지질매체에서 흔하게 발견되는 호기성 박테리아인 Pseudomonas aeuginosa에 대하여 영양분을 공급하지 않은 상태에서 As(V) 및 As(III) 흡착실험을 수행하였다. As(111)의 경우 P. aeruginosa에 의한 소규모의 흡착이 관찰된 반면, As(V)는 효과적인 흡착이 적용되지 않음을 확인할 수 있었다 이는 As(V)는 수용액 상태에서 음전하 화합물로 존재하고 박테리아 표면 역시 음전하를 띠고 있기 때문에 상호 인력이 작용하지 않기 때문인 것으로 파악된다. 그러나 바이오필름 상태의 박테리아는 많은 양의 용존 As(V)를 As(III)로 환원하는 것으로 나타났다. 이는 빈영양 환경인 대부분의 지질환경에서도 미생물이 용존 비소의 거동에 미치는 영향이 크다는 것을 의미한다. 다양한 중금속으로 오염된 지하수를 처리하기 위하여 구축된 미생물 반응벽체는 비소의 흡착을 촉진하기보다는 오히려 비소의 독성과 이동도를 증가시키는 부의 효과를 유도할 수도 있다.
Chronic/cyclic neutropenia, leukocyte adhesion deficiency syndrome, Papillon-$Lef{\grave{e}}vre$ syndrome, and $Ch{\grave{e}}diak$-Higashi syndrome are associated with severe periodontitis, suggesting the importance of neutrophils in the maintenance of periodontal health. Various Toll-like receptor (TLR) ligands are known to stimulate neutrophil function, including FcR-mediated phagocytosis. In the present study, the effect of TLR2 activation on the non-opsonic phagocytosis of oral bacteria and concomitant production of reactive oxygen species (ROS) by human neutrophils was evaluated. Neutrophils isolated from peripheral blood were incubated with Streptococcus sanguinis or Porphyromonas gingivalis in the presence of various concentrations of $Pam_3CSK_4$, a synthetic TLR2 ligand, and analyzed for phagocytosis and ROS production by flow cytometry and chemiluminescence, respectively. $Pam_3CSK_4$ significantly increased the phagocytosis of both bacterial species in a dose-dependent manner. However, the enhancing effect was greater for S. sanguinis than for P. gingivalis. $Pam_3CSK_4$ alone induced ROS production in neutrophils and also increased concomitant ROS production induced by bacteria. Interestingly, incubation with P. gingivalis and $Pam_3CSK_4$ decreased the amounts of ROS, as compared to $Pam_3CSK_4$ alone, indicating the possibility that P. gingivalis survives within neutrophils. However, neutrophils efficiently killed phagocytosed bacteria of both species despite the absence of $Pam_3CSK_4$. Although P. gingivalis is poorly phagocytosed even by the TLR2-activated neutrophils, TLR2 activation of neutrophils may help to reduce the colonization of P. gingivalis by efficiently eliminating S. sanguinis, an early colonizer, in subgingival biofilm.
Nagendrababu, Venkateshbabu;Sultan, Omer Sheriff;Kannathasan, Sreedharan;Patel, Amir Shahreza;Chitra, Ebenezer;Neelakantan, Prasanna;Davamani, Fabian
Restorative Dentistry and Endodontics
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제43권1호
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pp.1.1-1.8
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2018
Objectives: To determine the effect of root canal irrigants on the hydrophobicity and adherence of Staphylococcus epidermidis (S. epidermidis) to root canal dentin in vitro. Materials and Methods: Root dentin blocks (n = 60) were randomly divided into 4 groups based on the irrigation regimen: group 1, saline; group 2, 5.25% sodium hypochlorite (NaOCl); group 3, 5.25% NaOCl followed by 17% ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA); group 4, same as group 3 followed by 2% chlorhexidine (CHX). The hydrophobicity of S. epidermidis to root dentin was calculated by cell surface hydrophobicity while the adherence was observed by fluorescence microscopy, and bacteria were quantified using ImageJ software (National Institutes of Health). Statistical analysis of the data was done using Kruskal-Wallis test and Mann-Whitney U test (p = 0.05). Results: The hydrophobicity and adherence of S. epidermidis to dentin were significantly increased after irrigating with group 3 (NaOCl-EDTA) (p < 0.05), whereas in group 4 (NaOCl-EDTA-CHX) both hydrophobicity and adherence were significantly reduced (p < 0.05). Conclusions: The adherence of S. epidermidis to dentin was influenced differently by root canal irrigants. Final irrigation with CHX reduces the bacterial adherence and may impact biofilm formation.
Hamzah, Haider M.;Salah, Reyam F.;Maroof, Mohammed N.
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제28권10호
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pp.1654-1663
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2018
Finding a safe and broad-spectrum medication is a goal of scientists, pharmacists, and physicians, but developing and fabricating the right medicine can be challenging. The current study describes the formation of silver nanoparticles (AgNPs) by Fusarium mangiferae. It involves the antibiofilm activity of the nanoparticles against Staphylococcus aureus. It also involves cytotoxic effect against mammalian cell lines. Well-dispersed nanoparticles are formed by F. mangiferae. The sizes of the nanoparticles were found to range from 25 to 52 nm, and UV-Vis scan showed absorption around 416-420 nm. SEM, TEM, and AFM results displayed spherical and oval shapes. Furthermore, the FTIR histogram detected amide I and amide II compounds responsible for the stability of AgNPs in an aqueous solution. AgNPs were observed to decrease the formation of biofilm at 75% (v/v). DNA reducing, smearing, and perhaps fragmentation were noticed after treating the bacterial cells with 50% (v/v). Additionally, cell lysis was detected releasing proteins in the supernatant. It was also observed that the AgNPs have the ability to cause 59% cervical cancer cell line (HeLa) deaths at 25% (v/v), however, they showed about 31% toxicity against rat embryo fibroblast transformed cell lines (REF). The results of this study prove the efficiency of AgNPs as an antibiofilm against S. aureus, suggesting that AgNPs could be an alternative to antibiotics. It must also be emphasized that AgNPs displayed cytotoxic behavior against mammalian cell lines. Further studies are needed for assessing risk in relation to the possible benefit of prescribing AgNPs.
Dental plaque, a biofilm consisting of more than 500 different bacterial species, is an etiological agent of human periodontal disease, It is therefore important to characterize interactions among periodontopathic microorganisms in order to understand the microbial pathogenesis of periodontal disease. Previous data have suggested a synergistic effect of tow major periodontal pathogens Porphyromonas gingivalis and Tannerella forsythia in the periodontal lesion. In the present study, to better understand interaction between P. gingivalis and T. forsythia, the coaggregation activity between these bacteria was characterized. The coaggregation activity was observed by a direct visual assay by mixing equal amount (1 ${\times}$$10^9$)of T. forsythia and P. gingivaJis cells. It was found that the first aggregates began to appear after 5-10 min, and that the large aggregates completely settled within 1 h. Electron and epifluorescence microscopic studies confirmed cell-cell contact between two bacteria. The heat treatment of P. gingivalis completely blocked the activity, suggesting an involvement of a heat-labile component of P. gingivalis in the interaction. On the other hand, heat treatment of T. forsythia significantly increased the coaggregation activity; the aggregates began to appear immediately. The coaggregation activity was inhibited by addition of protease, however carbohydrates did not inhibit the activity, suggesting that coaggregation is a protein-protein interaction. The results of this study suggest that coaggregation between P. gingivalis and T. forsythia is a result of cell-cell physical contact, and that coaggregation is mediated by a heat-labile component of P. gingivalis and T. forsythia component that can be activated on heat treatment.
Recently, quorum sensing has been implicated as an important global regulator controlling the production of numerous virulence factors such as capsular polysaccharides in bacterial pathogens. The nucleotide and deduced amino acid sequences of smcR, a homolog of V. harveyi luxR identified from V. vulnificus ATCC29307, were analyzed. The amino acid sequence of SmcR from V. vulnificus was 72 to 92% similar to those of LuxR homologs from Vibrio spp. Functions of SmcR were assessed by the construction of an isogenic mutant, whose smcR gene was inactivated by allelic exchanges, and by evaluating its phenotype changes in vitro and in mice. The disruption of smcR resulted in a significant alteration in biofilm formation, in type of colony morphology, and in motility. When compared with the wild-type, the smcR mutant exhibited reduced survival under adverse conditions, such as acidic pH and hyperosmotic stress. The smcR mutant exhibited decreased cytotoxic activity toward INT 407 cells in vitro. Furthermore, the intraperitoneal $LD_{50}$ of the smcR mutant was approximately $10^2$ times higher than that of parental wild-type. Therefore, it appears that SmcR is a novel global regulator, controlling numerous genes contributing to the pathogenesis as well as survival of V. vulnificus.
Angel, Laura Iztacihuatl Serrano;Segura, Daniel;Jimenez, Jeiry Toribio;Barrera, Miguel Angel Rodriguez;Pineda, Carlos Ortuno;Ramirez, Yanet Romero
한국미생물·생명공학회지
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제48권2호
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pp.185-192
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2020
The global carbon storage regulator (Csr) system is conserved in bacteria and functions as a regulator in the exponential and stationary phases of growth in batch culture. The Csr system plays a role in the central carbon metabolism, virulence, motility, resistance to oxidative stress, and biofilm formation. Although the Csr was extensively studied in Gram negative bacteria, it has been reported only in the control of motility in Bacillus subtilis among Gram positive bacteria. The goal of this study was to explore the role of the csrA gene of Bacillus licheniformis M2-7 on motility and the bacterial ability to use hydrocarbons as carbon source. We deleted the csrA gene of B. licheniformis M2-7 using the plasmid pCsr-L, harboring the spectinomycin cassette obtained from the plasmid pHP45-omega2. Mutants were grown on culture medium supplemented with 2% glucose or 0.1% gasoline and motility was assessed by electron microscopy. We observed that CsrA negatively regulates motility by controlling the expression of the hag gene and the synthesis of flagellin. Notably, we showed the ability of B. licheniformis to use gasoline as a unique carbon source. Our results demonstrated that CsrA is an indispensable regulator for the growth of B. licheniformis M2-7 on gasoline.
Zafar, Fahad;Romano, Federica;Citterio, Filippo;Ferrarotti, Francesco;Dellavia, Claudia;Chang, Moontaek;Aimetti, Mario
Journal of Periodontal and Implant Science
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제51권4호
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pp.276-284
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2021
Purpose: The aim of this randomized clinical trial was to assess whether chemical cleansing using a sulfonic/sulfuric acid gel solution (HBX) as an adjunct to scaling and root planing (SRP) resulted in a decrease in residual plaque and calculus in deep periodontal pockets compared to SRP alone. Methods: Fifty-six patients with 56 hopeless posterior teeth, scheduled for extraction due to severe periodontitis, were enrolled in this study. Each tooth was randomly assigned to 1 of the 2 experimental procedures. The test teeth were subjected to the irrigation of the subgingival area with HBX for 2 minutes, followed by SRP with hand and ultrasonic instruments for 14 minutes, and then extracted. The control teeth received only mechanical instrumentation before extraction. Residual biofilm was evaluated on photographs and measured as total area and percentage of root surface covered by remaining plaque (RP) or calculus (RC) after treatment. Results: The initial pocket depth (PD) and total subgingival root surface area were similar between the 2 treatment groups. After treatment, the total subgingival root area covered by RP and RC was statistically significantly larger (P<0.001) in the control group than in the test group. The test teeth showed a lower percentage of RP, but a higher percentage of RC than the control teeth (both P<0.001). Complete calculus removal was achieved in 42% of the control teeth surfaces and in 25% of the test teeth surfaces for a PD of 4 mm. Conclusions: The additional chemical cleansing with HBX resulted in a statistically significant improvement in bacterial plaque removal during SRP of deep pockets, but it was not effective in reducing calculus deposits.
Kim, Eunsuk;Park, Soyeon;Cho, Seongbeom;Hahn, Tae-Wook;Yoon, Hyunjin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제29권6호
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pp.962-972
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2019
Non-typhoidal Salmonella (NTS) is one of the most frequent causes of bacterial foodborne illnesses. Considering that the main reservoir of NTS is the intestinal tract of livestock, foods of animal origin are regarded as the main vehicles of Salmonella infection. In particular, poultry colonized with Salmonella Typhimurium (S. Typhimurium), a dominant serotype responsible for human infections, do not exhibit overt signs and symptoms, thereby posing a potential health risk to humans. In this study, comparative genomics approaches were applied to two S. Typhimurium strains, ST1539 and ST1120, isolated from a duck slaughterhouse and a pig farm, respectively, to characterize their virulence and antimicrobial resistance-associated genomic determinants. ST1539 containing a chromosome (4,905,039 bp; 4,403 CDSs) and a plasmid (93,876 bp; 96 CDSs) was phylogenetically distinct from other S. Typhimurium strains such as ST1120 and LT2. Compared to the ST1120 genome (previously deposited in GenBank; CP021909.1 and CP021910.1), ST1539 possesses more virulence determinants, including ST64B prophage, plasmid spv operon encoding virulence factors, genes encoding SseJ effector, Rck invasin, and biofilm-forming factors (bcf operon and pefAB). In accordance with the in silico prediction, ST1539 exhibited higher cytotoxicity against epithelial cells, better survival inside macrophage cells, and faster mice-killing activity than ST1120. However, ST1539 showed less resistance against antibiotics than ST1120, which may be attributed to the multiple resistanceassociated genes in the ST1120 chromosome. The accumulation of comparative genomics data on S. Typhimurium isolates from livestock would enrich our understanding of strategies Salmonella employs to adapt to diverse host animals.
본 연구의 목적은 교내 실습실의 유니트체어 수관의 바이오필름을 채취하여 미생물을 분석하고, 기존적인 물빼기방법과 소독제를 사용하는 방법을 적용하여 미생물 수의 변화를 비교하고자 실시하였다. 교내의 수관으로부터 샘플을 채취한 후 R2A배지를 이용하여 배양하였다. 미생물 동정을 거쳐 분리된 미생물의 균종을 분석하였다. 물빼기에 대한 미생물 감소를 확인하기 위해 30초, 60초, 120초 간격으로 샘플을 채취하였고, 소독제의 효과를 확인하기 위해 소독 후 샘플을 채취하였다. 이렇게 수거된 샘플을 통해 얻은 미생물의 정량적 비교는 SPSS 프로그램을 이용하였다. 결과에서 동정된 균주는 총 8개로 나타났으며 대부분 그람음성인 Sphingomonas 계열로 확인되었다. 60초의 물빼기를 통해 미생물의 수가 급감하는 것을 확인하였고, 소독 즉시 미생물은 검출되지 않았다. 본 연구에서 제시된 방법과 결과를 바탕으로 소홀하게 관리될 수 있는 유니트체어의 수관을 관리함으로써 교차 감염을 예방하고 체계적인 관리가 가능할 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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