical bone (FBCB) for bone graft, which were defatted with chloroform-methanol for 20 days, freeze-dried at $-80^{\circ}C$ for 7 days and sterilized by ethylene oxide gas. Two kg of FBCB were pulverized in a wheel mill to $0.5-2.0mm^3$ cubic in size. The bone particles were demineralized in 0.6N HCI for 10 days at chloroform-methanol$4^{\circ}C$ and defatted with chloroform-methanol for 6 hours at room temperature, which was going to be defatting and demineralized cortical bone (DDM). For extracting BMP, DDM was agitated continuously through 72 hours with magnetic stirrer at $4^{\circ}C$ into 12 times of volume of 6 M guanidine hydrochloride (Gdn-HCl) solution containing proteinase inhibitors to protect BMP such as 2mM N-ethylaleimide, 1mM iodoacetic acid, 1mM phenylmethylsulfonyl fluoride and a sterilizer, 1mM sodium azide. The extraction procedure was repeated for three times. All extracted solution was centrifuged at 10,000 rpm for 30 min and then, the supernatant was dialyzed with 12 times of volume of deionized water at $4^{\circ}C$ for 24-72 hours, which cut off below 6,000-8,000 molecular weight. The dialyzed specimen contained crude-BMP was centrifuged, freeze-dried, and weighted. Through these processing, we could obtained $84.9\%$ as FBCB, $17.8\%$ as DDM and $0.71\%$ as crude-BMP from the wet cortical bone without cancellous bone, marrow and muscles. The crude-BMP were obtained $68.3\%$ from the first extraction, $29.6\%$ from secondary and $2.1\%$ from tertiary, respectively. It was suggested that high yield of crude-BMP migth be explained by three-time repetition of the extraction processing for crude-BMP with Gdn-Hcl sol.
Red muscle and white muscle were separated from bovine, porcine and poultry skeletal muscles, respectively. Intramuscular lipids were extracted and fractionated to neutral-, glyco- and phospho-lipid by silica gel chromagraphy and then fatty acid composition were analyzed with gas chromatography. The results obtained were as follows; Total lipid content of red muscle was higher than that of white muscle in case of beef and chicken. In pork, however, total lipid content of white muscle was higher than red muscle The content ratio of neutral lipid to phospholipid revealed a number of distinctions between red and white muscle among animals. There were noteworthy differences in respect of polyunsaturated fatty acid. The intramuscular fat of pork had the higher content of highly polyunsaturated fatty acid such as arachidonic acid in contrast to beef.
Coria, Maria Sumampa;Pighin, Dario;Grigioni, Gabriela;Palma, Gustavo Adolfo
Animal Bioscience
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v.35
no.2
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pp.272-280
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2022
Objective: The aim of this study was to evaluate the effect of ageing and feeding strategies on the calpain protease system and meat quality traits in Braford steers. Methods: Thirty Braford steers were employed; 15 animals were supplemented with corn silage during finishing and 15 were kept only on pasture. Meat quality traits and calpain system protein activity were evaluated in longissimus thoracis et lumborum (LTL) steaks aged for 2, 7, 14, and 21 days. Results: Aged meat showed higher pH and calcium content, while Warner Bratzler shear force (WBSF) decreased to day 21. No interaction between ageing and diet was seen for quality traits. Steers finished with corn silage showed higher values of water holding capacity, WBSF and free calcium, and lower values of pH and cooking loss. Calpain and calpastatin activities decreased with ageing. Finishing steers on pasture produced higher values of calpains and lower values of calpastatin activities. The higher values of calpain 1 activity were observed in muscles aged 2 days from pasture finished animals, and the lower activity of the inhibitor in the 21 days aged samples of the same group. Conclusion: These results suggest a diet by ageing interaction in calpains and calpastatin and this interaction impact in Warner Bratzler Shear Force in Braford LTL muscle.
Clinical arthritis is typically divided into rheumatoid arthritis (RA) and osteoarthritis (OA). Arthritis-induced muscle weakness is a major problem in aged people, leading to a disturbance of balance during the gait cycle and frequent falls. The purposes of the present study were to confirm fiber type-dependent expression of muscle atrophy markers induced by arthritis and to identify the relationship between clinical signs and expression of muscle atrophy markers. Mice were divided into four experimental groups as follows: (1) negative control (normal), (2) positive control (CFA+acetic acid), (3) RA group (CFA+acetic acid+type II collagen), and (4) aging-induced OA group. DBQA/1J mice (8 weeks of age) were injected with collagen (50 ${\mu}g/kg$), and physiological (body weight) and pathological (arthritis score and paw thickness) parameters were measured once per week. The gastrocnemius muscle from animals in each group was removed, and the expression of muscle atrophy markers (MAFbx and MuRF1) and myosin heavy chain isoforms were analyzed by reverse transcription-polymerase chain reaction. No significant change in body weight occurred between control groups and collagen-induced RA mice at week 10. However, bovine type II collagen induced a dramatic increase in clinical score or paw thickness at week 10 (p<0.01). Concomitantly, the expression of the muscle atrophy marker MAFbx was upregulated in the RA and OA groups (p<0.01). A dramatic reduction in myosin heavy chain (MHC)-$I{\beta}$ was seen in the gastrocnemius muscles from RA and OA mice, while only a slight decrease in MHC-IIb was seen. These results suggest that muscle atrophy gene expression occurred in a fiber type-specific manner in both RA- and OA-induced mice. The present study suggests evidence regarding why different therapeutic interventions are required between RA and OA.
Pre-rigor bovine sternomandibularis muscles were frozen at 3 hr postmortem thawed at various temperatures (18, 2, and $-2^{\circ}C$), and then meat quality and sensory properties were compared with those in chilled muscle (control). The meat thawed at $18^{\circ}C$ had lower ultimate pH, water holding capacity, and sensory scores and higher muscle shortening, thaw drip loss, and shear values than those of the other samples. The samples thawed at $-2^{\circ}C$ had significantly lower muscle shortening and higher sensory scores in tenderness and juiciness than those thawed at 18 and $2^{\circ}C$. Muscle shortening, pH, WHC, shear values, and sensory properties were not significantly different between control and sample thawed at $-2^{\circ}C$. By holding at $-2^{\circ}C$, thaw shortening was prevented and tender meat comparable to the chilled meat was obtained. These results indicate that thaw shortening can be largely eliminated if the frozen pre-rigor muscle is thawed at $-2^{\circ}C$.
Maria Sumampa Coria;Maria Sofia Castano Ledesma;Jorge Raul Gomez Rojas;Gabriela Grigioni;Gustavo Adolfo Palma;Claudio Dario Borsarelli
Animal Bioscience
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v.36
no.9
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pp.1435-1444
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2023
Objective: This study was conducted to evaluate Raman spectroscopy technique as a noninvasive tool to predict meat quality traits on Braford longissimus thoracis et lumborum muscle. Methods: Thirty samples of muscle from Braford steers were analyzed by classical meat quality techniques and by Raman spectroscopy with 785 nm laser excitation. Water holding capacity (WHC), intramuscular fat content (IMF), cooking loss (CL), and texture profile analysis recording hardness, cohesiveness, and chewiness were determined, along with fiber diameter and sarcomere length by scanning electron microscopy. Warner-Bratzler shear force (WBSF) analysis was used to differentiate tender and tough meat groups. Results: Higher values of cohesiveness and CL, together with lower values of WHC, IMF, and shorter sarcomere were obtained for tender meat samples than for the tougher ones. Raman spectra analysis allows tender and tough sample differentiation. The correlation between the quality attributes predicted by Raman and the physical measurements resulted in values of R2 = 0.69 for hardness and 0,58 for WBSF. Pearson's correlation coefficient of hardness (r = 0.84) and WBSF (r = 0.79) parameters with the phenylalanine Raman signal at 1,003 cm-1, suggests that the content of this amino acid could explain the differences between samples. Conclusion: Raman spectroscopy with 785 nm laser excitation is a suitable and accurate technique to identify beef with different quality attributes.
The uptake of glucose for metabolism and growth is essential to most animal cells and is mediated by glucose transport protein. In the glucose transport protein family, GLUT4 plays a key role in cellular glucose uptake stimulated by insulin in skeletal muscles and adipose tissue in rodents and human. In this studies, we reported the identification, characterization, and expression of Hanwoo GLUT4 gene. The Hanwoo GLUT4 cDNA includes a 1527 bp open reading frame encoding a protein of 509 amino acids. The GLUT4 amino acid sequences of the Hanwoo show strong conservation with the corresponding sequences reported in other species. The highest mRNA expression of GLUT4 was detected in heart and lower expression was detected in rib meat, sirloin, and colon. We confirmed the expression of GLUT4 in the subcutaneous and small intestinal adipose tissue using RT-PCR. To investigate the expression of GLUT4 in the bovine intramuscular adipose differentiation, fibroblast-like cells were isolated from the sirloin of Hanwoo bull aged 12 months by collagenase digestion of minced tissue and cultured with activators of PPAR gamma. We identified that GLUT4 mRNA expression decreased during differentiation of preadipocytes into adipocyte in Korean cattle. These results indicated that function of GLUT4 in bovine adipose tissue was different from that of mouse and human.
Cellular FOS(c-fos) protein is a transcription factor that forms heterodimers mostly with c-jun family and stimulates the transcription of genes containing AP-1 regulatory elements. This c-fos expression can control growth and differentiation of various precursor cells including myoblasts. The controls by c-fos gene have been identified for affecting skeletal muscle fiber traits which are the key determinants of meat quality in pigs. As a first step for identifying the relationship between c-fos gene and meat quality traits in cattle, we fully sequenced 1,443 bp of Hanwoo c-fos mRNA and analyzed expression patterns from various organs and muscle tissues. The sequence identities of Hanwoo c-fos with that of human, pig and mouse showed 89.8%, 93.3% and 87%, respectively. Analyses of the northern blot showed high c-fos expressions were obtained in spleen and rib muscle from 7 organs and 9 different parts of muscles investigated. These results presented here can be used as a valuable marker for meat quality related traits in cattle with further verification.
Kim, Ranah;Kim, Yoon Gun;Kim, Mi-Yeon;Song, Byung Chul;Kim, Sun-ho;Kim, Jeong-hee
Journal of Dental Rehabilitation and Applied Science
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v.33
no.2
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pp.106-113
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2017
Purpose: The purpose of this study was to evaluate tissue dissolving capacity, antimicrobial effect of Hydroxyethylidene bisphosphonate (HEBP) interacting with sodium hypochlorite (NaOCl), Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) as conventional endodontic irrigants and to determine tissue dissolving efficacy depended on temperature. Materials and Methods: A total of 80 bovine muscles were randomly distributed into 8 groups (n = 10). After their initial weights determined on a precision scale, the specimens in each group were immersed in the solutions for 5, 10 and 15 min and reweighted at each time period. Agar diffusion test inoculated with Enterococcus faecalis was performed for antimicrobial effect of each endodontic irrigants. Results: The ability to dissolve organic matter was greater in NaOCl group following NaOCl and HEBP mixture. Heated NaOCl ($40^{\circ}C$) and NaOCl/ HEBP mixture was greater tissue dissolving efficacy than room temperature ($25^{\circ}C$). Antimicrobial effect was greater and significant in the following order EDTA > EDTA + 1% NaOCl > $1%\;NaOCl{\geq}1%\;NaOCl$ + HEBP. Conclusion: HEBP as soft chelating agent does not disturb antimicrobial effect and less affected tissue dissolving efficacy as inherent properties of NaOCl. In the heated NaOCl/HEBP mixture analyzed, it dissolved more the organic matter than room temperature.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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