본 연구에서는 한국의 닭에서 분리된 E. coli 균주들로부터 퀴놀론계 항생제 내성을 나타내는 균주를 분리 동정하고 그 내성 기전과 유병률에 관하여 조사하였다. 또한 multilocus sequence typing (MLST)을 이용하여 E. coli 균주들의 분자생물학적 성상을 분석하였다. 항생제 감수성 테스트에서 63.5% (54/85) 의 E. coli 균주들에서 퀴놀론계 항생제 내성률을 보였다. 또한 퀴놀론계 항생제 내성을 보이는 54개 모두에서 gyrA 유전자의 sense mutations과 parC 유전자의 $57^{th}$, $80^{th}$, or $84^{th}$residues에서 점돌연변이를 관찰할 수 있었다. MLST를 통한 분석에서 E. coli ST는 parE 유전자의 염기치환과 깊은 상관관계를 보이는 것으로 관찰되었다. 이 결과들을 바탕으로 우리가 먹는 가축 및 가금류에 대한 무분별한 항생제 사용은 항생제 내성균의 증가와 유전변이를 초래함을 알 수 있었다. 따라서 식용 동물에 대한 지속적인 감시와 모니터링을 통하여 항생제 내성균의 확산방지를 통제하는 것이 필요할 것으로 사료된다.
Objectives In this study, we investigated the antimicrobial activity of a 70% ethanol extract of Maneung-hwan (MEH), which is prescribed by practitioners of oriental medicine for use against methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Methods The antibacterial activity of MEH against MRSA strains was evaluated using the disc diffusion method, broth microdilution method (minimal inhibitory concentration, MIC), checkerboard dilution test, and time-kill test. The mechanism of action of MEH was investigated by bacteriolysis using detergents or ATPase inhibitors Additionally, mRNA and protein expression were investigated by quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction and western blot assay, respectively. Results The MIC of MEH was 25~1,600 ㎍/mL against all the tested bacterial strains. We showed that MEH extract exerts strong antibacterial activity. In the checkerboard dilution test, the fractional inhibitory concentration index of MEH in combination with antibiotics indicated synergism or partial synergism against S. aureus. The time-kill study indicated that the growth of the tested bacteria was considerably inhibited after a 24-h treatment with MEH and selected antibiotics. To measure the cell membrane permeability, MEH (3.9 ㎍/mL) was combined with Triton X-100 (TX) at various concentrations N,N-dicyclohexylcarbodimide (DCCD) was also tested as an ATPase inhibitor. TX and DCCD cooperation against S. aureus exhibited synergistic action. Accordingly, the antimicrobial activity of MEH in the context of cell membrane rupture and ATPase inhibition was assessed. Additionally, the expression of genes and proteins associated with resistance was reduced after exposing MRSA to MEH. Conclusions These results suggest that MEH possesses antibacterial activity and acts as a potential natural antibiotic against MRSA.
Kim, Jun-Seob;Cho, Da-Hyeong;Park, Myeongseo;Chung, Woo-Jae;Shin, Dongwoo;Ko, Kwan Soo;Kweon, Dae-Hyuk
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제26권2호
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pp.394-401
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2016
Recently, the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-associated protein 9 (CRISPR/Cas9) system, a genome editing technology, was shown to be versatile in treating several antibiotic-resistant bacteria. In the present study, we applied the CRISPR/Cas9 technology to kill extended-spectrum beta-lactamase (ESBL)-producing Escherichia coli. ESBL bacteria are mostly multidrug resistant (MDR), and have plasmid-mediated antibiotic resistance genes that can be easily transferred to other members of the bacterial community by horizontal gene transfer. To restore sensitivity to antibiotics in these bacteria, we searched for a CRISPR/Cas9 target sequence that was conserved among >1,000 ESBL mutants. There was only one target sequence for each TEM- and SHV-type ESBL, with each of these sequences found in ~200 ESBL strains of each type. Furthermore, we showed that these target sequences can be exploited to re-sensitize MDR cells in which resistance is mediated by genes that are not the target of the CRISPR/Cas9 system, but by genes that are present on the same plasmid as target genes. We believe our Re-Sensitization to Antibiotics from Resistance (ReSAFR) technology, which enhances the practical value of the CRISPR/Cas9 system, will be an effective method of treatment against plasmid-carrying MDR bacteria.
In this study, the prevalence of antibiotic resistance was examined among 74 Staphylococcus pseudintermedius strains recently isolated from clinical cases of canine pyoderma and otitis externa at the veterinary teaching hospital at Konkuk University, Korea. Bacterial resistance to the nine commonly used antibiotics was evaluated by a standard disk diffusion technique based on the guidelines of the Clinical and Laboratory Standards Institute. The results demonstrated that most S. pseudintermedius isolates were resistant to penicillin (95.9%) or tetracycline (91.9%), but highly susceptible to amoxicillin/clavulanic acid (90.5%). Among the 74 isolates, 13 mecA-positive and methicillin-resistant S. pseudintermedius (MRSP) strains were identified, displaying a high level of resistance (84.6-100%) to each of the individual antibiotics evaluated, with the exception of amoxicillin/clavulanic acid (46.2% resistance). Notably, all of the MRSP isolates exhibited simultaneous resistance to four or more different antibiotics, indicating that they are multiple drug resistant (MDR) strains. Taken together, these results imply that more careful selection or prescription of antibiotics for canine pyoderma and otitis externa should be required for reducing the emergence and/or spread of MDR strains, especially MDR-MRSP isolates, in veterinary pet clinics in Korea.
1998-1999년도에 걸쳐 총 238점의 고추 유전자원에 대하여 흰가루병에 대한 저항성을 검정한 결과, Capsicum baccatum에 속하는 KC604, 605, 606, 608, C. chinense에 속하는 KC616, C. pubescens에 속하는 KC638, 640, 641, 642, 643, 644가 발병하지 않을 정도로 고도의 저항성을 나타내었으며 C. annuum에 속하는 KC47-1(PI244670), KC319-1, KC545, KC320는 경미하게 발병하여 다소 저항성으로 나타났다. KC47-1, KC319-1, KC320은 Stemphylium spp.에 의한 고추 잎점무늬병에 저항성이며, 그 중 KC 47-1은 더뎅이병(Xanthomonas campestris pv. vesicatoria)에도 저항성이어서 이들 병에 복합저항성 육성도 가능할 것으로 기대된다.
Amin, Aatif;Sarwar, Arslan;Saleem, Mushtaq A.;Latif, Zakia;Opella, Stanley J.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권2호
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pp.274-282
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2019
Mercury-resistant ($Hg^R$) bacteria were isolated from heavy metal polluted wastewater and soil collected near to tanneries of district Kasur, Pakistan. Bacterial isolates AZ-1, AZ-2 and AZ-3 showed resistance up to $40{\mu}g/ml$ against mercuric chloride ($HgCl_2$). 16S rDNA ribotyping and phylogenetic analysis were performed for the characterization of selected isolates as Bacillus sp. AZ-1 (KT270477), Bacillus cereus AZ-2 (KT270478) and Bacillus cereus AZ-3 (KT270479). Phylogenetic relationship on the basis of merA nucleotide sequence confirmed 51-100% homology with the corresponding region of the merA gene of already reported mercury-resistant Gram-positive bacteria. The merE gene involved in the transportation of elemental mercury ($Hg^0$) via cell membrane was cloned for the first time into pHLV vector and transformed in overexpressed C43(DE3) E. coli cells. The recombinant plasmid (pHLMerE) was expressed and the native MerE protein was obtained after thrombin cleavage by size exclusion chromatography (SEC). The purification of fusion/recombinant and native protein MerE by Ni-NTA column, dialysis and fast protein liquid chromatography (FPLC/SEC) involved unfolding/refolding techniques. A small-scale reservoir of wastewater containing $30{\mu}g/ml$ of $HgCl_2$ was designed to check the detoxification ability of selected strains. It resulted in 83% detoxification of mercury by B. cereus AZ-2 and B. cereus AZ-3, and 76% detoxification by Bacillus sp. AZ-1 respectively (p < 0.05).
2020년 11월, 국내의 넙치 양식장에서 양식 중이던 넙치가 이상 유영 소견을 보이다가, 지속적으로 폐사하였다. 질병 진단 과정 중, 폐사어의 신장에서 세균(KNCFKW-PN1)이 분리되었다. gyrase B subunit 유전자의 시퀀스 분석 결과, KNCFKW-PN1 분리주는 기존에 보고된 LMG 2227T 균주의 해당 유전자 시퀀스와 99.59% 유사도를 보여 Pseudoalteromonas nigrifaciens 로 동정이 되었다. 항생제 감수성 실험 결과에 따르면, KNCFKW-PN1 분리주는 ciprofloxacin에 대하여 중등도의 내성을 나타내었고, ampicillin, cefepime, cefotaxime, ceftazidime, amikacin에 내성을 나타내었다. 본 사례는 다제 내성 Pseudoalteromonas nigrifaciens 세균이 넙치로부터 분리된 최고의 보고이다.
Kim, Byung Chan;Kim, Hyerim;Lee, Hye Soo;Kim, Su Hyun;Cho, Do-Hyun;Jung, Hee Ju;Bhatia, Shashi Kant;Yune, Philip S.;Joo, Hwang-Soo;Kim, Jae-Seok;Kim, Wooseong;Yang, Yung-Hun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제32권6호
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pp.730-739
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2022
Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) causes severe infections and poses a global healthcare challenge. The utilization of novel molecules which confer synergistical effects to existing MRSA-directed antibiotics is one of the well-accepted strategies in lieu of de novo development of new antibiotics. Thymol is a key component of the essential oil of plants in the Thymus and Origanum genera. Despite the absence of antimicrobial potency, thymol is known to inhibit MRSA biofilm formation. However, the anti-MRSA activity of thymol analogs is not well characterized. Here, we assessed the antimicrobial activity of several thymol derivatives and found that 4-chloro-2-isopropyl-5-methylphenol (chlorothymol) has antimicrobial activity against MRSA and in addition it also prevents biofilm formation. Chlorothymol inhibited staphyloxanthin production, slowed MRSA motility, and altered bacterial cell density and size. This compound also showed a synergistic antimicrobial activity with oxacillin against highly resistant S. aureus clinical isolates and biofilms associated with these isolates. Our results demonstrate that chlorinated thymol derivatives should be considered as a new lead compound in anti-MRSA therapeutics.
This study examined the antimicrobials properties of bacteria using the minimum inhibitory concentration method. The bacteria were isolated from 30 shellfish (oysters and short neck clams) collected from Jawol-myeon, Ongjin-gun, Incheon and Iwon-myeon, Taean-gun, Chungcheongnam-do, on the west coast of Korea. A total of 528 bacteria were isolated from June to October 2020 and were classified into land-originating (LB; 264 strains) and marine-originating (MB; 264 strains) bacterial groups. Of the LB strains, 10 genera were identified, of which nine were Enterobacteriaceae. All MB strains were identified as species of the genus Vibrio spp.. Antimicrobial resistance to one or more agents was observed in 77.3% of the LB strains, and 90-100% of them were resistant to ampicillin Escherichia spp. were not resistant to ampicillin. The overall multidrug resistance rate of the LB strains was 49.2%, with 85 resistance patterns. Antimicrobial resistance to one or more agents was observed in 98.1% of the MB strains, because most of the V. alginolyticus and V. parahaemolyticus strains were resistant to ampicillin. The overall multidrug resistance rate of the MB strains was 1.9% with 19 resistance patterns.
Purpose: Most cases of oral and maxillofacial infections are usually easily treated by proper diagnosis, elimination of causative factors, and antibiotic therapy. However, the emergence and the increase of multidrug-resistant bacteria make treatment challenging. "ESKAPE" pathogens are the most common opportunistic organisms in nosocomial infections and have resistant to commonly used antibiotics. There are many medical reviews of ESKAPE pathogens, but few in dentistry. This study focuses on oral and maxillofacial infection especially with ESKAPE pathogens. The purpose of this study is to prepare feasible data about tracing and treatment of infection related to pathogens that may be beneficial to clinicians. Methods: A total of 154 patients with oral and maxillofacial infections were reviewed by analyzing retrospectively hospitalized data in the Department of Oral and Maxillofacial surgery, Chosun University Hospital, Korea, past 5 years from January 2014 to December 2018. Based on the medical records and microbiological tests, the results were divided into two groups: infections with ESKAPE pathogens and other bacteria. Results: A total of 22 species were isolated from 154 patients. The proportion of ESKAPE pathogens among all bacterial isolates collected from infected patients was 39.6%. Causative factors, especially in post-operative infection, showed a statistically significant correlation to ESKAPE infections (29 cases). And average of treatment period in ESKAPE group was longer than non-ESKAPE groups. Overall, Klebsiella pneumoniae (60.7%) was the most frequently isolated ESKAPE pathogen. And high antibiotic resistance rates had been detected in the ESKAPE during the five-year period. Conclusions: Infections with ESKAPE pathogens are now a problem that can no longer be overlooked in Dentistry. Based on results of this study, ESKAPE pathogens were highly associated with post-operative or opportunistic infections. Clinicians should be careful about these antibiotic resistant pathogens and use appropriate antibiotics to patients while having dental treatments.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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