Flavobacterium johnsoniae was isolated from farmed rainbow trout Oncorhynchus mykiss in Korea, and its biochemical and molecular characterization was determined. Yellow-pigmented bacterial colonies were isolated from 18 of 64 fish samples (28.1%) on trypticase soy agar plates, and their biochemical profiles were characterized by API 20E and API 20NE test kits. F. johnsoniae was identified by biochemical phenotyping of factors including rapid gliding motility, Gram-negative condition, oxidase- and catalase-positive status, Congo red absorption, nitrate reduction, ${\beta}$-galactosidase production, acid production from glucose, and gelatin and casein hydrolysis. PCR and subsequent sequencing of 16S rRNA confirmed that the yellow-pigmented colonies were most similar to F. johnsoniae. The alignment analysis of 16S rRNA sequences also showed that all 18 rainbow trout isolates had highly similar homologies (97-99% identity). One isolate was selected and named FjRt09. This isolate showed 98% homology with previously reported F. johnsoniae isolates, and in phylogenetic analysis was more closely grouped with F. johnsoniae than with F. psychrophilum, F. columnare, or F. branchiophilum. This is the first report on the occurrence and biochemical characterization of F. johnsoniae isolated from rainbow trout in Korea.
A yellow, rod-shaped, non-motile, gram-negative, and strictly aerobic bacterial strain, designated LPB0005T, was isolated from a marine gastropod, Reichia luteostoma. Here the genome sequence was determined, which comprised 3,395,737 bp with 2,962 protein-coding genes. The DNA G+C content was 36.3 mol%. The 16S rRNA gene sequence analysis indicated that the isolate represents a novel genus and species in the family Flavobacteriaceae, with relatively low sequence similarities to other closely related genera. The isolate showed chemotaxonomic properties within the range reported for the family Flavobacteriaceae, but possesses many physiological and biochemical characteristics that distinguished it from species in the closely related genera Ulvibacter, Jejudonia, and Aureitalea. Based on phylogenetic, phenotypic, and genomic analyses, strain LPB0005T represents a novel genus and species, for which the name Cochleicola gelatinilyticus gen. nov., sp. nov. is proposed. The type strain is LPB0005T (= KACC 18693T = JCM 31218T).
Kyoung-Taek Park;Soo-Min Hong;Chang-Gi Back;In-Kyu Kang;Seung-Yeol Lee;Leonid N. Ten;Hee-Young Jung
Research in Plant Disease
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v.29
no.1
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pp.64-71
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2023
In October 2021, soft rot disease seriously affected radish crop in Dangjin, Chungcheongnam-do, Korea. The infected radishes were stunted and turned dark green, with yellowish leaf foliage. A slimy, wet, and decayed pith region was observed in the infected roots. The bacterial strain KNUB-03-21 was isolated from infected roots. The biochemical and morphological characteristics of the isolate were similar to those of Pectobacterium brasiliense. Phylogenetic analysis based on the sequences of the 16S rRNA region and the concatenated DNA polymerase III subunit tau (dnaX), leucine-tRNA ligase (leuS), and recombinase subunit A (recA) genes confirmed that the isolate is a novel strain of P. brasiliense. Artificial inoculation of radish with P. brasiliense KNUB-03-21 resulted in soft rot symptoms similar to those observed in infected radish in the field; subsequently, P. brasiliense KNUB-03-21 was reisolated and reidentified. To our knowledge, this is the first report of P. brasiliense as a causal pathogen of radish soft rot in Korea.
Kyoung-Taek Park;Soo-Min Hong;Chang-Gi Back;Young-Je Cho;Seung-Yeol Lee;Leonid N. Ten;Hee-Young Jung
Research in Plant Disease
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v.29
no.1
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pp.72-78
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2023
In September 2021, gray-to-brown discoloration and expanding water-soaked lesions were observed on the outer and inner layers and the core of kimchi cabbage (Brassica rapa subsp. pekinensis) in fields located in Samcheok, Gangwondo, Korea. A bacterial strain designated as KNUB-02-21 was isolated from infected cabbage samples. Phylogenetic analysis based on the sequences of the 16S rRNA region and the dnaX, leuS, and recA genes confirmed that the strain was affiliated with Pectobacterium versatile. Additionally, the biochemical and morphological profiles of the isolate were similar to those of P. versatile. Based on these results, the isolate was identified as a novel strain of P. versatile. Healthy kimchi cabbage slices developed soft rot upon inoculation with P. versatile KNUB-02-21 and exhibited symptoms similar to those observed in the diseased plants in fields. The re-isolated strains were similar to those of P. versatile. Prior to our study, P. versatile as the causative pathogen of kimchi cabbage soft rot had not been reported in Korea.
The objective of this study was to identify bacterial antagonists of R. solani AG2-2 (IV) on zoysiagrass and to evaluate their antifungal activity in vitro and in vivo to select an antagonistic isolate. Antagonistic isolates that inhibit large patch disease caused by R. solani AG2-2 (IV) in zoysiagrass were selected from several soils, and their antagonistic activities were investigated in vitro and in vivo. Of 216 bacterial isolates, 67 inhibited several plant pathogenic fungi. The isolates that inhibited stem-segment colonization by R. solani AG2-2 (IV) in zoysiagrass were tested in a growth chamber. Eleven isolates were active as plant growth promoting isolates. Among them, five plant growth promoting isolates and their concentration dependent efficiency on zoysiagrass following inoculation with R. solani AG2-2 (IV) was evaluated. Isolate H33 was one of the potential antagonistic isolates, and it was further tested against various plant pathogens. H33 not only suppressed the disease caused by R. solani AG2-2 (IV) on zoysiagrass but also promoted leaf weight and leaf height of zoysiagrass under growth chamber and greenhouse conditions. The H33 isolate, which belongs to Streptomyces arenae, was identified through physiological, biochemical, and 16S rDNA studies. Further studies will investigate the cultural characterization of S. arenae H33 and isolation and identification of antifungal substance produced by S. arenae H33.
To isolate alga-lytic bacteria, a number of samples were collected from Lake of Sukchon and Pal'tang reservoir where cyanobacteria blooming occurred. HY0210-AK1, which exhibited high alga-lytic activity, was isolated using Anabaena cylindrica lawn. The morphological and biochemical characteristics of the isolate HY0210-AK1 were very similar to that of the genus Rhizobium. Taxonomic identification including 16S rDNA base sequencing and phylogenetic analysis indicated that the isolate Hy0210-AK1 had a 99.1% homology in its 16S rDNA babe sequence with Sphingobium herbicidovorans. A. cylindrica NIES-19 was susceptible to the alga-lytic bacterial attack. The growth-inhibiting offset of the bacterium was not different on A. cylindrica NIES-19 when Sphingobium herbicidovorans HY0210-AK1 was in the lag, exponential, and stationary growth phase, although the alga-Iytic effect of S. herbici-dovorans HY0210-AK1 that in stationary growth phase was somewhat pronounced at the first time of inoculation. When S. herbicidovorans HY0210-AK1 was inoculated was inoculated with $1\times 10^{8}$ CFU $ml^{-1}$ together with A cylindrica NIES-19, the bacterium proliferated and caused algal lysis. A. cylindrica NIES-19 died when S. herbicidovorans HY0210 AKl was added to the algal culture but not when duly the filtrates from the bacterial culture was added. This suggests that extracellular substances are not responsible for inhibition of A. cylindrica NIES-19 and that algal Iysis largely attributed to direct interaction between S. herbicidovorans HY0210-AK1 and A. cylindrica NIES-19. The alga-lytic bacterium HY0210-AK1 caused cell lysis and death of three strain of Micro-cystis aeruginosa, but revealed no alga-Iytic effects on the Stephanodiscus hantzschii.
Bacteriophages are viruses that exclusively infect bacterial cells, and lytic bacteriophages can be used as a safe alternative to antibiotics for the prevention and treatment of animal diseases. In this study, we attempted to isolate and characterize bacteriophages for Salmonella enterica serovar Gallinarum (Salmonella Gallinarum), the causative agent of fowl typhoid in chickens. Ten bacteriophages were isolated from samples of sewage from seven poultry slaughterhouses. One of these isolate, designated as $SG{\Phi}-YS$ SP and classified in the family Myoviridae, produced plaques with seven Salmonella Gallinarum strains. However, no plaques were produced with any of the Salmonella enterica serovar Enteritidis strains tested, suggesting that this bacteriophage is Salmonella Gallinarum specific. To assess the lytic ability of $SG{\Phi}-YS$ SP against Salmonella Gallinarum, bacterial growth rates following inoculation of the bacteriophage were compared with the control. The $SG{\Phi}-YS$ SP treatment, with a multiplicity of infection of 10, reduced the growth of Salmonella Gallinarum by 2.21 log cfu/mL at 6 h, and 2.13 log cfu/mL at 9 h, suggesting that this bacteriophage isolate could be used for the prevention or treatment of Salmonella Gallinarum infection in chickens.
Small round structured viruses (SRSV) are the major ethological agents which can cause outbreaks of non-bacterial gastroenteritis or food poisoning both in children and adults. The classification of family Caliciviridae to which SRSV belong, is based on the genome encoding three open reading frames. The rotavirus is another major pathogen which causes diarrhea in young children. We examined stool specimens obtained from diarrheal patients in Wonju from which bacterial pathogens were not found. To detect causative viruses from stool specimens of patients, reverse transcription (RT)-polymerase chain reaction (PCR) or nested PCR using rotavirus or SRSV specific primers was performed. In this study, RT-nested PCR procedure which can amplify a 330 bp fragment derived from RNA dependent RNA polymerase (RDRP) region within ORF1 was applied for the detection of SRSV. For the detection of rotaviruses, a 877 bp fragment from the VP4 region of rotavirus genome was amplified. As a result, rotavirus was not detected while SRSV sequences were detected from one out of five specimens. The nucleotide and amino acid sequences of the Wonju isolate were compared with other 6 Korean isolates which have been isolated and sequenced in our laboratory. Sequence analysis revealed that the Wonju isolate was rather distinct from other Korean isolates: the Wonju isolate was closer to genogroup I of SRSV while other 6 Korean isolates belonged to genogroup II.
Thirty-three bacterial and fungal strains were isolated from the rotten soybeans and soybean sprouts to isolate pathogenic microorganisms which cause soybean sprouts rot during soybean sprouts cultivation. In pathogenicity tests of the isolates on soybean sprouts, two isolates(K-17 and K-28) caused soybean sprouts rot and were identified as Erwinia carotovora and Fusarium sp., respectively. To isolate antagonists aganist K-17 and K-28 pathogens, bacteria were isolated from various soybean-cultivated soils and screened by the inhibition zone method. A bacterial isolate(J-232) which inhibited growth of both pathogens was identified as Pseudomonas fluorescens and further examined. The culture filtrate of P. fluorescens J-232 (dilution rate of 500 times) inhibited the growth of Erwinia carotovora K-17 and Fusarium sp. K-28 both on potato dextrose agar medium and on soybean sprouts cultivated in vessel. The development of soybean sprouts rots was observed during cultivation by inoculation of soybean seeds with culture filtrate of both pathogens. The combined inoculation of soybean seeds with culture filtrate of antagonistic bacterium and that of pathogens prevented soybean sprouts rot, and the growth of soybean sprouts was similar to that of control. The soybean sprouts inoculated with antagonists culture filtrate alone did not develop soybean sprouts rot, and the growth of the seedlings was shown to be slightly promoted as compared with that of control.
In the acidic LB plate, a bacterial strain was isolated from homemade soybean paste as a producer of the extracellular mannanase. The isolate YB-1402, which was a Gram-positive rod-shaped bacterium with spore, has been identified as Bacillus amyloliquefaciens on the basis of its 16S rDNA sequence and biochemical properties. Maximum mannanase productivity of the isolate YB-1402 was reached approximately 150 U/ml in LB broth supplemented with konjac (3.0%). The molecular mass of YB-1402 mannanase was estimated to approximately 38.0 kDa by zymogram of the culture filtrate on SDS-PAGE. The mannanase of culture filtrate was the most active at $55^{\circ}C$ and pH 5.5. The mannanase activity was completely maintained after pre-incubation at pH 3.0 to 10.0 for 1 h. The predominant products resulting from the mannanase hydrolysis were mannose, mannobiose and mannotriose for LBG or mannooligosaccharides. The enzyme could hydrolyze mannooligosaccharides larger than mannobiose.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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