An enzymatic reaction system was developed and optimized for bioconversion of resveratrol from glucose. Liquid enzyme extracts were prepared from Alternaria sp. MG1, an endophytic fungus from grape, and used directly or after immobilization with sodium alginate. When the enzyme solution was used, efficient production of resveratrol was found within 120 min in a manner that was pH-, reaction time-, enzyme amount-, substrate type-, and substrate concentration-dependent. After the optimization experiments using the response surface methodology, the highest value of resveratrol production (224.40 μg/l) was found under the conditions of pH 6.84, 0.35 g/l glucose, 0.02 mg/l coenzyme A, and 0.02 mg/l ATP. Immobilized enzyme extracts could keep high production of resveratrol during recycling use for two to five times. The developed system indicated a potential approach to resveratrol biosynthesis independent of plants and fungal cell growth, and provided a possible way to produce resveratrol within 2 h, the shortest period needed for biosynthesis of resveratrol so far.
Tamlana sp. UJ94 isolated from seawater can degrade alginate. To identify the genomic basis of this activity, the genome was sequenced. The genome was composed of 4,116,543 bp, 3,609 coding sequences, and 35.2 mol% G + C content. A BLASTp search predicted the presence of 9 alginate lyases as well as 6 agarases, 5 amylases, 4 carrageenases, 1 cellulase, 4 pectate lyases, and 7 xylanases, indicating its ability to degrade diverse polysaccharides. The genome of strain UJ94 is a source of polysaccharide-degrading enzymes for bioconversion processes.
Yun, Yeo Jin;Lee, Ahyun;Nguyen, Thi My Tuyen;Park, Jong Tae;Yun, Sang Man;Kim, Jaehan
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.50
no.4
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pp.391-399
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2018
Bioconversion and fermentation of onion extract by lactic acid bacteria were carried out to enhance the bioavailability of quercetin through the increase of quercetin recovery and aglycone formation. Lactobacillus casei, L. plantarum, and Kluyveromyces lactis were selected as the optimum strains for bioconversion. The environmental conditions to maximize the conversion ratio between glycoconjugate and quercetin aglycone have been evaluated. The concentrations of quercetin after fermentation of onion slurry by K. lactis and L. casei increased to 260% and 318%, respectively; however, the quercetin concentrations decreased after 48 hours of fermentation. Additionally, the quercetin hexose concentration increased to almost 141%. Controlling the initial pH of the onion juice increased the lactic acid production by L. casei and L. plantarum by more than two-fold. Meanwhile, the concentration of quercetin hexose decreased rapidly with the increased production of aglycones. The scale-up experiments showed the same fermentation efficiency; however, thermal sterilization reduced the quercetin glycone concentrations drastically.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Citrus and its peels have been used in Asian folk medicine due to abundant flavonoids and usage of citrus peels, which are byproducts from juice and/or jam processing, may be a good strategy. Therefore, the aim of this study was to examine antioxidant and anti-inflammatory effects of bioconversion of Jeju Hallabong tangor (Citrus kiyomi ${\times}$ ponkan; CKP) peels with cytolase (CKP-C) in RAW 264.7 cells. MATERIALS/METHODS: Glycosides of CKP were converted into aglycosides with cytolase treatment. RAW 264.7 cells were pre-treated with 0, 100, or $200{\mu}g/ml$ of citrus peel extracts for 4 h, followed by stimulation with $1{\mu}g/ml$ lipopolysaccharide (LPS) for 8 h. Cell viability, DPPH radical scavenging activity, nitric oxide (NO), and prostagladin $E_2$ ($PGE_2$) production were examined. Real time-PCR and western immunoblotting assay were performed for detection of mRNA and/or protein expression of pro-inflammatory mediators and cytokines, respectively. RESULTS: HPLC analysis showed that treatment of CKP with cytolase resulted in decreased flavanone rutinoside forms (narirutin and hesperidin) and increased flavanone aglycoside forms (naringenin and hesperetin). DPPH scavenging activities were observed in a dose-dependent manner for all of the citrus peel extracts and CKP-C was more potent than intact CKP. All of the citrus peel extracts decreased NO production by inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity and $PGE_2$ production by COX-2. Higher dose of CKP and all CKP-C groups significantly decreased mRNA and protein expression of LPS-stimulated iNOS. Only $200{\mu}g/ml$ of CKP-C markedly decreased mRNA and protein expression of cyclooxygenase-2 in LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Both 100 and $200{\mu}g/ml$ of CKP-C notably inhibited mRNA levels of $interleukin-1{\beta}$ ($IL-1{\beta}$) and IL-6, whereas $200{\mu}g/ml$ CKP-C significantly inhibited mRNA levels of $TNF-{\alpha}$. CONCLUSIONS: This result suggests that bioconversion of citrus peels with cytolase may enrich aglycoside flavanones of citrus peels and provide more potent functional food materials for prevention of chronic diseases attributable to oxidation and inflammation by increasing radical scavenging activity and suppressing pro-inflammatory mediators and cytokines.
Dasangrandhi, Chakradhar;Ellamar, Joel B.;Kim, Young Soon;Kim, In Hwan;Kim, Hak-Ryul
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.49
no.1
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pp.28-34
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2017
Biocatalytic modification of natural resources can be used to generate novel compounds with specific properties, such as higher viscosity and reactivity. The production of hydroxy fatty acids (HFAs), originally found in low quantities in plants, is a good example of the biocatalytic modification of natural vegetable oils. HFAs show high potential for application in a wide range of industrial products, including resins, waxes, nylons, plastics, lubricants, cosmetics, and additives in coatings and paintings. In a recent study, Pseudomonas aeruginosa strain PR3 was used to produce 7,10-dihydroxy-8(E)-octadecenoic acid (DOD) from oleic acid. This present study focused primarily on the utilization of three natural nut oils obtained from the Philippines -pili nut oil (PNO), palm oil (PO), and virgin coconut oil (VCO)- to produce DOD by P. aeruginosa strain PR3. Strain PR3 produced DOD from PNO and PO only, with PNO being the more efficient substrate. An optimization study to achieve the maximum DOD yield from PNO revealed the optimal incubation time and medium pH to be 48 h and 8.0, respectively. Among the carbon sources tested, fructose was the most efficiently used, with a maximum DOD production of 130 mg/50 mL culture. Urea was the optimal nitrogen source, with a maximum product yield of 165 mg/50 mL culture. The results from this study demonstrated that PNO could be used as an efficient substrate for DOD production by microbial bioconversion.
Journal of the Korea Organic Resources Recycling Association
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v.23
no.2
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pp.53-60
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2015
Newly, nutrients recovery by bioconversion in the swine waste which caused serious problems due to its high organic fraction and content of nutrients such as phosphorus and nitrogen is viewed as a considerable approach since it produces valuable product as well as recycling of resources. Consequently, it is necessary to find new methods to treat swine waste. One possible solution to this problem is to use this potential pollutant as a growth substrate for economically valuable products. The study for the fundamental improvement of bioconversion efficiency by finding optimum growth conditions using statistical models and biotechnology was performed. A novel approach to utilize swine waste by cultivating mycelia of the mushroom Phellinus linteus are described. A central composite face-centered design (CCF) for the experiments was used to develop empirical model providing a quantitative interpretation of the relationships among the three variables, which were substrate concentration, pH, and temperature. The maximal radial extension rate (2.78mm/d) of P.linteus was determined under the condition of 5.0 g COD/L, pH 5.0, and temperature $29.7^{\circ}C$. The results of this study suggest that swine waste could be utilized as a growth substrate for the cultivation of mushroom mycelia enhancing an efficiency of utilizing this by-product of the livestock industry.
The dnrF gene, responsible for conversion of aklavinone to $\varepsilon$-rhodomycinone via C-11 hydroxylation, was mapped in the daunorubicin gene cluster of Streptomyces peucetius subsp. caesius ATCC 27952, close to drrAB, one of the anthracycline resistance genes. To characterize the enzymatic properties of the aklavinone 11-hydroxylase, the dnrF gene was overexpressed in Escherchia coli. The pET-22(+) plasmid which has the T7 promoter under the control of lacUV5 gene was used for the overexpression of the dnrF gene, and the recombinant plasmid pET213 that contains the dnrF gene linked to the T7 promoter of pET-22b(+) was introduced into the E. coli BL2l. When the expression of the dnrF gene was induced by IPTG at the final concentration of 1 mM, the induced protein could be detected in SDS-PAGE only in insoluble precipitate. The insoluble protein was electroeluted from the gel and used for the preparation of antiserum in mice. Various culture conditions were tested to maximize the expression of the aklavinone 11-hydroxylase in soluble form. The enzymatic activity was checked by the bioconversion experiment, and the protein was confirmed by the SDS-PAGE and the Western blot analysis. From the analysis of the data, it was concluded that the culture induced with IPTG at the final concentration of 0.02 mM at 37$^{\circ}C$ yielded the best productivity of active form of enzyme.
Jo, Mi Na;Jung, Ji En;Yoon, Hyun Joo;Chang, Kyung Hoon;Jee, Hee Sook;Kim, Kee-Tae;Paik, Hyun-Dong
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.42
no.4
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pp.347-353
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2014
${\beta}$-Glucosidase from Aspergillus usamii KCTC 6954 was used to convert ginsenoside Rb1 to compound K, which has a high bio-functional activity. The enzymatic activities during culturing for 15 days were determined using ${\rho}$-nitrophenyl-${\beta}$-glucopyranoside. The growth rate of the strain and the enzymatic activity were maximized after 6 days (IU; $175.93{\mu}M\;ml^{-1}\;min^{-1}$). The activities were maximized at $60^{\circ}C$ in pH 6.0. During culturing, Rb1 was converted to Rd after 9 d and then finally converted to compound K at 15 d. In the enzymatic reaction, Rb1 was converted to the ginsenoside Rd within 1 h of reaction time and compound K could be detected after 8 h. As a result, this study demonstrates that $Rb1{\rightarrow}Rd{\rightarrow}F2{\rightarrow}$compound K is the main metabolic pathway catalyzed by ${\beta}$-glucosidase and that ${\beta}$-glucosidase is a feasible option for the development of specific bioconversion processes to obtain minor ginsenosides such as Rd and compound K.
Kim, Yeong-Su;Kim, Sang Jin;Kang, Dong Wook;Park, Chang-Su
Journal of Life Science
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v.28
no.12
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pp.1545-1553
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2018
The International Society of Rare Sugars (ISRS) defines rare sugars as monosaccharides and their derivatives that rarely occur in nature. Rare sugars have recently received much attention because of their many uses including low-calorie sweeteners, bulking agents, and antioxidants, and their various applications including as immunosuppressants in allogeneic rat liver transplantation, as potential inhibitors of various glycosidases and microbial growth, in ischemia-reperfusion injury repair in the rat liver, and in segmented neutrophil production without detrimental clinical effects. Because they rarely exist in nature, the production of rare sugars has been regarded as one of the most important research areas and, generally, they are produced by chemical synthesis. However, the production of rare sugars by bioconversion using enzymes from microorganisms has been receiving increased attention as an environmentally friendly alternative production method. In particular, D-allulose, D-allose, and D-tagatose are of interest as low-calorie sweeteners in various industries. To date, D-tagatose 3-epimerase, D-psicose 3-epimerase, and D-allulose 3-epimerase have been reported as D-allulose bioconversion enzymes, and L-rhamnose isomerase, Galactose 6-phosphate isomerase, and Ribose 5-phosphate isomerase have been identified as D-allose production enzymes. Elsewhere, D-tagatose has been produced by L-arabinose isomerase from various microorganisms. In this study, we report the production of D-allulose, D-allose, and D-tagatose by microorganism enzymes.
Lee, Jin Young;Dong, Jaekyung;Chung, Yuseong;Kim, Mi-Ryung;Kang, Jae Seon
Journal of Life Science
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v.29
no.10
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pp.1086-1095
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2019
This research was performed to develop a new material consisting of a mixture of Red Allium cepa (RA) Cucurbita moschata duch (CM), and Angelica gigas Nakai (AG). RA and CM have low storage stability because of their high moisture content. Therefore, their major components were extracted and used for the research after a content analysis. In order to overcome these limitations, the quercetin from RA, ${\beta}-carotene$ from CM, and decursin/decursinol angelate (D/DA) from AG were separately extracted, and the biochemical activity of each extract and mixture was compared. RA was bioconverted by the Bacillus subtillis KJ-3 (BS3) after ethanol extraction. After bioconversion, the quercetin content of RA was increased by 128.9%. ${\beta}-carotene$ was detected in the CM ethanol extract and its content was very low concentrations at 0.2 mg/g. The AG ethanol extract (1 mg) contained 0.4146 mg and 0.3659 mg of D/DA, respectively. The purity of the D/DA was found to be about 78%. The flavonoid and polyphenol content of each extract and their mixtures (mixture 1 (RA:CM:AG = 5:2:3), mixture 2 (RA:CM: AG = 3:5:2), and mixture 3 (RA:CM:AG = 3:2:5)) were measured. In addition, the cell survival rate, anti-inflammatory activity, and antioxidant ability were also evaluated. In all the results, the antioxidant activity of mixture 3 was most effective. Therefore, these findings provide basic data for future food development using a 3:2:5 mixture of RA, CM, and AG.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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