In order to examine efficient L-threo-2,3-Dihydroxyphenylserine (L-threo-DOPS) synthesis process using whole cell biocatalyst, a thermostable L-threonine aldolase (L-TA), which cloned from Streptomyces coelicolor A3(2) and improved for stability, was expressed in a Corynebacterium glutamicum R strain. The constructed Corynebacterium expression vector, pCG-H44(1) successfully expressed L-TA in C. glutamicum R strain, but showed very low expression level. In order to improve the expression level, the expression vector named pCG-H44(2) was reconstructed by eliminating 1 nucleotide between SD sequence and start codon of L-TA. The pCG-H44(2) vector plasmid was able to overexpress L-TA approximately 3.2 times higher than pCG-H44(1) in C. glutamicum R strain (CGH-2). When the whole cell of CGH-2 was examined in a repeated batch system, L-threo-DOPS was successfully synthesized with a yield of 4.0 mg/ml and maintain synthesis rate constantly after 30 repeated batch reactions for 130 h.
Objective: High $NH_3$ emissions from poultry houses are reported to have negative impacts on health, welfare and safety of birds and humans, and on the environment. Objective of the present study was to determine the effects of two litter amendments on the $NH_3$ levels in broiler closed houses under hot-humid conditions. Methods: Giving a completely randomize design, nine closed houses, each housed 32,500 birds on paddy husk litter, were randomly allocated into two treatment (Mizuho; a bacterial culture mix and Rydall OE; an enzymatic biocatalyst) and control groups. $NH_3$ levels were determined thrice a day (0600, 1200, and 1800 h), at three heights from the litter surface (30, 90, and 150 cm), at 20 predetermined locations of a house, from day 1 to 41. Results: Rydall significantly reduced the $NH_3$ level compared to control and Mizuho. $NH_3$ levels at 30 cm were significantly higher than that of 90 and 150 cm. The $NH_3$ levels at 30 cm height were higher than 25 ppm level from day 9, 11, and 13 in Mizuho, control, and Rydall groups, respectively to day 41. $NH_3$ levels at 150 cm height were higher than maximum threshold limit of 50 ppm for human exposure from day 12, 14, and 15 in Mizuho, control, and Rydall groups, respectively to day 33. Being significantly different among each other, the $NH_3$ level was highest and lowest at 0600 and 1800 h. Litter amendments had no significant effects on growth performance. Rydall significantly increased the litter N content on day 24. Conclusion: It was concluded that the $NH_3$ levels of closed house broiler production facilities under tropical condition are so high that both birds and workers are exposed to above recommended levels during many days of the growing period. Compared to microbial culture, the enzymatic biocatalyst was found to be more effective in reducing $NH_3$ level.
Kim, Young-Hun;Lee, Su-Yeon;Park, Mi-Jin;Choi, In-Gyu;Lee, Jae-Won
Korean Journal of Microbiology
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v.48
no.1
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pp.37-41
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2012
In this study, we screened and evaluated possibility of wood rot fungi as biocatalyst for biotransformation of sesquiterpenes. Screening were performed to select the most promising microorganisms with ability to biotransformation the substrate trans,trans-fanesol. Trans,trans-farnesol which is synthesized precursor of sesquiterpenes was used for resistance test on 19 of wood rot fungi. From the 19 tested wood rot fungi, 5 were selected by resistance test on different concentration of trans,trans-fanesol. Biotransformation was performed with selected wood rot fungi on liquid culture. The metabolites detected by GC-MS analysis were nerolidol for Laetiporus sulphureus var. miniatus (jungh) Imaz and eicosane for Coriolus versicolor (L.Fr) Prlar and isoborneol for Fomitopsis pinicola and isocyclocitral for Lampteromyces japonicas. As the results, wood rot fungi could be potential biocatalyst for biotransformation of sesquiterpenes.
In recent, it is worldwide issued that nanoscale science and technology as a solution have supported to increase the sensing performance in carbon nanotube based biosensor system. Containing material chemistry in various nanostructures has formed their high potentials for stabilizing and activating biocatalyst as a bioreceptor for medical, food contaminants, and environmental detections using electrode modification technologies. Especially, the large surface area provides the attachment of biocatalysts increasing the biocatalyst loading. Therefore, nano-scale engineering of the biocatalysts have been suggested to be the next stage advancement of biosensors. Here, we would like to study the electrical mechanism depending on the exposure methods (soaking or dropping) to the sample solution to the assembled carbon nanotubes (CNTs) on the gold electrodes of biosensor for a simple and highly sensitive detection. We performed various experiments using polar and non-polar solutions as sampling tests and identified electrical response of assembled CNTs in those solutions.
Microbial trichloroethylene (TCE) degradation using trickling biofilter (TBF) is a cost-effective treatment method, in which monooxygenase (MO) fortuitously transforms TCE via cometabolism. Simple TBF, however, could not be stably operated for long-term treatment of TCE due to the contradictory characteristics of cometabolism. In this paper, microbial biocatalyst and biofilm reactor system, a two-stage continuous stirred tank reactor (CSTR)/TBF system using Burkholderia cepacia G4 and Methylosinus trichosporium OB3b, are evaluated for the long-term continuous treatment of TCE. The maximum TCE elimination capacities were in the range of 28 and 525 mg TCE/1$.$day. The reactor systems were stably operated for more than 3∼12 months.
Choi, Suk Soon;Seo, Sang Hwan;Kang, Dong Gyun;Cha, Hyung Joon;Kwon, Inchan
Applied Chemistry for Engineering
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v.22
no.5
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pp.486-489
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2011
In the present work, diazinon which is known as nondegradable and environmental toxic material was efficiently treated by the cell surface-displayed organophosphorus hydrolase (OPH) biocatalyst. The culture temperature of $25^{\circ}C$ culture temperature and the addition of 0.2 mM ethylenediamine tetraacetate (EDTA) were effective conditions for the production of recombinant OPH in Escherichia coli. 25 and 50 ppm diazinon were treated with removal rate of 4.5 and $7.2mg/g{\cdot}min$, respectively and with all over 90% removal efficiencies using recombinant cell lysates through ultrasonication disruption process. Thus, these experimental results could be utilized in environmental friendly biological treatment system for toxic chemicals such as diazinon.
Ji Sun Park;Young-Woo Kim;Hyungdong Kim;Sun-Ki Kim;Kyeongsoon Park
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.33
no.11
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pp.1506-1512
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2023
Quantitative analysis of adenosine triphosphate (ATP) has been widely used as a diagnostic tool in the food and medical industries. Particularly, the pathogenesis of a few diseases including inflammatory bowel disease (IBD) is closely related to high ATP concentrations. A bioluminescent D-luciferin/luciferase system, which includes a luciferase (FLuc) from the firefly Photinus pyralis as a key component, is the most commonly used method for the detection and quantification of ATP. Here, instead of isolating FLuc produced in recombinant Escherichia coli, we aimed to develop a whole-cell biocatalyst system that does not require extraction and purification of FLuc. To this end, the gene coding for FLuc was introduced into the genome of probiotic Saccharomyces boulardii using the CRISPR/Cas9-based genome editing system. The linear relationship (r2 = 0.9561) between ATP levels and bioluminescence generated from the engineered S. boulardii expressing FLuc was observed in vitro. To explore the feasibility of using the engineered S. boulardii expressing FLuc as a whole-cell biosensor to detect inflammation biomarker (i.e., ATP) in the gut, a colitis mouse model was established using dextran sodium sulfate as a colitogenic compound. Our findings demonstrated that the whole-cell biosensor can detect elevated ATP levels during gut inflammation in mice. Therefore, the simple and powerful method developed herein could be applied for non-invasive IBD diagnosis.
Sugar polymers have been considered as biomaterial. Biomaterials are widely utilized for a medical applications in direct contact with living tissue Clearly, biomaterials must be carefully and microscopically fabricated for optimal acceptance within the living organism in both functional and structural senses. In this study, the enzymatic synthesis of sorbitan methacrylate from 1,4-sorbitan via the manipulation of an immobilized biocatalyst (Novozym 435) and acryl donors (methacrylic acid and vinyl methacrylate) was evaluated.
Park, Seung-Yeong;Kim, Yong-Hwan;Ryu, Jeong-Yong;Song, Bong-Geun
한국생물공학회:학술대회논문집
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2003.04a
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pp.121-125
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2003
Enzymatic polymerization of cardol derived from cashew nut shell liquid have been examined. t-Butyl alcohol aqueous systems showed high yield of polycardol when SBP was as biocatalyst. Compared other solvents, peroxidase actiyity was maintained stable, which was seemed major cause. Solvent aqueous system and concentration of hydrogen peroxide were found to have an influence on the yield and molecular weight distribution of polycardol under the reaction of enzymatic polymerization using peroxidase. The polymer was subjected to the hardening by methyl ethyl ketone peroxide and cobalt naphthenate catalyst, giving a crosslinked tough film. Polycardol was cured rapidly and the hardness increased with time. Finally, the pencil scratch hardness reached to 7H, which is enough hard for industrial uses.
Over the years, nanostructures have been developed to enable to support enzyme usability to obtain highly selective and efficient biocatalysts for catalyzing processes under various conditions. This review summarizes recent developments in the nanostructures for enzyme supporters, typically those formed with various inorganic materials. To improve enzyme attachment, the surface of nanomaterials is properly modified to express specific functional groups. Various materials and nanostructures can be applied to improve both enzyme activity and stability. The merits of the incorporation of enzymes in inorganic nanomaterials and unprecedented opportunities for enhanced enzyme properties are discussed. Finally, the limitations encountered with nanomaterial-based enzyme immobilization are discussed together with the future prospects of such systems.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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