Anti-hepatocyte growth factor (anti-HGF) monoclonal antibodies (mAbs) are potential therapeutics against various cancers. Screening for high-producer clones is a time-consuming and complex process and is a major hurdle in the development of therapeutic mAbs. Here, we describe an efficient approach that allows the selection of high-producer Chinese hamster ovary (CHO) cell lines producing the novel anti-HGF mAb SFN68, which was generated previously by immunizing HGF bound to its receptor c-Met. We selected an SFN68-producing parental cell line via transfection of the dihydrofolate reductase-deficient CHO cell line DG44, which was preadapted to serum-free suspension culture, with an SFN68-expression vector. Subsequent gene amplification via multiple passages of the parental cell line in a methotrexate-containing medium over 4 weeks, followed by clonal isolation, enabled us to isolate two cell lines, 2F7 and 2H4, with 3-fold higher specific productivity. We also screened 72 different media formulated with diverse feed and basal media to develop a suboptimized medium. In the established suboptimized medium, the highest anti-HGF mAb yields of the 2F7 and 2H4 clones were 842 and 861 mg/l, respectively, which were about 10.5-fold higher than that of the parental cell line in a non-optimized basal medium. The selected CHO cell lines secreting high titers of SFN68 would be useful for the production of sufficient amounts of antibodies for efficacy evaluation in preclinical and early clinical studies.
We studied the effects of acetylcholinesterase inhibitors, donepezil and galantamine, and an N-methyl-D-aspartate (NMDA) receptor blocker, memantine, on sleep-wake architecture in rats. Screw electrodes were chronically implanted into the frontal and parietal cortex for the electroencephalography (EEG). EEG was recorded with a bio-potential amplifier for 8 h from 09:30 to 17:30. Vibration was recorded to monitor animal activity with a vibration measuring device. Sleep-wake states such as wake (W), slow-wave sleep (S) and paradoxical or rapid eye movement sleep (P), were scored every 10 sec by an experimenter. We measured mean episode duration and number of episode to determine which factor sleep disturbance was attributed to. Donepezil and memantine showed a significant increase in total W duration and decreases in total S and P duration and delta activity. Memantine showed increases in sleep latency and motor activity. Changes of S and P duration in memantine were attributed from changes of mean episode duration. Galantamine had little effect on sleep architecture. From these results, it is showed that galantamine may be an anti-dementia drug that does not cause sleep disturbances and memantine may be a drug that causes severe sleep disturbance.
Lung cancer is the most common causes of cancer-related deaths worldwide, and a lack of effective methods for early diagnosis has greatly impacted the prognosis and survival rates of the affected patients. Tumor-initiating cells (TICs) are considered to be largely responsible for tumor genesis, resistance to tumor therapy, metastasis, and recurrence. In addition to representing a good potential treatment target, TICs can provide clues for the early diagnosis of cancer. MicroRNA (miRNA) alterations are known to be involved in the initiation and progression of human cancer, and the detection of related miRNAs in TICs is an important strategy for lung cancer early diagnosis. As Hsa-miR-155 (miR-155) can be used as a diagnostic marker for non-small cell lung cancer (NSCLC), a smart molecular beacon of miR-155 was designed to image the expression of miR-155 in NSCLC cases. TICs expressing CD133 and CD338 were obtained from A549 cells by applying an immune magnetic bead isolation system, and miR-155 was detected using laser-scanning confocal microscopy. We found that intracellular miR-155 could be successfully detected using smart miR-155 molecular beacons. Expression was higher in TICs than in A549 cells, indicating that miR-155 may play an important role in regulating bio-behavior of TICs. As a non-invasive approach, molecular beacons could be implemented with molecular imaging to diagnose lung cancer at early stages.
황백 추출물의 tyrosinase 억제효과를 검토한 결과 60% 에탄올추출물에서 25% 정도의 억제효과를 나타내었으며, melanoma세포(B16F10)에서의 멜라닌 생합성을 측정한 결과 31.2%의 저해활성을 나타내어 멜라닌생성억제효과가 있음을 알 수 있었다. 황백추출물에서 tyrosinase저해 활성물질을 정제하고자 Sephadex LH-20과 MCI-gel CHP-20 open column을 이용하여 용출한 결과 순수하게 정제된 활성물질을 얻을 수 있었으며, 정제물질을 구조 동정한 결과 미백물질은 obacunone으로 동정되었다. 정제된 obacunone은 35.1%의 저해활성을 나타내어 미백 활성이 비교적 우수함을 확인할 수 있었으며, 황백추출물로부터 분리한 미백물질을 이용한 미백 화장품을 제조하여 관능평가를 한 결과 우수한 평가를 받았다. 미백화장품의 안정성 검사를 위해 pH, 점도 및 복소탄성률의 변화를 측정하였으나 저장기간 60일 동안 큰 변화를 나타내지 않았다. 또한 온도변화, 인공 및 자연광에 의한 변화, 온도순환에 의한 변화 및 냉 해동순환(Freeze & Thaw cycling)에 따른 변화들 살펴본 결과 저장 60일 동안 모든 조건에서 상의 분리와 변색, 변취 등의 변화 없이 안정성을 나타내었다.
Duong, Van-Thuy;Kim, Jong Pal;Kim, Kwangsoo;Ko, Hyoungho;Hwang, Chang Ho;Koo, Kyo-in
대한의용생체공학회:의공학회지
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제39권5호
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pp.188-207
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2018
Recently, three-dimensional (3D) printing of biological tissues and organ has become an attractive interdisciplinary research topic that combines a broad range of fields including engineering, biomaterials science, cell biology, physics, and medicine. The 3D bioprinting can be used to produce complex tissue engineering scaffolds based on computer designs obtained from patient-specific anatomical data. It is a powerful tool for building structures by printing cells together with matrix materials and biochemical factors in spatially predefined positions within confined 3D structures. In the field of the 3D bioprinting, three major categories of the 3D bioprinting include the stereolithography-based, inkjet-based, and dispensing-based bioprinting. Some of them have made significant process. Each technique has its own advantages and limitations. Compared with non-biological printing, the 3D bioprinting should consider additional complexities: biocompatibility, degradability of printing materials, cell types, cell growth, cell viability, and cell proliferation factors. Numerous 3D bioprinting technologies have been proposed, and some of them have been making great progress in printing several tissues including multilayered skin, cartilaginous structures, bone, vasculature even heart and liver. This review summarizes basic principles and key aspects of some frequently utilized printing technologies, and introduces current challenges, and prospects in the 3D bioprinting.
본 연구는 홍삼추출물의 화장품소재로서의 항염증 효과의 가능성을 확인하는 것을 목적으로 한다. 본 연구에서는 홍삼 추출물을 사용하여 항염증에 대한 생물학적 활성평가를 수행하였다. 대식세포인 RAW 264.7 세포에서 시료의 항염증 효과를 평가하기 위해 MTT assay를 이용한 홍삼 추출물의 독성평가와 nitric oxide 생성 저해 활성 및 염증관련 단백질 및 유전자의 발현량을 확인하였다. LPS로 유도된 RAW 264.7 세포 내에서 시료의 nitric oxide 저해활성은 25 ㎍/ml에서 71.2 %의 우수한 효능을 나타내었으며, western blot 시험결과 iNOS, COX-2 단백질의 발현은 농도 의존적으로 감소하는 것으로 확인하였다. 이러한 실험 결과를 바탕으로 홍삼추출물이 항염 효과를 가진 화장품 소재로서의 가치를 제안할 수 있다.
The Bacterial community structure and its complexity of the enrichment culture during the isolation and screening of imidacloprid-degrading strain were studied using denaturating gradient gel electrophoresis analysis. The dominant bacteria in the original tea rhizosphere soil were uncultured bacteria, Rhizobium sp., Sinorhizobium, Ochrobactrum sp., Alcaligenes, Bacillus sp., Bacterium, Klebsiella sp., and Ensifer adhaerens. The bacterial community structure was altered extensively and its complexity reduced during the enrichment process, and four culturable bacteria, Ochrobactrum sp., Rhizobium sp., Geobacillus stearothermophilus, and Alcaligenes faecalis, remained in the final enrichment. Only one indigenous strain, BCL-1, with imidacloprid-degrading potential, was isolated from the sixth enrichment culture. This isolate was a gram-negative rod-shaped bacterium and identified as the genus Ochrobactrum based on its morphological, physiological, and biochemical properties and its 16S rRNA gene sequence. The degradation test showed that approximately 67.67% of the imidacloprid (50 mg/l) was degraded within 48 h by strain BCL-1. The optimum conditions for degradation were a pH of 8 and $30^{\circ}C$. The simulation of imidacloprid bioremediation by strain BCL-1 in soil demonstrated that the best performance in situ (tea soil) resulted in the degradation of 92.44% of the imidacloprid (100 mg/g) within 20 days, which was better than those observed in the ex situ simulations that were 64.66% (cabbage soil), 41.15% (potato soil), and 54.15% (tomato soil).
Here in this work, a 4-chlorophenol (4-CP)-degrading bacterial strain Bacillus subtilis (B. subtilis) MF447840.1 was isolated from the drain outside the Hyundai car service center, Agartala, Tripura, India. 16S rDNA technique used carried out for genomic recognition of the bacterial species. Isolated bacterial strain was phylogenetically related with B. subtilis. This strain was capable of breaking down both phenol and 4-CP at the concentration of 1,000 mg/L. Also, the isolated strain can able to metabolize five diverse aromatic molecules such as 2-chlorophenol, 2,4-dichlorophenol, 2,4,6-trichlorophenol, 4-nitrophenol, and pentachlorophenol for their growth. An extensive investigation was performed to portray the kinetics of cell growth along with 4-CP degradation in the batch study utilizing 4-CP as substrate. Various unstructured models were applied to evaluate the intrinsic kinetic factors. Levenspiel's model demonstrates a comparatively enhanced R2 value (0.997) amongst every analyzed model. The data of specific growth rate (μ), saturation constant (KS), and YX/S were 0.11 h-1, 39.88 mg/L, along with 0.53 g/g, correspondingly. The isolated strain degrades 1,000 mg/L of 4-CP within 40 h. Therefore, B. subtilis MF447840.1 was considered a potential candidate for 4-CP degradation.
This study was conducted to determine if YJ-1, a novel herbal complex from a mixture of six oriental herbs (Hydnocarpi Semen, Sesami Semen, Dictamni Radicis Cortex, Momordicae Semen, Xanthii Fructus, and Sophorae Radix), has therapeutic properties for the treatment of atopic dermatitis (AD). Using AD like symptom-induced NC/Nga mice by 1-chloro 2,4-dinitrobenzene (DNCB), the effectiveness of YJ-1 on AD was evaluated. Elidel cream$^{(R)}$ (1% pimecrolimus) was used as a control. Dermal application of YJ-1 reduced major clinical signs of AD such as erythema, pruritus, lichenification, edema/escoriations, and dryness. Interestingly, YJ-1 more improved AD-related symptoms including decrease of spleen weight, IL-4, and IgE level in the serum as well as reduction of scratching counts and clinical skin severity in the NC/Nga AD mouse model. Especially, treatment of YJ-1 at 20% in NC/Nga mice more effected than Elidel cream. These results suggest that the ointment of YJ-1 may enhance the process of AD healing by alleviating allergic reaction and has potential for therapeutic reagent for the treatment of AD.
Jung, Young Hak;You, Eun Ju;Ahn, Jong-Woong;Park, Jung-Joon;Choo, Young- Moo;Choo, Ho Yul;Lee, Dong Woon
Weed & Turfgrass Science
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제6권4호
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pp.355-358
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2017
Amur silver grass, Miscanthus sacchariflorus is one of the promising biofuel weeds. A damage of noctuid pest, Leucapamea askoldis was firstly observed from Amur silver grass in Hwasun silver grass plantation during the survey of insect pests of Amur silver grass in Iksan, Hwasun, and Sancheong plantation areas in Korea. The host of L. askoldis was not known yet in Korea. The L. askoldis damage was observed as larval feeding on newly grown shoots and roots of M. sacchariflorus close to soil surface from early May in 2013. Investigated larval density was $1.6{\pm}1.1per\;m^2$ on April 4 and damage rate of shoots was $0.8{\pm}0.4%$ on May 4, 2013. The larvae bore into shoots of M. sacchariflorus and feed on the inside of plant. The damaged shoots are easily pulled out and distinguished by the boring hole on the shoots. L. askoldis was potential insect pest in M. sacchariflorus plantation areas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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